Cours 2- Croissance microbienne et exigences nutritionnelles Flashcards
Quelles sont les 4 phases de croissance?
- Latence
- Exponentielle
- Stationnaire
- Mortalité
Explique la phase de latence et elle varie en fonction de quoi?
C’est une phase d’adaptation avant de débuter à croître qui dépend de:
1. âge des bactéries
2. origine (composition/température du milieu)
donc on gros ça dépend de la bactérie et de son mileu où elle croit
Dans quelle phase on est à la vitesse de croissance maximale de croissance?
exponentielle
V ou F, la phase exponentielle est de courte durée
V
La phase exponentielle varie en fonction de quoi?
Concentration des nutriments disponibles
Pourquoi y a-t-il une stabilité au niveau de la phase stationnaire et c’est causé par quoi?
Parce qu’il y a autant de division que de mort cellulaire
* Mort causé par une accumulation de déchets toxiques et acides et un manque de nutriments
V ou F
l’arrêt de la division cellulaire est le début de la phase de mortalité
V
Quelles sont les causes de mortalité des cellules?
Quelle sont les deux méthodes de mesure de la croissance des microorganismes?
Méthodes directes (on compte les bactéries):
1) Décompte totale
2) Décompte des unités viables (qui peuvent se reproduire)
Méthodes indirectes (on ne compte pas les bactéries):
1) Mesure de l’activité des moo (manger, excréter, composition)
2) Mesure de la masse cellulaire
Explique le compteur de cellule Coulter et c’est une technique associée à quelle méthode?
Méthode directe - Décompte totale
Pour les cellules mammifères, levures et protistes
Explique les dilutions en milieux liquides+étalement sur gélose et c’est une technique associée à quelle méthode?
Méthode directe - Décompte des unités viables (seule les unités viables pourront croitre sur les géloses)
- On fait une dilution en milieux liquides
- On étale chacune de ces dilutions sur des gélose
- On calcule le nombre de colonies (en multipliant par le facteur de dilution) d’une gélose n’ayant pas trop/peu de colonies
Explique le cytomètre de flux et c’est une technique associée à quelle méthode?
Méthode directe - Décompte total
Pour les cellules mammifères, les levures et les protistes
Explique la turbidimétrie et c’est une technique associée à quelle méthode?
Méthode indirect - Masse cellulaire
On calcule la densité optique pour connaître la concentration cellulaire
1) On place une suspension dans un spectophotomètre qui va calculer la densité optique et on établit une courbe de référence
2) ↑ de lumière passe = ↓de cellules/colonies (absorbance ↓, transmission vers le détecteur↑)
3) ↓ de lumière qui passe = ↑ de cellules/colonies (absorbance ↑, transmission vers le détecteur↓)
Explique l’hémocytomètre et c’est une technique associée à quelle méthode?
Méthode directe - Décompte total
Chambre de comptage observée au microscope pour les cellules mammifères et les levures
1. Puisqu’on connait la longueur, la largeur et la profondeur, on peut calculer le volume de la chambre de comptage (0.1 cm x 0.1cm x 0.1 cm = 1/10 000 cm3)
2. 10 000 x cellules comptées x facteur de dilution (si la suspension fut diluée)
Mesurer l’alimentation, les déchets et les constituants cellulaires sont des techniques associées à quelle méthode?
Méthode indirecte - Mesure de l’activité
* Alimentation: consommation des substrats (C, O2, N2, etc)
* Déchets: CO2, NH3
* Constituants : ATP, ADN, protéines
Explique les filtres de cellulose et c’est une technique associée à quelle méthode?
Méthode directe - Décompte des unités viables
1) on fait passer une suspension à travers un filtre de cellulose
2) le filtre de cellulose emprisonnant les moo est placé sur une gélose
3) décompte des unités ayant pu se reproduire sur la gélose
Explique la mesure du poids sec et c’est une technique associée à quelle méthode?
Méthode indirecte - Masse cellulaire
1.
Explique la cellule de Petroff-Hausser et c’est une technique associée à quelle méthode?
Méthode directe - Décompte total
Chambre de comptage observée au microscope pour les bactéries
* Même principe que l’hémocytomètre mais 10 x plus petit (pour de plus petites cellules)
* 100 000 x cellules comptées x facteur de dilution (au besoin)
Quelles sont les techniques utilisées en méthode directe?
Décompte total (mortes et vivantes):
* Compteur de cellules Coulter
* Cytomètre de flux
* Chambre de comptage: Hémocytomètre et Cellule de Petroff-Hausser
Décompte des unités viables (vivantes/pouvant se reproduire):
* Dilution en milieu liquide et étalement sur gélose
* Filtre de cellulose
Quelles sont les techniques utilisées en méthode indirecte?
Mesure de l’activité:
1. Consommation des substrats (C, O2, N2, etc)
2. Excrétion de CO2, NH3, etc
3. Composant cellulaires (ATP, ADN, protéines,etc)
Mesure de la masse cellulaire:
1. Poids sec
2. Turbidité par densité optique (concentration cellulaire)
Explique c’est quoi le temps de génération/doublement
Temps entre chaque génération/doublement de cellules
temps de génération/doublement : g
g= temps / nb de générations
g=t/n