Elisa Flashcards
Tipo de respuesta del sistema inmune innato
- Rápida
- Inespecífica
Tipo de respuesta del sistema inmune adaptativo
- Lenta
- Específica
Células del sistema inumen innato
- Barrera epitelial
- Célula dendritica
- Fagocitos
- Mastocitos
- NK
- HCM
Células del sistema inmune adaptativo
Células plasmaticas → LB y LT
Estructura de los anticuerpos
Epitope
Parte de un antígeno que es reconocida por un anticuerpo, el cual se le une
Aplicación de la prueba ELISA
- Identificación, cualtificar y localizar moléculas
- Medición de los componentes de la sangre
- Examinar detalles de un tejido
Diagnósticos mediante ELISA
- Ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas
- Interacciones Antigeno-anticuerpo
ELISA directo
- Ag inmovilizado sobre placa
- Ac primario marcado con una enzima que se une al Ag de interés
- Sustrato que reacciona con la enzima → señal visible
Función ELISA directo
- Identificación y cuantificación del antígeno de interés
- Respuesta inmune a determinado antígeno
- Menor sensibilidad
- Mayor ruido de fondo (proteínas y Ag)
ELISA indirecto
- Ag inmovilizado en placa
- Ac primario sin marcar se une a Ag
- Ac secundario marcado con una enzima se une a Ac primario
- Sustrato que reacciona con la enzima → señal visible
Función ELISA indirecto
- Identificación y cuantificación del antígeno de interés
- Determinar concentración total del anticuerpo en una muestra
- Alta sensibilidad
- El procedimiento es muy largo
- Posible reacción cruzada
ELISA tipo sandwich
- Ac de captura inmovilizado
- Se añade muestra con Ag de interés que se une al Ac
- Se añade el Ac de detección que se unira al Ag unido al Ac
- Se añade Ac secundario marcado que se une al anticuerpo de detección
- Se añade sustrato
Función de la ELISA tipo sandwich
Identificación y cuantificación del Ag
Analisis de muestras complejas
Alta sensibilidad y especificidad
Citometría de flujo
Método rápido objetivo y cuantitativo de análisis de células, núcleos, cromosomas, mitocondrias u otras particulas en suspensión.
¿Qué permite que una citometria de flijo sea específica?
El diseño de Ac monoclonales
CD
- Cluster de diferenciación
- Proteína membranal para diferenciar células o linajes celulares espcíficos.
¿Cuántos Ac se pueden colocar en una citometría de flujo?
4-5
Pasos de la citometría de flujo
Células en Buffer de P → se alinean → sistema óptico (láseres y filltros) las iluminan → se reconoce el tamaño, la granularidad y las proteínas que expresan (marcadores)→ señal luminosa se traduce en señales electrónicas.
SEPARA GRUPOS CELULARES
Método usado para cuantificar Linfocitos CD4+ en pacientes con VIH
Citometría de flujo
Marcadores de leucemia mieloide
CD 33, CD 14, CD 15
Marcadores de leucemia linfoide
- T → CD3, TRC
- B → CD79a,CD22
- B1proB → CD79a,CD22,CD19 * BII:CD10
- BIII → preB
- BIVB → sIg
IgM
Respuesta inmune agudo
IgG
Respuesta inmune de memoria
