CM10 Flashcards
2 grandes méthodes de dx des néopalsies?
- Cytogénécité : identifier sur les chromosomes les gènes mutés
ex : caryotype, FISH - Biologie moléculaire : identifier les gènes mutés via une étude GÉNÉTIQUE, et non chromosomique
ex : PCR, RT-PCR et Q-PCR
Au caryotype, on arrête la progression des chormosomes pour les isoler à quelle phase?
Métaphase
Avantages et désavantages du caryotype
A : identifie les grosses translocations et larges délétions (anomalies de structure)
D : anomalies doivent être larges pour être identifiées, PEU SENSIBLE et prend bcp de temps : pas utile pour les dx rapides, basse résolution
3 utilités du caryotype?
- Peuve de CLONALITÉ
- DIAGNOSTIC pour des maladies avec anomalies caractéristiques ex T(9,22) pour LMC : le caryotype avec 9,22 est un dx de LMC
- FACTEUR PRONOSTIC MAJEUR : observer certaines mutations qui ont BIN PRONOSTIC, vs certaines mutations qui ont MAUVAIS PRONOSTIC
Avantages et désavantages du FISH?
- Rapide : en 24H
- Pas besoin des cellules en métaphase : on les prend en interphase (ok meme si une cellule se réplique lentement, pas besoin d’attendre sa métaphase pour faire le FISH)
- Très sensible (500 cellules vs 20 pour le caryotype)
- DÉtecte les translocations et les aneuploïdies (ex délétions ou amplifications)
DÉSAVANTAGES: On doit chercher une anomalie pour utiliser la bonne amorce spécifique à la séquence qu’on pense mutée
Détecte des relativement grosses mutations uniquement –>pas de mutations ponctuelles minuscules
Avantages du RT-PCR vs PCR normal?
Test quantitatif : détecte le nb de mutations via la fluorescence visible durant la réplication
- Test quantitatif
- Test très sensible!
- Permet de mesurer la maladie résiduelle minime (MRM) selon la qté de mutations présentes
_____% des LMA ont un caryotype ______
Dans ces cas, on fait quoi à la place?
50% ont un caryotype normal
Si caryotype N, on fait biologie moléculaire à la place qui peuvent identifier mutations qui pemrettent un dx
___% de toutes les LMA ont une mutation ______
Cette mutation est de bon ou mauvais pronostic pour LMA?
Le fardeau allélique pour cette mutation indique quoi?
30% des LMA = FLT3 muté
Mauvais pronostic de LMA
Fardeau allélique variable = + on a de mutations, + le pronostic est PAS BON
Mutation FLT3 est associé avec LMA avec quelles caractéristiques? RÉpond comment à la chimio?
LMA +++++++ proliférative
HYPERLEUCOCYTAIRE (car LMA c’est logique)
Répond BIEN À LA CHIMIO, mais rechute presque assurée
FLT3 est quoi dans la cellule (la mutation du gène entraîne quoi)? QUels sont ses rôles?
FLT3 = récepteur à activité tyrosine kinase (récepteur du fct de croissance FLT3-L)
Rôles : survie, prolifération et différenciation des cellules hématopoïétiques
2 types de mutation pour le FLT3 et entraînent quoi au niveau du récepteur tyrosine kinase FLT3?
- 20-25% : MUTATION DUPLICATION INTERNE (ITD) dans exon 14
- —->activité constitutive du récepteur FLT3 (hausse survie, différenciation et prolifération des cellules lignée myéloïde) - MUTATION PONCTUELLE d835 (TKD) dans exon 20 : 5-10%
Traitements de 1ère ligne et entretien pour la LMA à mutation FLT3?
Nouveau traitement depuis jan 2020?
- MIDOSTAURIN (chimio) : pour FLT3 ITD et TDK
- SORAFENIB : entretien post greffe allogénique pour FLT3 ITD
NOUVEAU : GILTERINIB : traitement de rechute FLT3 ITD ou TDK en remplacement d’une chimiothréapie d’induction (pas tous les effets indésirables d’une chimio, c’est une pilule à la maison!)
Marqueurs caractéristiques aux labos de LMA promyélocytaire?
- CIVD : baisse des plaquettes + baisse du fibrionogène
- —-> entraîne TT/PT et TCA allongés : marqueur important - +++++ de granulocytes (indique myélocytaire)
- Bâtonnets d’Auer (indique myélocytaire)
Acronyme utilisé pour leucémie promyélocytaire?
Représente quel pourcentage des LMA?
FAB M3
Promyélocytaire : 3-10% des LMA
LMA promyélocytaire associé à quelle mutation?
Traité avec quoi?
RARa-PML T(15,17)
TRaité avec ATRA
Quelle est l’Action des gènes RARa et PML séparés , et pourquoi entraîne LMA quand mis ensemble?
RARa : PERMET DIFFÉRENCIATION DES CELLULES AVEC CONTACT AVEC agonistes (ACIDE RÉTINOÏQUE/vitamine D)
Assemblé avec
PML : facteur de régulation nucléaire
ENTRAÏNE RARa-PML: gène qui favorise prolifération (avantage de croissance) et bloque différenciation des myéloblastes au stade PROMYÉLOCYTE
entraîne un BLOC DE LA MATURATION ET HAUSSE DE LA CROISSANCE DES PROMYÉLOCYTES
2 méthodes utiles pour observer T(15,17) RARa-PML et pourquoi celles-ci en particulier (en relation avec caractéristique de cette LMA)?
POURQUOI ON UTILISE PAS UNE CERTAINE TECHNIQUE?
- FISH
- —> très rapide (LMA promyélocytaire = urgence médicale, besoin dx rapide) - Q-PCR (PCR quantitatif)
- —->détecte T(15,17) et utile dans détection de la maladie résiduelle minime (MRM)
PAS CARYOTYPE : MOINS PRÉCIS ET TROP URGENCE : ON A PAS LE TEMPS D’ATTENDRE
Utilisation ATRA seul pour LMA promyélocytaire : fonctionne bien?
Peut-on l’utiliser seul uniquement?
- Permet différenciation COMPLÈTE et RÉMISSION COMPLÈTE SANS CHIMIO!!
- —->avec le contrôle de la CIVD en plus!
- —->mais RÉMISSION COMPLÈTE MAIS COURTE ; rechute rapidement - ATRA + chimio ou ATRA + arsenic = guérison complète 85%!!!!! (chimio ou arsenic évite les rechutes)
- —->LMA promyélocytaire est la leucémie à avoir si on pouvait choisir, bon taux de guérison
Le turn-over cellulaire des lymphomes de BURKITT est de combien?
100% : très agressif, très gros turn-over cellulaire
Comment sont les cellules dans le lymphome de Burkitt?
Mutation dans le lymohome de burkitt?
- Expriment Ig de surface
- Cellules vacuolisées souvent
- Cellules de taille intermédiaire
T(8,14) MYC ou T(2,8) ou (8,22) MYC
% des Burkitt qui sont quelle mutation, et pourquoi entraîne cancer?
80% T(8,14) MYC
MYC = fct de transcription oncogène, superposé sur gène de chaîne lourde
20% T(2,8) ou (8,22), MYC sur les gènes de chaînes légères
technique idéale pour identifier MYC (8,14) et autre technique possible?
Pourquoi on utilise pas une certaine technique?
- FISH : grosse translocation bien visible
- Caryotype standard : plus long, alors moins idéal, mais montre la translocation
ON UTILISE PAS PCR ; breakpoint est trop large pour la mutation de mYC
En cas de polycythémie vraie, EPO est comment?
Quel est un sx dermato pour les PV?
DIMINUÉ : tente de compenser la polycythémie vraie en produisant le moins possible d’EPO qui pourrait augmenter encore + le nb de GR
PRURIT ou ROUGEUR CUTANÉE : par le ++++++ de GR
Correction p/r à ce qui est dans APP : quelles sont les valeurs de Hb et d’hématocrite pour qualifier une polycythémie?
Hommes : Hb > 165 g/L et hématocrite > 0,49
Femmes : Hb > 160 g/L et hématocrite > 0,48
Quels sont les 3 critères caractéristiques de dx de polycythémie?
- Valeurs Hb et hématocrite précédentes, ou masse GR >25% de la masse normale
- Biopsie qui montre hausse des 3 lignées (thrombocytose, neutrophilie et polycythémie) —>panmyélose, et dont prolifération des mégacaryocytes
- Identification de JAK2 V617F ou de JAK2 exon 12
(4. autre critère mineur = EPO anormalement bas)
Dans mutation JAK2 V617F, la mutation est où exactement?
Dans domaine pseudokinase qui contrôle négativement action de JAK2 –>mutation = arrêt inhibition JAK2 et activité constitutive
Quel est le meilleur test lab pour dx polycythémie vera via identification de JAK2 V617F?
Ce test permet aussi quoi en lien au suivi?
Biologie moléculaire : PCR
Permet aussi mesurer fardeau allélique : permet de mesurer évolution PV vers possiblement myélofibrose ou LMC, et d’évaluer réponse au traitement
En cas de polycythémie avec BCP EPO et pas de JAK2 muté, on soupçonne quoi?
Polycythémie secondaire à la hausse d’EPO
- Appropriée : tabac, altitude, MPOC, apnée du sommeil, Hb à haute affinité O2, etc
- Non-appropriée : tumeur rénale, androgènes, etc
Quels sont les critères qui peuvent définir LMC phase accélérée? (il faut avoir au moins 1 des critères)?
- Blastes > 15%
- Blastes + promyélocytes > 30%
- Basophiles > 20%
- Plaquettes < 100 ou >1000 x 10^9/L
- Évolution clonale
Méthodes pour identifier T(9,22)?
- Caryotype standard
- FISH
- RT-PCR pour mutation BCR-ABL
Pour LMC, on fait quel test aux 3 mois pour évaluer évolution?
Et quel test pour évaluer réponse au traitement
- Évolution : RT-PCR aux 3 mois
2. Réponse : FSC aux 2 semaines
Qu’est-ce que le syndrome de différenciation?
Quand on a LMA promyélocytaire RARa-PML traité avec ATRA, il y a +++++ différenciation et maturation des myélocytes en même temps = hausse des leucocytes intense = ++++ de cytokines produites par les granulocytes et sx inflammatoires
Traité avec corticostéroïdes
Caractéristiques de la LLA
Traitements déjà vus mais quels sont-ils?
Maladie de l’enfant
TdT positive
Très curable
Atteinte testiculaire et SNC ++++
- Méthotrexate
- L-asparaginase
- Cyclophosphamide et anthracycline
- Imatinib
