VL2-CRISPER (1 fehlt)

Question 1

Was passiert in einer Zelle, nachdem Cas 9 geschnitten hat, aber kein DNA template für homologe Rekombination mitgeliefert wurde?

Answer 1

NHEJ: Non homolog end-joining=> Random Repair

Question 2

Wie kann Cas9 in der Gentherapie eingesetzt werden, um Erbkrankheiten, wie zB cystische Fibrose zu heilen?

Answer 2

HDR reperatur der Schnittstelle=> Reparatur der Cas9 Schnittstelle durch Knock-In eines exogenen Abschnitts

Question 3

Welche enzymatische Aktivität hat Cas9?

Answer 3

DNA-Endonuklease

Question 4

Crispr repeats finden sich in:

a) bakterieller DNA
b) viraler DNA
c) Pilz-DNA
d) viraler RNA

Answer 4

A und seit neustem B

Question 5

Welches der folgenden Proteine wurde nicht für Genomeditierung genutzt?

a) ZFN
b) TALENs
c) Crispr-Cas9
d) MHC

Answer 5

d

Question 6

CRISPR Sequenzen im Zielgenom werden erkannt durch:

a) Zinkfinger
b) Tale-Repeats
c) RNA (guide)
d) Leucin zipper

Answer 6

c

Question 7

Wofür steht die Abkürzun CRISPR?

Answer 7

Clusterd Regulary Interspaced short Palendromc Repeats

Question 8

Wie unterscheidet sich CRISPR-Cas9 fundamental von anderen Genomeditierungswerkzeugen?

Answer 8

enthält RNA

Question 9

Welchen vorteil haben andere Genomwerkzeuge gegenüber CRISPR?

Answer 9

• Spezifität von CRISPER limitier durch Länge der crRNA-Ziel homologie
• Zinkfinger: man vermeidet offtargets durch längere Nukleotide am Zinkfinger-Chain

Question 10

Cas9 muss in seiner Sequenz verändert werden, um es zur Editierung von eukaryotischen Genomen zu verwenden. Inwiefern?

Answer 10

Cas9 muss in den Zellkern kommen=> NLS: nuclear localisation Signal

Question 11

Wie können Phagen der CRISPR-Abwehr ausweichen?

Answer 11

• Acr-Protein
• Mutation
• integration in Crisper Genom

Question 12

Wie können offtargets durch CRISPR vermindert werden?

Answer 12

• Kurze Expressionszeit der sgRNA
• Veränderte sgRNA: katalytische Aktivität sinkt bei weiteren Fehlpaarungen
• 2Nukleasen