Biochimie M1 S4 (complet)

Question 1

Avec l’aide de quel appareil se fait l’étude des cellules ?

Answer 1

Microscopes plus ou moins performants

Question 2

Par quel moyen se fait l’obtention d’un échantillon de tissus en provenance d’un organisme vivant ?

Answer 2

Biopsie

Question 3

Quelle est la taille d’une cellule ?

Answer 3

Entre 10 et 100 um

Question 4

Comment peut-on voir les organites cytoplasmiques ?

Answer 4

A la microscopie électronique

Question 5

Quelles sont les méthodes d’études des cellules ?

Answer 5

• La microscopie optique
• La microscopie électronique
• Les méthodes d’étude de la composition cellulaire
• La culture cellulaire
• L’immuno-sérologie

Question 6

Qu’est-ce que la microscopie optique ?

Answer 6

Il s’agit d’études effectuées à l’aide d’un microscope, assemblage plus ou moins complexe de lentilles (généralement deux) et d’une source de lumière, permettant d’obtenir différents grossissements de l’image

Question 7

La résolution de cet appareil peut atteindre combien de micromètre ?

Answer 7

0,2 micromètre

Question 8

Pourquoi la méthode de la microscopie optique nécessite la coloration et la fixation ?

Answer 8

Sans la coloration et la fixation, la cellule resterait transparente et donc invisible

Question 9

Pourquoi la méthode de la microscopie optique nécessite des coupes très fines ?

Answer 9

Pour observer les structures de manière indépendante en limitant les superpositions

Question 10

Lors de la microscopie optique, comment peut se faire l’étape de la fixation des structures ?

Answer 10

• Par déshydratation
• Par congélation

Question 10

Quelles sont les étapes de la méthode de la microscopie optique ?

Answer 10

• Prélèvement de tissu ou de cellules (par biopsie ou pds)
• Fixation des structures (permet de stabiliser les structures cellulaires)
• Découpage (le tissu est découpé un fines lamelles à l’aide d’un microtome)
• L’échantillon est soumis à des techniques de visualisation des structures (coloration)

Question 11

Que permet la congélation ?

Answer 11

Des coupes très fines, sans inclusions préalable

Question 12

Quelles sont les principales colorations utilisées ?

Answer 12

• L’hématoxyline-éosine
• Rouge carmin
• Résorcine
• Fuschine

Question 13

Que permet la microscopie électronique contrairement à la microscopie optique ?

Answer 13

Elle permet une meilleure résolution (jusqu’à 0,5 angström (0,5x10-10m)) et un agrandissement plus poussé (plusieurs milliers de fois)

Question 14

De quelles étapes la microscopie électronique a-t-elle besoin ?

Answer 14

• Interaction potentielle des électrons avec la matière vivante, et notamment avec l’eau qu’elle contient
• Préparation par déshydratation ou cryogénisation
• Traitement permettant d’accentuer le contraste entre différentes structures

Question 15

Quelles sont les deux techniques utilisées pour la microscopie électronique ?

Answer 15

• La microscopie électronique à transmission
• La microscopie à balayage (utilisant un faisceau d’électrons
  émis depuis un canon et qui fonctionne comme une « sonde » qui explore l’échantillon)

Question 16

Comment fonctionne la microscopie électronique à transmission ?

Answer 16

Un faisceau d’électrons
est transmis à travers un échantillon très fin à étudier

Question 16

Comment fonctionne la microscopie à balayage ?

Answer 16

Utilise un faisceau d’électrons
émis depuis un canon et qui fonctionne comme une « sonde » qui explore l’échantillon

Question 17

En quoi consiste la spectrométrie ?

Answer 17

Elle consiste à décomposer une donnée en ses constituants, comme décomposer un mélange de molécules en ses plus simples composantes selon leur masse et de préciser ainsi leurs caractéristiques chimiques
(spectrométrie de masse)

Question 17

Comment est effectuée l’analyse ?

Answer 17

Elle est effectuée en phase gazeuse. Elle permet notamment de définir la composition chimique des molécules

Question 18

Qu’est-ce que la chromatographie ?

Answer 18

C’est une méthode de séparation des constituants d’un mélange en phase liquide par exemple

Question 19

Quel est le principe de la chromatographie ?

Answer 19

Le principe consiste à utiliser deux phases :
- Une fixe et une mobile (liquide ou gazeuse)
Une substance va ainsi être entraînée avec la phase mobile si son affinité pour cette phase est importante, ou va plutôt rester immobile si son affinité s’exerce davantage avec la phase fixe

Question 20

Expliquer la chromatographie d’exclusion

Answer 20

Une adaptation de la méthode consiste à faire traverser une solution moléculaire par un milieu de billes poreuses.
Le passage des molécules se fait alors en fonction de leur taille (masse moléculaire) ainsi que de leur configuration
spatiale

Question 22

Expliquer la chromatographie à
échange d’ions

Answer 22

Elle utilise des résines chargée en anions ou cations.
Les molécules de charge électrique opposée seront immédiatement fixées sur la résine alors que les molécules neutres ou de même charge resteront libres dans
la phase mobile

Question 23

Que permet la résine chargée ?

Answer 23

La résine chargée permet de retenir les ions complémentaires : u
- Une résine chargée positivement permet de retenir les anions
- Une résine chargée négativement permet de retenir les cations

Question 24

Citer un exemple d’utilisation de la chromatographie

Answer 24

Par exemple la séparation des acides gras selon leur masse moléculaire, ce qui
permet de définir la composition d’un échantillon

Question 25

Quel est le principe de l’histochimie ?

Answer 25

C’est de mettre en évidence une famille de molécules (ou le produit d’une activité
enzymatique) grâce à son affinité tinctoriale

Question 26

Que permet cette méthode ?

Answer 26

Elle permet d’identifier les acides nucléiques
par la coloration (vert de méthyle pour l’ADN et pyronine pour l’ARN) et par lyse enzymatique, basée sur l’utilisation
d’enzymes spécifiques (DN-ase et RN-ase)

Question 27

Que fait l’immunohistochimie ?

Answer 27

Elle utilise des anticorps marqués pour visualiser un substrat (technique du Western Blot).

Question 28

Que permet la cytométrie de flux ?

Answer 28

Elle permet un décompte par faisceau
laser des cellules ayant éventuellement été au préalable marquées avec un anticorps spécifique traçable

Question 29

Que permet le fractionnement cellulaire ?

Answer 29

Il permet de détruire la membrane pour ensuite séparer les organites par centrifugation, selon leur poids

Question 30

A quoi fait appel l’étude des protéines et des acides aminés ?

Answer 30

A l’électrophorèse

Question 31

Sur quoi est basée cette méthode ?

Answer 31

Sur la vitesse de migration des molécules polarisées dans un champ électrique

Question 32

Que permet la culture cellulaire ?

Answer 32

Elle permet d’induire la multiplication des cellules en dehors de l’organisme d’origine et permet leur étude plus approfondie

Question 33

Les cellules cultivées peuvent être :

Answer 33

• Mobiles (les cellules sanguines) ou
• Adhérentes, constituées en tissu

Question 34

Que fait-on après prélèvement ?

Answer 34

On sépare les cellules par des méthodes :
- Mécaniques ou chimiques (enzymatiques)
A la suite de quoi, on les place dans des milieux adaptés, généralement à 37 °C, en présence de dioxygène et de faibles concentrations de CO2, sur un support synthétique ou milieu liquide (selon que l’on veut obtenir des cellules ou une structure tissulaire)

Question 35

Pourquoi les cellules cultivées in vitro peuvent parfois être très différentes des cellules in vivo ?

Answer 35

Car elles gardent le plus souvent
leur capacité de prolifération mais perdent les caractères spécifiques par une dédifférenciation plus ou moins
prononcée

Question 36

Que permet l’immuno- sérologie ?

Answer 36

Elle permet de dépister les molécules présentes en surface des cellules

Question 37

En quoi est-elle utile ?

Answer 37

Elle est utile pour définir les
caractères immunologiques des cellules qui caractérisent la compatibilité tissulaire entre deux individus (lors de transfusion sanguine ou de greffe d’organe)

Question 38

Sur quelle méthode est basée l’immuno- sérologie ?

Answer 38

Elle est basée sur le fait que toutes les cellules présentent des protéines et glycoprotéines de surface membranaire à fonction d’antigènes, et qui leur confèrent une spécificité immunitaire

Question 39

Sous quoi sont regroupées ces molécules ? (co

Answer 39

Ces molécules sont regroupées
sous le terme de complexe majeur d’histocompatibilité (CMH)