Diagnóstico Molecular e inmunofenotipo aplicado a las neoplasias hematológicas Flashcards
¿Que es la citometria de flujo?
Es una tecnología basada en láser que permite identificar y cuantificar poblaciones
celulares. Son células en suspensión son transportadas por un flujo que provoca el orden de las células, llevándolas al punto de interrogación formadas de uno en uno
Para analizar neoplasias leucocitarias por citometria de flujo, ¿que se debe hacer con los GR?
Lisarlos previamente, ya que componen el 99% de elementos figurados de la sangre siendo finalmente una interrupción
En cuanto a la citometria de flujo, defina la Longitus de onda de exitacion y de emision:
Longitud de onda de excitación: Es la que provee el citómetro de flujo
Longitud de onda de emisión: Es la que llega a los detectores luego de excitar al Fluoróforo
¿Que antigenos utiliza la citometria de flujo?
Antigenos asociados con la célula normal a partir de la cual fueron derivados
¿Que facilita la citometria de flujo? (5)
Identificación y cuantificación de poblaciones celulares en una muestra.
Diferenciación de células normales de anormales.
Diferenciación de células reactivas de neoplásicas.
Identificación del estado de maduración de una población celular.
Cuantificación de infiltración de un tumor.
¿Cuales son algunas ventajas del inmunofenotipo por citometria de flujo?
1) Incrementa la precisión para diferenciar neoplasias hematológicas por la combinación de datos usados por los anticuerpos
2) Identifica la línea celular involucrada y su estado madurativo
3) Requiere muy bajo volumen de muestra
4) Posee costo efectividad.
5) Incrementa la eficiencia y sensibilidad para el monitoreo de la enfermedad residual mínima
En un DOT-PLOT de citometria de flujo, ¿como se identifican los blastos?
Poseen una complejidad minima, similar a la de linfocitos, pero con expresion de CD45 menor a otras celulas
En un DOT-PLOT de citometria de flujo ¿que es un Gating?
Especie de limpieza de los eventos que no son de interés para el análisis: restos celulares, otros tipos celulares etc
¿de que manera ayuda el gating a leucemias?
El gating podría ser más útil para leucemias mieloides agudas ya que permite identificar blastos, sin embargo para leucemias mieloides crónicas podría ser quizás para líneas granulocíticas o linfocitos (síndrome linfoproliferativo crónico)
despues del gating ¿que se realiza?
Jerarquizacion de eventos y calculo de porcentaje de
En cuanto a la adquisicion datos, para desórdenes linfoproliferativos se recomienda analiza ¿cuantos eventos?
50.000 eventos en el « gate » determinado como linfocito
En cuanto a la adquisicion datos, para enfermedad residual mínima se recomienda analizar ¿cuantos eventos?
500.000 a 1.000.000 de eventos totales
¿Cual es un marcador comun de leucocitos de inmadurez?
CD34
¿Cual es un marcador comun de leucocitos?
CD45
En el linaje T, ¿cuales son los marcadores de primera y segunda linea?
1era: cyCD3 (este es parte del complejo de TCR)
2da: CD7
Marcador de madurez: smCD3
