Cours 2 Flashcards
Définir ce qu’est la croissance des microorganismes.
diapo 2
Acroissement du nombre de cellules ou de la masse cellulaire totale
Chez les procaryotes, comment se nomme le processus où la croissance d’une cellule se poursuit jusqu’à sa division en deux nouvelles cellules? Expliquer ce processus.
BANQUE DE QUESTION. diapo 2
La fission binaire
1. Le chromosome est localisé au milieu de la cellule
2. Le chromosome se réplique.
3. Les chromosomes se séparent et une anneau de protéines se forme.
4. L’anneau de protéines se contracte.
5. La division est complétée : 2 cellules complètement identiques (grosseur et contenu).
Quelles sont les 4 phases de la courbe de croissance microbienne?
VOIR DIAPO 3 PCQ BANQUE DE QTS
-latence
-exponentielle
-stationnaire
-mortalité
Expliquer la phase de latence de la croissance microbienne.
- Phase d’adaptation dans laquelle il n’y a aucune division cellulaire
- La durée de la phase de latence varie en fonction :
-de l’âge des bactéries
-de l’origine (composition et température du milieu)
Expliquer la phase de croissance exponentielle (logarithmique).
- Accélération de la croissance des bactéries ainsi que de la division cellulaire
- Les microorganismes se développent et se divisent à la vitesse maximale
- La population est uniforme (propriétés chimiques et physiologiques)
- La phase de croissance exponentielle est de courte durée…
- Relation entre la concentration des nutriments et la croissance
Expliquer ce qu’est la phase stationnaire.
- Le nombre total de microorganismes viables reste constant (Équilibre entre division et mort cellulaire) (109 cellules/ml)
Causes:
-Limitation des nutriments
-Accumulation de déchets toxiques, acidité
Expliquer la phase de mortalité.
-Arrêt de la division cellulaire
-Le nombre de bactéries viables ou cultivables diminue de façon constante en fonction du temps
Causes:
- Dommages irréparables conduisant à une perte de viabilité
- Réponse génétique déclenchée (Mort cellulaire programmée)
- Formation de cellules viables non cultivables (VNC) (dormance)
Nommer les méthodes directes de mesure la croissance des microorganismes.
- Décompte total des microorganismes
- Décompte des unités viables
Nommer les méthodes indirectes de la croissance microbienne.
- Mesure de l’activité
- Mesure de la masse cellulaire
Nommer les méthodes utilisés pour faire un décompte totale des microorganismes et les avantages et inconvénients de cette méthode.
-Compteur de cellules Coulter et Cytomètre de flux (protistes, levures et cellules mammifères)
-Chambre de comptage observée au microscope
-Hémocytomètre: Les levures et cellules mammifères
-Cellule de Petroff-Hausser: Les bactéries
- Avantages:
-facile à utiliser, rapide et peu coûteux
-informations sur la taille/morphologie des microorganismes - Inconvénients:
-densité microbienne élevée (petit volume)
-décompte des cellules mortes et vivantes
C’est quoi un hémocytomètre?
BANQUE DE QTS
-l’endroit qui contient la suspension bactérienne mesure : 0.1cm x 0.1cm x 0.01cm = 1/10000 cm3
-lame de verre spéciale qui contient une chambre sur laquelle on dépose la suspension bactérienne
-cellules/ml: 10000 x cellules comptées x facteur de dilution
Expliquer la mesure Cellule de Petroff-Hausser.
- Dimensions : 10 fois plus petit que l’hémocytomètre
- Cellules/ml: 100000 x cellules comptées x facteur de dilution
Nommer les méthodes utilisées pour faire le décompte des unités viables et nommer les avantages et les désavantages.
-Méthode de dilutions en milieu liquide et d’étalement sur gélose
-Méthode des filtres de cellulose
- Avantages:
-les colonies proviennent seulement des cellules vivantes capables de se reproduire - Inconvénients:
-Amas de cellules = 1 colonie
Expliquer ce qu’est la méthode de filtre de cellulose.
L’échantillon est passé sur un filtre de cellulose dont la porosité retient les micro-organismes.
Le filtre est ensuite incubé pour 24h.
Obtention de colonies.
Dans les méthodes indirectes, expliquer ce qu’est la méthode de mesure de l’activité.
-En mesurant la consommation de substrats (C, N2, O2 ou d’un facteur spécifique de croissance), la concentration des constituants cellulaires (ATP, FAD ou FMN, ADN, protéines) ou l’excrétion de certains produits (CO2 ou NH3), il est possible d’évaluer la concentration microbienne d’un échantillon.
Dans les méthodes indirectes, expliquer ce qu’est la mesure de la masse cellulaire.
- Poids sec
-Récolte des micro-organismes (filtration sur membrane)
-Lavage + dessiccation (100 à 110oC)
-Pesée (toutes les bactéries, mortes ou vivantes sont pesées)
-Valeurs exprimées en g/L
-Valeurs exprimées en cellules/ml (nécessite un décompte cellulaire avant de récolter les bactéries) - Turbidité par la densité optique (D.O.): Turbidimétrie
Expliquer ce qu’est la turbidimétrie.
voir diapo pour explications avec images
- Évaluation de la concentration cellulaire à l’aide de sa densité optique [D.O.] (absorption lumineuse) à une certaine longueur d’onde (Ex 600 nm)
-Dans une certaine limite (106/ml < [ ] < 108/ml), la D.O. d’une suspension microbienne est directement proportionnelle à sa concentration cellulaire
-Pour évaluer la concentration microbienne d’une suspension inconnue, on doit préalablement établir à l’aide d’un spectrophotomètre une courbe de référence pour des concentrations microbiennes connues
-Expression mathématique du temps de génération
-Exp. mathématique du taux de croissance
BANQUE DE QTS
- g = t/n (t=temps, n = nb. de générations)
- k = n/t (n = nb. division)
Qu’est-ce que la culture continue (ouvert)?
- Apport de nutriments
- Elimination des déchets
- La phase de croissance exponentielle est maintenue sur une
longue période - Concentration constante de la biomasse
- Il y a 2 types: Chémostat et turbidostat
– Chémostat : Apport constant de nutriments à la même vitesse que le milieu est éliminé
– Turbidostat: vitesse de dilution déterminée par la densité
Qu’est-ce qu’un milieu de culture?
Préparations utilisées pour réaliser la croissance, le transport ou la conservation des microorganismes
* Leurs compositions varient à l’infini
* Doivent respecter les exigences nutritives des micro-organismes
* La composition précise d’un milieu de culture dépend de l’espèce à cultiver
Quelles sont les 2 sortes de milieux de culture?
1) Liquides: bouillons de culture (produisent une suspension microbienne)
2) Solides:
-Même composition que les bouillons, sauf qu’on ajoute de l’agar à 1-2% (produisent des colonies microbiennes)
-Agar: Polysaccharide extrait d’une algue rouge et utilisé comme agent gélifiant (non métabolisé par les microorganismes)
Comment classe-t-on les types de milieux de culture?
1) Classés selon la composition
-synthétique ou empirique
2) Classés selon l’usage
-sélectif ou différentiel (ou les deux)
ex : macconkey c’est les deux