Enzymes (Biochimie)< Flashcards
Quels sont les grands groupes d’enzymes:
- enzymes plasmatiques spécifiques: prothrombine, FV, FVII, X
- enzymes cellulaires: LD, AST, ALT, ALP
- enzymes sécrétés (glandes exocrines): lipase, alpha amylase, trypsinogène
Quel est la classe 1 des enzymes:
oxydoréductase
Quelle est la classe 2 des enzymes:
Transéfrase
Quelle est la classe 3 des enzymes:
Hydrolase
Quels enzymes font partieu de la classe transférase:
- gamma-glutamyl transférase
- aspartate aminotransférase
- alamine aminotransférase
- hexokinase
- pyruvate kinase
- créatine kinase
Quels enzymes font partie de la classe oxydoréductase:
- lactate déshydrogénase
- glucose-6-phosphate déshydrogénase
Quels enzymes font partie de la classe hydrolase:
- triacylglycérol lipase
- alcaline phosphatase
- acide phosphatase
Profil cardiaque:
- AST (aspartate transférase)
- CK (créatine kinase)
- LD (lactate désydrogénase)
Profile du foie:
- ALT (alanine transférase)
- AST (aspartate transférase)
- ALP (phosphatatse alcaline)
- GGT (gamma glutamyl transférase)
- LD (lactate désydrogénase)
Profil des muscles squelettique:
- LD (lactate désydrogénase)
- CK (créatine kinase)
Quels sont les agents dénatureurs:
- température au dessus de 60oC
- pH extrêmes
- agitation violentes
- certains métaux (Hg)
Profil pancréatique:
- AMS (amylase)
- LPS (lipase)
Quels sont les différents types d’activateur:
- ion métallique
- coenzyme
- groupement prosthétique
Comment s’appelle un enzyme actif:
Holoenzyme
Comment s’appelle un enzyme non actif:
Apoenzyme
Quels sont les 6 classes enzymatiques:
- oxydoréductase: enzyme qui catalyse les réactions d’oxydoréduction
- transférase: enzyme qui transfère un groupement X autre que l’hydrogèene d’un composé à un autre
- hydrolase: catabolisent l’hydrogène des composés par fixation d’une molécule d’eau
- lyase: catalysent la rupture de groupements chimiques de liaisons C-C, C-N, C-O, C-S par des mécanismes autre que l’hydrolyse
- isomérase ou mutase: catalysent le transfert d’atomes ou groupement d’atomes dans une molécule
- ligase: enzymes condensantes qui catalysent entre deux molécules
Quels sont les deux types de site actif:
- adaptation induite: Koshland
- clé et serrure: Fisher
Courbe de Michaelis-Menten:
Démontre la relation entre la vitesse d’une réaction enzymatique et la concentration du substrat, si la concentration d’enzyme est constante. p.20
Significat9ion de Km:
Concentration en substrat pour laquelle la moitié des sites actifs sont occupés.
Courbe de Linewaver-Burk:
Transformation de l’équationm de Michaelis en une équation qui donne une droite.
La plupart des enzymes du sang ont quel pH:
entre 7-8
Comment on choisit le tampon:
Comme le tampons ont une capacité de tampon maximum près de leur pKa, on choisit le tampon dont le pKa est voisin à +- 1 unité pH du pH choisi pour le dosage.
Quel est la température où on fait le dosage de la plupart des enzymes:
30 ou 37oC
Entreposage du spécimen pour le dosage d’enzymes:
L’entreposage à basse température permet de minimiser les pertes d’activités enzymatiques en alternant l’analyse mais la congélation et décongélation doivent être évités.
Inhibition compétitive:
L’inhibiteur a une analogie structurale avec le substrat et entre en compétition pour se fixer au niveau du site actif.
L’inhibiteur non compétitif:
Se fixe sur l’enzyme à un site différent du substrat et empêchent la formation du produit.
L’inhibition incompétitive:
L’inhibiteur interfère avec la liaison du substrat avec l’enzyme et sa dégradation subséquente.
Quel est l’ancien nom de AST:
SGOT ou GOT
Quel est l’ancien nom de ALT:
SGPT ou GPT
Fonctionnement de ALT:
alanine (acide aminé) + alpha cétoglutarate (cétone) — ALT (enzyme) P5P (cofacteur) —-> pyruvate (cétone) + glutamate (acide aminé)
pyruvate + NADH + H — LD —> + NAD+
ALT transfère NH4
Fonctionnement de AST:
L-aspartate (acide aminé) + alpha céto glutarate (cétone) — AST (enzyme), P5P (cofacteur) —> oxaloacétate (cétone) + L glutamate (acide aminée)
oxaloacétate + NADH + H — MD (maltate déshydrogénase) —> lactate + NAD+
AST a transférer un NH4
Est ce ALT ou AST qui est plus spécifique pour les maladies hépatiques:
ALT est plus spécifique que AST
AST et ALT après un infarctus du myocarde:
Il y a une augmentation substantielle d’AST alors que ALT sérique n’est pas affectée de facon importante.
Rapport ALT/AST:
- < 1.0 après un infarctus du myocarde
- > 1.0 au cours de maladies hépatiques
Quand AST augmente-il:
- maladies du foie, surtout hépatocellulaire
- infarctus du myocarde
- dystrophiles musculaires
Spécimens pour analyser AST et ALT:
- l’hémolyse du spécimen est non valable
- plasma sur héparine, EDTA, citrate, oxalate sont acceptables
- stable à 4oC pour 1-3 jours
- stable à -20oC pour 2 semaines
- ALT ne devrait pas être congelé puisque l’enzyme résiste mal à la décongélation
Le substrat doit contenir quoi lors du transfert du GGT:
Le substrat doit contenir un grouple gamma glutamyl (glutamate) pour le transfert.
Où le GGT est présent:
Chez toutes les cellules sauf celles du muscle, surtout lié à la membrane cellulaire. Elle est en haute concentration dans les reins, foie et pancréas.
GGT augmente:
Dans toutes les pathologies hépatiques, spécialement dans l’obstruction (5-30 fois la normale)
Quel est l’enzyme le plus sensible du foie:
GGT car il augmente plus tôt et persiste plus longtemps chez les pathologies hépatobiliaires.
Pourquoi on utiliserait GGT au lieu d’ALP:
Parce qu’il donne la même information diagnostique et GGt n’augmente pas dans les maladies osseuses.
Les phosphatatses sont généralement divisées en 3 groupes:
- ALP: foie, os (ostéoblastes), placenta, intestin
- ACP: prostate (beaucoup de faux positifs)
- ACP: cellules routes
Augmentation ALP:
ALP du aux désordres des os est vue dans les maladies:
- Paget (ostéites déformans)
- ostéomalacie
- rickets
- hyperparathryoidisme
- sarcome
Comment fait-on pour distinguer les isoenzymes ALP et ACP:
Par électrophorèse ou l’inactivation par la chaleur ou inhibition chimique.
Spécimen pour ALP:
- sérum non hémolysé ou plasma hépariné (pas EDTA en cause du Mg)
- doser immédiatement car l’activité augmente durant l’entreposage
Spécimen pour ACP:
- sérum non hémolysé et séparé du culot sanguin pour prévenir l’augmentation d’ACP provenant des plaquettes
- l’activité diminue rapidement, doser immédiatement, stable si acidifié à un pH
- spécimen doit être placé sur la glace
G6PD:
- Présent dans les GR
- diminue dans déficience en G6PD
- augmente dans l’anémie hémolytique
Quand l’aldolase augmente:
Surtout associé à la dystrophie musculaire progressive.
Quel enzyme est le plus spécifique aux pathologies hépatiques:
5 nucléotidase phosphatase (5 NTP)
Quelle est la quanitté d’infarctus silencieuse:
20%
Est-ce qu’il y a plus de mitochondries dans le coeur ou les muscles squelettiques:
40% de plus dans le coeur
Quand fait-on les tests en série après l’infarctus:
2-4h
6-8h
12h
Est-ce qu’une augmentation de CK indique automatiquement un infarctus du myocarde:
Non, car le CK est proportionnel à la totalité de la masse musculaire corporelle.
C’est quoi le CKMB:
Isoenzyme de la CK beaucoup plus spécifique au muscle cardiaque.
Comment la créatine kinase est utilisé dans le corps:
Cr + ATP + Mg (activateur obligatoire) – CK –> ADP + phosphocréatine
Quels sont les isoenzymes de la CK:
BB: cerveau
MB: coeur
MM: muscle squelettique
Électrophorèse des isoenzymes de CK:
- MM (plus large, moin loins)
- MB
- BB (moins large, plus loin)
Proportion des isoenzymes de CK dans un sérum normal:
- MM: 95%
- MB: < 6%
- BB: non détectable
Qu’est ce qui inhibe la réaction de la créatinine kinase:
Plusieurs métaux comme Mn, Ca, Z, Cu
Interprétation de la CK totale:
- infarctus
- dystrophie musculaire
- syndrome Reye
- traumatisme musculaire: la plus sensible
Sources d’erreur de CK:
- La lumière
- hémolyse sévère augment les valeurs de CK parce que les cellules rouges sont riches en AK (adélynate kinase) qui réagit de la même facon
Réaction du lactate désydrogénase:
L-Lactate + NAD – LD–> pyruvate + NADH
Sources d’erreur du LD:
- hémolyse augmente les niveaux
- réfrigération dénénère l,activité de LDH
- stable température de la pièce 24 heures
Où retrouve-on LD:
Foie et msucles squelettiques
Quels sont les isoenzymes du LD:
- LD1: coeur
- LD2: rein
- LD3: poumon
- LD4: foie
- LD5: foie
LD flip:
Graphique représentant un infarctus du myocarde
Quel isoenzyme du LD est en grande quantité dans les globules rouges:
LD1
Est-ce que la myoglobine est plus sensible que CK et CKMB durant l’infarctus:
Oui, durant les premières heures après les sympotmes débutent.
Quand la myoglobine commence à augmeter arpès un infarctus:
1 heure
Comment on exclus un infarctus en se basant sur la myoglobine:
Si la myogoboine est encore normale après 8 heures après le début des symptomes, l’infarctus est exclu.
Quand préfère-on évaluer la CKMB au lieu de la myoglobine:
- si le patient est admis plus tard que 10-12 heures car la myoglobine pourrait avoir eu redevenue à la normale
- si le patient qui est atteint d’une insuffisance rénale car la myoglobine est normalement clairée par les reins en 24 heures
Rôle de l,analyse de la troponine T:
Alloue pour le diagnostique tôt et tard dans les infarctus aigue.
Évolution de la troponine T:
- débute dans les premières heures
- pique à jour 2
- revient à la normale en 7 jours
Comment haut s’élève la troponinte T:
100x la normale
TnT nous démontre:
Indique spécifiquement l’extension du dommage cardiaque opposé au dommage musculaire.
TnI:
Seulement retrouvé dans le myocarde chez les adultes donc extrêmement spécifique pour les maladies cardiaques.
Quel commence très tot mais diminue rapidement dans l’infarctus cardiaque:
Myoglobine
Quel monte très haut et demeure longtemps durant un infarctus cardiaque:
TnT et TnI
Plusieurs facteurs contribuent à élever le risque d’infarctus du myocarde:
- age
- antécédents familiaux d’infarctus précoces
- sexe masculin
- taux de cholestérol élevé
- hypertension
- diabète
- obésité
- tabagisme
Pancréatite aigue:
Inflammation et la nécrose provoquent la libération d’enzymes digestives dans le sang. Il y a destruction du pancréas et des organes environnants.
Pancréatite chronique:
Destruction progressive des cellules du pancréas
Quels sont les causes de pancréatities:
- alcoolisme aigue ou chronique
- maladies du tractus biliaire
- traumatisme, toxines, méicaments, hyperlipidémie
- 10% des cas: cause inconnue
Dosage pour déterminer une pancréatite aigue:
- amylase et lipase élevée
- calcium souvent abaissé car il est souvent utilisé par la lipase en formation des savons de calcium avec les acides gras
Dosage pour déterminer une pancréatite chronique:
- amylase et lipase: normal
- test à la simulation de la sécrétine: bicarbonate diminué
Dosage pour déterminer un cancer du pancréas:
- amylase et lipase augmenté
- bilirubine augment (si blocage)
- si ilots: augmentation du glucose, augmentation de gastrine (syndrome ZE)
Dosage pour déterminer la fibrose kystique:
Chlorure dans la sueur augmenté
Rôle de l’amylase:
Hydrolyse des carbohydrates consitutés d’unités de alphaD-glucose liés par des carbones 1 et 4 des résidus adjacents.
Quels sont les activateurs requis pour doser l’amylase:
Calcium et Chlore
Méthode de dosage de la lipase:
- turbidimétrie ou néphélométrie: l’action de lipase sur une émulsion cause une émulsion cause la diminution de la grosseur les particules d’émulsion
- enzymatique couplé (production glycérol)
Comment spécifique est BNP:
70-75%
Quand BNP doit être prélevé:
A la même heure pour éviter des variations diurnes, dans un tube lavende.
Protéine C réactive est utilisé pour:
- surveillance des maladies inflammatoires
- détection d’infections post-opérative et néonatal
- surveillance de la réjection des organes
Rôle de la protéine C réactive:
Marqueur d’inflammation des vaisseaux, prédit un évènement cardiaque
Spécimen pour protéine C réactive:
0.5ml de sérum (tube SST). Lipémie ou hémolyse interfère avec ce test.
Valeur de UI:
umol/min/L
Valeur de E:
L/mol cm
On veut pour le calcul: L/umol cm
Lactate déshydrogénase utilise quoi comme cofacteur:
NADH
Glucose-6-phophate déshydrogénase utilise quoi comme cofacteur:
NADH
Gamma-glutamyl transférase utilise quoi comme cofacteur:
VB6-P5P
Aspartate aminotransférase utilise quoi comme cofacteur:
VB6-P5P
Alamine aminotransférase utilise quoi comme cofacteur:
VB6-P5P
Hexokinase utilise quoi comme cofacteur:
ATP
Pyruvate kinase utilise quoi comme cofacteur:
ATP
Créatine kinase utilise quoi comme cofacteur:
ATP
Triacylglycérol lipase utilise quoi comme cofacteur:
Ions métalliques
Alcaline phosphatase utilise quoi comme cofacteur:
Ions métalliques
Acide phosphatase utilise quoi comme cofacteur:
Ions métalliques
Quel est l’ancien profil enzymatique:
- CK
- CK-MB (si CK était augmenté)
- AST
- LD
Quel est le nouveau profil enzymatique pour le coeur:
- myoglobine (pas un enzyme)
- CKMB
- troponine I ou T (pas un enzyme)
