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GEN! > ALLE VLs > Flashcards

ALLE VLs Flashcards

1
Q

Was bedeutet Chip?

A

Chromatin Immunopräzipitation

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2
Q

Auf welche Bereciehe wird in einem Chip-Seq Experiment bevorzugt normalisiert?

A

Auf den Noise nach part.Regression außerhalb der Peaks.
Man normalisiert um den Hintergrundnoise besser zu eliminieren. Damit man sich dabei nicht überschätzt, schaut man such die Signale außerhalb der Peaks an und gleicht/eicht auf diese Signale. Peaks werden von dieser eichung

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3
Q

Nennen Sie wichtige Kontrollen für Chip-Seq-Experimente.

A
  • Input DNA (Chromatin ohne IP)=> man gibt keine IPs dazu und macht keine Waschung der Proteine
  • IgG: unspäzifischer Antikörper, soll also an nix binden
  • Mutierte Zellen mit mut. Proteine (dadurch Knockout)
  • Kein Tag: IP von Probe ohne getaggtes Protein beim Epitope Tag
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4
Q

Welchen Zelltyp brauchen Sie für die Durchführung eines Chip_Seq-Experiments?

a) Muskelzelle
b) Nervenzelle
c) B-Zelle
d) Epidermiszelle

A

b

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5
Q

Welches der folgenden DNA-Bindeproteine interagiert Sequenzspizifisch mit DNA?

a) Histon H3
b) DNA-Polymerase
c) NF-kB
d) RNA-Polymerase

A

c

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6
Q

Welche der Methoden kann unterscheiden, ob ein Protein direkt oder über eine Proteinbrücke an DNA bindet?

a) EMSA und Chip
b) EMSA only
c) Chip only
d) Footprinting

A

b

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7
Q

Was ist der primäre Zweck der Ultrachallbehandlung in einem Chip-Experiment?

A

Fragmentierung der DNA

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8
Q

Welche dieser Methoden detektieren DNA-Protein Interaktion in vivo?
a)Chip und Chip-seq
b)Footprining
C)EMSA

A

a

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9
Q

Was bedeutet 3C(mit skizze) und welche Frage beantwortet dieses Experiment?

A

Chromosom conformation Capture
3D-Chromatin Interaktion durch das gesamten Genom erfasst.

-Crosslinking, Digestion, Ligation, reverse Crosslinking, Amplifizierung

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10
Q

Nennen Sie 2 Beispiele, warum Transkriptionsrate und Transkriptakkumulation nicht korrelieren müssen

A

(Kein Plan) Ein Gen kann stark Expremiert sein, allerdings die Produkte schnell verbraucht werden.
Andersherum kann ein Gen nicht so Expremiert werden, aber die Produkte werden nicht sofort verbraucht und akkumulieren.

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11
Q

Nennen Sie 3 Beispiele für Vorgänge, die ko-transkriptional passieren.

A

Spleißen (S5P bremst Pol II und erlaubt Ausführung von Spleißing) , Capping und Polyadenylierung

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12
Q

Warum werden für ein Run-On erst Kerne aus Zelle isoliert?

A

(K.A) kann daran liegen, dass man den Einfluss von anderen Zellorganellen auf die Transkriptmenge ausschließen will. (man will nur die Transkriptionsrate untersuchen, nicht die Transkriptakkumulation)

-weil wir fuer runon an zellkern rankommen und die dNTPs mit tagged dNTPs ersetzen sollen. ausserdem soll sarkosyl in die zellkern rein. ganze zellen mit membran verhindert alles. wir koennen aber alternativ das zellmembran durchlaessigmachen(K.A) kann daran liegen, dass man den Einfluss von anderen Zellorganellen auf die Transkriptmenge ausschließen will. (man will nur die Transkriptionsrate untersuchen, nicht die Transkriptakkumulation)

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13
Q

Was ist der wesentliche Unterschied zw. Gro und Net?

A

Bei Net wird die Polymerase per IP gefiltert, man kann die narzierende RNA untersuchen.(Ebenfalls RNA, die kurzlebiger ist wie CUTs)
Bei Gro wird dem RNA Br-UTPs hinzugegeben, sodass die RNA per IP gefällt wird. Hier wird die RNA Pol-Klasse bzw die Transkriptionsrate der RNA-Pol Untersuchung.

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14
Q

Inwiefern stellt Pro-Seq eine technische Verbesserung gegenüber GRO-Seq dar?

A

(K.A)Pro-Seq verwendet Biotin NTPs, welche die Transkription stoppen. Dies erlaubt die Untersuchung von narzierende mRNA.
Beim Gro-Seq wird die Transkription nur durch Zugabe von Sakrosyl gestoppt.
-Pro-Seq hat hoehere Aufloesung

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15
Q

Nennen Sie technische Nachteile von Gro-Seq gegenüber Net

A

Gro-Seq hat eine schlechtere Auflösung und liefert schlechtes Gesamtbild, weil nur Zellkern-RNA-Analyse

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16
Q

Sie wollen die Transkription in Mitochondrien von HeLa-Zellen mittels Gro-Seq messen. Welches Problem müssen Sie lösen?

A

Wenn man die Transkriptionsrate messen will, also wieviel RNA tatsächlich hergestellt/synthetisiert wurde, muss man den Verbrauch der RNA (translation)durch das Mitochondrium selbst unterbinden. Die Methode ist an sich für den Zellkern konzipiert.

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17
Q

Welches Gen wir am wahrscheinlichsten über Translation reguliert?

a) Gen mit stabiler mRNA, stabilem Protein
b) Gen mit stabiler mRNA, instabilem Protein
c) Gen mit instabiler mRNA, stabilem Protein
c) Gen mit instabiler mRNA, instabilem

A

d

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18
Q
  1. Mittels welchen Experiments können Sie Polysomen anreichern?
A

Polysom-Sequenzierung (Dichte Gradient)

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19
Q

Welche Bedingungen muss erfüllt sein, damit Sie nach einem Ribo-Seq-Experiment eine Kodon-aufgelöste Translationsaktivität bestimmen können?

A

Es muss 28 Bb haben, damit es einem Frame zugeordnet werden kann.

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20
Q

Ein uORF wird während Stickstoffmangel in Hefe deutlich reduziert translatiert. Welche Auswirkungen hat dies wahrscheinlich auf die Translation des stromab gelegenen Haupt-ORFs?

A

Der Haupt ORF wird dann deutlich stärker translatiert.

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21
Q

Sie wissen, dass die neg. RNA negativ über die Termination der Translation reguliert wird. Wie sähe die read-coverage für diese mRNA in einem Ribo-Seq Experiment aus?

A

Negativ kontrolle über UAG, am UAG sitzt Ribosom, alle anderen Ris kommen nicht weiter.

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22
Q

Welche Möglichkeiten nutzen eu Zellen, um die Initiation der Translation zu Regulieren?

A

IRES, Zirkulation der mRNA, eIF4, PABP?, micro RNAs (Repression)

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23
Q

Sie haben einen in Wasser gelösten DNA-Einzelstrang. Was müssen Sie hinzufügen, um einen Komplementären Strang zu synthetisieren?

A

dNTPs, Primer, Taq, Puffer

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24
Q

Werlche zwei Erfindungen machen es möglich, dass die PCR günstig und effektiv in jedem Labor einsetzbar ist?

A

Taq, Thermocykler, oligo-Nukleotide (Primer design)

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25
Q

Ein Forscher hat den ORF von GFP amplifiziert und neben einen Promotor von E.coli in ein Vektor kloniert. Er kann jedoch keine Fluoreszenz in mit diesem Konstrukt transformierten Bakterien entdecken. Welche verschiedenen Typen von Mutationen können in der PCR passiert sein?
Welches ist am wahrscheinlichsten?

A
  • Primer binden an was anderes
  • wir haben Fehler am GFP (zb durch eine Mutation, das zu einem Stoppcodon geführt hat)
  • Taq könnte auch fehler gemacht haben
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26
Q

Ein Forscher hat den ORF von GFP amplifiziert und neben einen Promotor von E.coli in ein Vektor kloniert. Er kann jedoch keine Fluoreszenz in mit diesem Konstrukt transformierten Bakterien entdecken. Welche verschiedenen Typen von Mutationen können in der PCR passiert sein?

Wie würden Sie zeigen, dass es wirklich eine Mutation war und nicht ein Problem mit dem Bakterienstamm, den Sie zur Expression genuntzt haben?

A

man extrahiert das Plasmid und sequenziert es

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27
Q

Der CT (cycle threshold) ist:

a) Die Gesamtzahl an Zyklen einer real-time PCR-Reaktion
b) Der Zyklus, an dem eine Probe einen bestimmten Punkt in der real-time-PCR erreicht
c) Die Zyklenzahl, an der die Probe die Plateauphase der PCR erreicht

A

b

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28
Q

Ein PCR Zyklus besteht aus:

a) Denaturierung, primeranealing, elongation
b) Denaturierung, initiation, elong.
c) primer anealing, elong, termination
d) primeranealing, elong., termination

A

a

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29
Q

Nach 4 zyklen einer PCR- Reaktion, wie viele Moleküle sind vorhanden, wenn man mit einem DNA-Duplex angefangen hat?

A

2^4

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30
Q

ein pcr primer ist 18 basen lang, wie häugig wird er ans menschliche genom binden?

A

(3,3x10^9)/4^18

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31
Q

Sie wollen eine 22,345 BP lange Region des Mausgenoms mit PCR amplifizieren. Sie erstellen Primer mit 20, bzw. 22 Basen Länge, die identische Schmelztemps haben. Es gibt nach der Reaktion leider kein Amplikat. Y?

a) Primer haben nicht selbe länge
b) Zileregion zu groß
c) Primer zu kurz
d) sie haben mehr als 1 primer

A

b

32
Q

Die ideale Temperatur für Taq ist?

A

72 Weihnachtsmänner

33
Q

Welcher dieser Reagentien sind typischerweise nicht Teil einer PCR?

a) NTP
b) MgCl2
c) Ethidiumbromid
d) E.Coli DNA-Pol

A

a weil dNTP und d

34
Q

Was würden Sie erwarten, wenn Sie in einer PCR die Temperatur in der Annealingphase erhöhen und die Elongationsphase verlängern?

a) Präzision und Ertrag sind reduziert
b) Präzision und Ertrag sind erhöht
c) Präzision ist reduziert, Ertrag ist erhöht
d) Präzision ist reduziert, Ertrag ist erhöht
d) Präzision ist erhöht, Ertrag it erniedrig

A

b, weil Bei Annealingph. lagern sich mehr Primer an, und bei Elongation wird mehr elongiert/produziert.

35
Q

Was würden Sie erwarten, wenn man in einer PCR Primer verwendet, die etwas kürzer sind und einige variable Stellen aufweisen?

a) Die PCR Reaktion würde nicht beginnen
b) PCR würde nach dem ersten Zyklusenden
c) PCR würde ein einiges kurzes PCR-Produkt ergeben
d) PCR würde eine Mixtur unterschiedlicher Produkte ergeben

A

d

36
Q

A.5‘-3‘ Elongationsaktivität der Taq-Pol
B.5‘-3‘ Exonuk.akt. der Taq-Pol
C.beide
D.keine von beiden

1_erzeugt Phosphodiesterbindungen
2_schneidet
3_schneidet Wasserstoffbindungen
4_ist Primer abhängig
5_baut die Primer zu Mononukleotide
6._baut TaqMan Sonden zu Mononuk. ab
7_hat Proofreading Aktivität
A
  1. A
  2. B
  3. B
  4. C
  5. D/Wenn es die falschen Primer sind dann B
  6. B
  7. D
37
Q

Während die PCR läuft, steigt die Floureszenz ab einem bestimmten Zeitpunkt in beiden Ansätzen. Welcher Prozess erklärt dies?
a)Taq-Man-Sonden werden zu Nuks abgebaut
b)TM-S. Werden zu kleinen Oligo-Nucs abgebaut
c)TMS. Werden als intakte Oligos vom Template gelöst
d)TMS dienen als Primer für die Taq-Polymerase
E) TMS werden in den neu synthetisierten DNA-Strang eingeaut

A

a

38
Q

Was gilt für das dem Amplifikat in A zugrundeliegende Template?
A. Seine Kopienzahl ist ungefähr 30 mal häufiger als in B
B. Seine Kopienzahl ist ungefähr 5 mal häufiger als in B
C. Seine Kopienzahl nahm ungefähr 30 mal ab relativ zu B
D. Seine Kopienzahl nahm ungefähr 5 mal ab relativ zu B
E. Seine Kopienzahl nahm um den Faktor 5 ab

A

A, das liegt daran, dass die Ct-Differenz bei 5 Zyklen liegt. Dies bedeutet, dass Probe B 5 zyklen mehr gebraucht hat, um auf die selbe Anzahl von DNA zu kommen. Die bedeutet, dass Probe A 2^5=32 mal mehr DNA hatte.

39
Q

Wie kann man nachweisen, dass dsRNA Moleküle zu RNA Interferenz führen?

A

2 Ansätze, beim Doppelstrang sieht man was, bei Einzelstrang nix.

40
Q

Wie wird RNAi in C.elegans oder Arabidopsis verstärkt?

A

RdRP: durch RNA dependet RNA-Polymerase wird siRNA repliziert

41
Q
  1. Welches dieser Enzyme spielt keine essentielle Rolle bei der RNA Interferenz?
    a) Endonuklease
    b) Dicer
    c) Argonaute (AGO)
    d) Topoisomerase
    e) RNA-abhängige RNA-Polymerase
    f) RNA-Polymerase II
A

D

42
Q

In einer Northern-Hybritisierung mit einer Ribosonde erhalten sie zu viele unspäzifische Banden-Kreuzhybritisierungen. Wie können Sie diese vermindern?

A

Hohe Stringenz: Temperatur hoch, niedrige Salz konz. Und hohe konz. An Denaturierungs Agentien

43
Q

Welcheder unten angeführten Resultate einer Endprodukt-RT-PCR zur Validierung eines shRNA Ansatzes zeigt, dass das Experiment nicht geeignet für weitere Silencing Experiment

  • Zellen transfiziert mit einer shRNA gegen die Ziel-mRNA zeigen kein Amplikon.“Wild Typ“ Zelllinie zeigt ein Amplikon. Zellen transfiziert mit „Vektor-shRNA“ zeigen kein Amplikon. Zelle nur mit „Transfektionsreagenz“ behandelt zeigen Amplikon.
  • Zellen transfiziert mit einer shRNA gegen die Ziel-mRNA zeigen kein Amplikon.“Wild Typ“ Zelllinie zeigt ein Amplikon. Zellen transfiziert mit „Vektor-shRNA“ zeigen Amplikon.Zellen nur mit „Transfektionsreagenz“ behandelt zeigen Amplikon.
  • Zellen transfiziert mit einer shRNA gegen die Ziel-mRNA zeigen kein Amplikon.“Wild Typ“ Zelllinie zeigen kein Amplikon. Zellen transfiziert mit „Vektor-shRNA“ zeigen kein Amplikon. Zellen mit „Transfektionsreagenz“ behandelt zeigen Amplikon.
A

das 3te, weil zeigt ZEllen mit Vector shRNA kein Amplikon und 1ste, weil Wildtyp-Zellen zeigt kein Amplikon

44
Q

RNAi kann für funktionelle Genomik genutzt werden. Dies wurde besonders erfolgreich für C.elegans eingesetzt. Warum?

A

Wegen RNA-Abhängige Polymerase und eingache Aufnahme von siRNA mit E.Coli

45
Q

Sie sind ein Übereifriger Student. Prof sagt Ihnen, dass Sie ein unbekanntes Gen mittels reverser Genetik in Drosophila untersuchen sollen. Sie sollen eine Transposon-Mutagenese machen.Dickköpfig wie Sie sind, versuchen Sie Prof zu überzeugen, lieber RNAi zu benutzen. Nennen Sie Argumente.

A

-RNAi: spezifischer, einfacher zu designen, reversible, hypomorph
Hypomorph: Knock-down, part.Funktion verhindert.
-Transposons machen das Gen kaputt, welches essenziell ist

46
Q

Homozygote Mausmutanten von Dicer sterben bereits als Embryo, obwohl kein Virenbefall und auch damir auch keine siRNA-Abwehr nötig war. Warum?

A

DICER produzieren siRNAs und spielen damit eine bedeutende Rolle in der Regulation der Proteinbiosynthese des Körpers. 30% der Genregulation findet über RNAi statt!

47
Q

Was passiert in einer Zelle, nachdem Cas 9 geschnitten hat, aber kein DNA template für homologe Rekombination mitgeliefert wurde?

A

NHEJ: Non homolog end-Rejoining=> Random Repair

48
Q

Wie kann Cas9 in der Gentherapie eingesetzt werden, um Erbkrankheiten, wie zB cystische Fibrose zu heilen?

A

HDR reperatur der Schnittstelle=> Reparatur der Cas9 Schnittstelle durch Knock-In eines exogenen Abschnitts

49
Q

Welche enzymatische Aktivität hat Cas9?

A

DNA-Endonuklease

50
Q

Crisper repeats finden sich in:

a) bakterieller DNA
b) viraler DNA
c) Pilz-DNA
d) viraler RNA

A

A und seit neustem anscheinend B wird gemunkelt

51
Q

Welches der folgenden Proteine wurde nicht für Genomeditierung genutzt?

a) ZFN
b) TALENs
c) Crisper-Cas9
d) MHC

A

d

52
Q

CRISPER Sequenzen im Zielgenom werden erkannt durch:

a) Zinkfinger
b) Tale-Repeats
c) RNA (guide)
d) Leucin zipper

A

c

53
Q

Wofür steht die Abkürzun CRISPER?

A

Clusterd Regulary Interspaced short Palendromc Repeats

54
Q

Wie unterscheidet sich CRISP-Cas9 fundamental von anderen Genomeditierungswerkzeugen?

A

enthält RNA

55
Q

Welchen vorteil haben andere Genomwerkzeuge gegenüber CRISPER?

A
  • Spezifität von CRISPER limitier durch Länge der crRNA-Ziel homologie
  • Zinkfinger: man vermeidet offtargets durch längere Nukleotide am Zinkfinger-Chain
56
Q

Cas9 muss in seiner Sequenz verändert werden, um es zur Editierung von eukaryotischen Genomen zu verwenden. Inwiefern?

A

Man muss Cas9 irgendwie in den Zellkernbringen. NLS

57
Q

Wie können offtargets durch CRISPER vermindert werden?

A
  • Kurze Expressionszeit der sgRNA
  • Veränderte sgRNA mit halbwertszeit
  • Kooperation von Cas9 Nukleasen, die nur zusammen die DNA schneiden können
58
Q

Welches dieser Projekte wäre am besten für Next Gen Seq. geeignet

a. Zu bestimmen, ob ein Tumor eine bestimmte missense-Mutation aufweist?
b. Das Transkriptom eines Tumors zu bestimmen
c. Eine genomische DNA Probe nach einigen bekannten SNPs zu untersuchen
d. All of above

A

b. Weil NGS nur fuer die Sequenzierung des ganzen genoms sinn macht

59
Q

Welcher dieser Schritte ist wichtig fuer die Erstellung eines Templates fuer NGS?

a. DNA Isolierung
b. Zerkleinern der DNA in kleinere Fragmente
c. Ueberpruefen der Qualitaet und Quantitaet der DNA Fragmente
d. All of above

A

d

60
Q

Nachdem Sequenzen eines NGS Expirementes erhalten wurden- was tun Sie zuerst?

a. Bioinformatische Analyse der Daten
b. Validierung der Daten mit einer unterschiedlichen Methode
c. Publizieren der Resultate
d. Weitere Analyse einzelner Sequenzen

A

a

61
Q

Was bedeutet “Brueckenamplifikation”

A

wird bei Sequence by synthesis benutzt. eine Bruecke aus ssDNA wird mit hilfe von zwei adaptoren gebildet. Auf dem Boden des Flowcells befinden sich zwei oligonukleotide, die jeweils zu einen Adaptor komplimentaer sind. Somit binden sie auch die Adaptoren und es bildet sich eine bruecke. Polmerase elongiert die ssDNA bruecke bildet dsDNA. dsDNA wird denaturiert entstehen zwei ssDNA=Amplifikation und es entsteht DNA cluster.

62
Q

wie unterscheiden sich 454 und Illumina NGSs Techniken?

A

454: Pyrosequencing
Illumina: Sequencing by synthesis

63
Q

Welches Reaktionsprodukt der Kettenverlaengerung wird fuer die Visualisierung der Pyrosequenzierung genutzt

A

Pyrophosphat (PPi)

64
Q

DNA wird aus menschlichem Blut extrahiert und zehn Gene von Chromosom 22 werden amplifiziert. Die PCR Produkte werden aufgereinigt und mit der Sangermethode sequenziert. An bestimmten Positionen in der Sequenz treten Ambiguitäten auf. Wieso?

A

Ambiguität: auf Sequenzlesung sind zwei verschiedene Basen sichtbar. Beziehungsweise man bekommt an einer Stelle der DNA zwei verschiedene Signale, jeweils fuer eine Base.

Antwort: Menschen sind Heterozygot. 2 Chromosomen unterscheiden sich an manchen Stellen und dieser Unterschied wird als Ambiguität gelesen

Alternativ: Bei Senger: je kürzer die ersten Sequenzen sind, desto ungenauer.

65
Q

DNA wird aus menschlichem Blut extrahiert und zehn Gene von Chromosom 22 werden amplifiziert. Die PCR Produkte werden aufgereinigt und mit der Sangermethode sequenziert. An bestimmten Positionen in der Sequenz treten Ambiguitäten auf. Wieso?
Nun wurde dasselbe PCR produkt mit der Illuminaplattform sequenziert. und sie sehen keine Ambiguitäten mehr. wieso? Welche analytische Analyse machen Sie um Ihre Hypothese zu testen?

A

bei Illuminati wird nur eine singlestrange DNA analysiert beziehungsweise werden nur die einzelne Molekule/basen sequenziert.und deswegen sieht man keine Ambiguität mehr.
Test: SNP genotyping

66
Q

Warum spielen Mitochondrien eine Rolle für den Erfolg des Klonierens beim Kerntransfer, aber nicht beim Embryo Splitting?

A

Da beim Kerntransfer erfolgt ein Transfer vom Zellkern einer Zelle ( bei Dolly Euterzelle) in die Eizelle eines anderen Tieres, wo zuvor der Zellkern entfernt wurde. Da nur die Eizelle Mitochondrien hat und die Befruchtung nur mit einer einzelnen befruchteten Eizelle erfolgt, ist das Vorhandensein des Mitochondriums in der Eizelle sehr sehr wichtig. Mitochondrien hat eigenes DNA, was mit dem Kern zusammenspielt.

Beim Embryo Splitting erfolgt eine Spaltung der Embryo ab einem Mehrzellstadiun(zb 6 od. 8 Zellstadium). Hierfür sind zwar Mitochondrien auch sehr wichtig, allerdins befinden sich die Zellen in einer permanenten Teilungsphase, was das Fehlen von Mitochondrien in einzelne Zellen weniger problematisch macht.

67
Q

Wie kann man ausschließen, dass Dolly durch eine nicht erkannte Befruchtung entstanden ist?

A

Die Leihmutter(3te Mutter) ist phänotypisch verschieden vom Dolly.

68
Q

Weiße Kolonien, aber kein längeres Insert nach Restriktionsverdau? Wieso?

A

Lac Z ist kaputt. Eventuell Leserasterverschiebung

69
Q

Wie heißt das erste jemals geklonte größere Tier?

A

Dolly

70
Q

2 Plasmide, die multi-copy vorliegen, nennt man:

a) String Plasmide
b) Relaxierte Plasmide
c) Kryptische Plasmide
d) Alles falsch

A

b

71
Q

2 Plasmide wurden fusioniert: kann so nicht isoliert werden aus E.Coli, warum?

A

Wegen 2 Origins of Replication, Polymerase würden gegeneinander

72
Q

Welche Art Enzyme brauchen Sie, um mittels Gate-Way-Technologie zu klonieren?

A

Integrase (int), ist ein Nukleotidyltransferase. ist ein Enzym von Retroviren, das für den Einbau viraler DNA-Stränge in die Chromosomen der Wirtszelle zuständig ist. Sie ist eines von drei Schlüsselenzymen der Retroviren
Integrase Host Factor (IHF)
Excisionase (XIS)

73
Q 
Verbinden Sie die Vektorattribute und die Funktion. Nicht Alle Antworten müssen genutzt werden.
...1...Restriktionsstelle
...2..Replikationsursprung
...3...Promotor
...4...Antibiotikaresistenz

A)Wird für die Expression des Inserts gebraucht
B) Erlaubt die Insertion von DNA in den Vektor
C) Kodiert ein Enzym
D) Erlaubt Selektion von Bakterien, die den Vektor aufgenommen haben
E)Wird zur Duplikation des Vektors benötigt
F) Wird für die Bindung von SRP benötigt (signal recognition partikel)
G) Ribosomenbindestelle

A

1)B ,2) E,3)A ,4)D

74
Q

Welche enzymatische Aktivitäten brauchen Sie für eine Golden-Gate-Klonierung?

A

Typ II S Restriktionsenzym

75
Q

Wie können Sie ohne Restriktionsenzyme klonieren?

A

Mit der Gate-Way-klonierung.

76
Q

Nennen Sie ine wichtiges Problem des Gibson-Clonings

A

Die frei werdende Enden haben eine Tendenz mit sich selbst zu hypritisieren un ein Loop zu bilden.

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