Valid/vérif et contrôle de qualité Flashcards
Nomme les 5 types de méthodes d’analyse et une petite description de chacune.
-Routine : courant en laboratoire, simple, + sujette à l’erreur
-Référence : valider méthodes de routine, établir valeur du matériel de référence (ex: calibrateurs commerciaux 2aire)
-Définitive : complexe et peu accessible (ID-MS), déterminer vraie valeur d’un analyte, établir valeur du matériel de référence primaire
-Normalisée : approuvées par Santé Canada, utilisée dans domaine d’application attendue, donné par manufacturier
-Non-normalisée : non-approuvées par santé Canada (in-House) ou normalisées mais utilisées en-dehors du domaine d’application/modification (ex : matrices non-approuvées, modif intervalles de mesure, réactif third party)
Pourquoi faire une évaluation de méthodes?
Combler un besoin des cliniciens
Modifier méthode actuelle à cause de plusieurs facteurs:
-délais
-disponibilité
-coûts
-performance
-modif de la formulation d’un réactif par manufacturier
Quels sont les processus d’évaluation de méthodes?
1.Caractérisation du besoin clinique (clientèle visée, spécialité médicale, délais pertinents, échantillons, fréquence d’exécution, performance clinique et coûts impliquées)
2.Plannif d’évaluation de méthode (pour définir besoins matériels et objectifs de performance)
3.Mesure des paramètres de performance analytique
Quels sont les principaux éléments à regarder lors du processus d’évaluation de méthodes (paramètres de performance analytique)?
-Imprécision
-Exactitude (biais)
-Intervalle de mesure et linéarité
-Détermination sensibilité analytique
-Erreur totale et incertitude de mesure
(+spécificité analytique, susceptibilité aux interférences, objectifs de performance analytique, valeurs de référence)
Nomme et décrit les 3 paramètres à calculer pour déterminer l’imprécision.
-Répétabilité : intra-série (within-run), capacité d’obtenir même résultat lors de mesures successives du même échantillon par la même méthode dans les mêmes conditions
-Fidélité intermédiaire : intra-lab (within-lab), capacité d’obtenir même résultat lors de mesures successives sur plusieurs jours du même échantillon par la même méthode dans les mêmes conditions
-Reproductibilité : capacité d’obtenir même résultat lors de mesures successives du même échantillon par la même méthode dans des conditions différentes
Comment déterminer une imprécision lors de validation?
20x2x2:
-20 jours
-2 séries d’analyse par jour en duplicata
-2 niveaux de concentration dont 1 proche du seuil de décision clinique
-modifier ordre d’analyse des échantillons entre série
-CLSI EP05-A3
Comment déterminer une imprécision lors de vérification?
5x5:
-5 jours
-1 séries d’analyse par jour avec 5 réplicats
-2 niveaux de concentration dont 1 proche du seuil de décision clinique
-modifier ordre d’analyse des échantillons entre série
-CLSI EP15-A3
Quel est le calcul de la répétabilité?
Sr= √ ( (∑(d=1)^D x ∑(r=1)^n x〖(Xdr-Xmoy)〗^2 ) / (Dx(n-1)) )
D= nombre de jours
n=nombre de réplicats
Xdr=résultat du réplicat r sur journée d
Xmoy = moyenne de tous les réplicats sur jour d
à faire pour chaque niveau de concentration
Quel est le calcul de l’imprécision intra-lab ou intra-instrument?
St = √(〖Sdd〗^2 +〖Srr〗^2 +〖Sr〗^2)
St = écart-type intra-lab ou intra-instrument
Sdd = écart-type inter-jour
Srr=écart-type inter-routine
Sr = répétabilité
Qu’est-ce que l’évaluation de l’exactitude?
-Comparaison résultats de la méthode en évaluation avec méthode de référence pour plusieurs échantillons de concentrations variées
-Analyse de matériels pour les valeurs sont certifiées
Nomme les étapes pour faire une étude de récupération/vérification.
- 2 pool de sérum avec conc différente (échantillons base)
- préparation d’une solution concentrée de l’analyte
- à chacun des pools de base, on ajoute solution concentrée
- dose différentes solutions et calcul % récupération (moy 4 par solution)
- calcul de la récupération moyenne de tous les niveaux de concentration pour déterminer biais et nature de l’erreur systématique (constante ou proportionnelle)
Quels sont les étapes pour déterminer une exactitude avec une méthode reconnue.
1- minimum 40 échantillons au total analysés en duplicata sur au moins 5 jours
2- inverser ordre analyse des échantillons entre chaque série
3- analyse avec nouvelle et ancienne méthode (délai max 4 heures entre les 2 méthodes)
4- distribution homogène des niveaux de concentration idéalement 50% à l’extérieur des valeurs de référence
5- déterminer coefficient de corrélation de la droite de régression et des paramètres de la droite (pente, ordonnée à l’origine, écart-type)
À quoi sert chacun des paramètre de la droite de régression dans la détermination de l’exactitude avec une méthode reconnue?
-Coefficient de corrélation (r): doit servir qu’à valider l’analyse par régression linéaire (r ≥ 0,975 est correct)
-Pente: donne une estimation du biais systématique proportionnelle
-Ordonnée à l’origine: donne un estimé du biais systématique constant
-Droite de régression (y=ax+b): peut être utilisé pour déterminer biais systématique à un niveau donné de concentration
Qu’est-ce qu’une étude de corrélation?
-Régression linéaire où x= mesures de référence et y = mesures de la méthode en évaluation
-Donne un graphique de corrélation avec pente, ordonnée à l’origine, droite de régression et coefficient de corrélation.
Est-ce qu’un coefficient de corrélation de 1 indique que la régression est bonne?
Non
-r=1 indique seulement que la corrélation est parfaite, peu importe où sont les points sur la droite (ex : tous les résultats sont systématiques le double)
-N’indique rien en ce qui concerne l’erreur systématique entre les deux variables (indique seulement le degré d’association)
Quelles sont les faiblesses de la droite de régression et comment faire pour pallier à ces problèmes?
-Coefficient de corrélation très sensible à l’intervalle des valeurs étudiées
-Plus intervalle grand et plus r sera élevée
-Pour palier ont fait graphique de différences (Bland-Altman)
Qu’est-ce que le coefficient de détermination?
Mesure de la proportion de la variation de y qui s’explique par la variation de x dans l’équation de régression y=ax+b
Qu’est-ce que l’écart-type résiduel et comment le calculer ?
-ET entre valeurs mesurées et valeurs prédites par la droite de régression (décrit distribution/dispersion des points autour de la droite)
-plus résiduel élevé = plus on varie autour de la droite
-Ex : 68,3% des points seront localisée à l’intérieur de Ŷ ± SYX
Syx= √ ( ( ∑〖(MoyY-Yp)〗^2 ) / (N-2) )
MoyY = moyenne des résultats mesurées en duplicata
Yp= valeur prédite selon la régression linéaire
Nomme les différents types de régression linéaires et les décrire.
-Régression linéaire simple : assume qu’il n’y a pas d’erreur de mesure en x et que l’erreur en y est constante sur l’ensemble de l’intervalle de mesure.
-Régression Deming : méthodes x et y assujetties aux erreurs, méthodes comparées sont semblables et sans données aberrantes (outlier), méthodes de choix
-Régression Passing-Bablok : méthode x et y sont sujettes aux erreurs, régression non-paramétrique plus résistante aux outiliers
Qu’est-ce que le graphique de différences Bland-Altman et comment peut-il être fait?
-Met en évidence la différence qui existe entre chacune des paires de données x et y
-Différence peut être en absolue ou relative
-Calculée par rapport à x ou par rapport à la moyenne obtenue par les deux méthodes (si aucune des deux n’est la méthode de référence)
Qu’est-ce que permet le graphique de Bland-Altman?
-Permet d’observer l’erreur systématique de la méthode en évaluation
-Permet aussi de détecter facilement les erreurs aléatoires contrairement au graphique de corrélation
Que permet de déterminer les études de comparaison/corrélation?
-Permet de déterminer biais moyen analytique entre deux méthodes que l’on peut ensuite comparer à des cibles de performance déjà établies (littérature, maufacturier, biais acceptable selon variabilité biologique)
Qu’est-ce que l’intervalle de mesure et linéarité? Comment est-ce déterminé?
-Intervalle de concentration ou il y a une relation directement proportionnelle entre signaux mesurées par une méthode et sa concentration
-Déterminé par dilutions sériées d’un échantillon de concentration très élevé ou par mélange en diverses proportions d’un pool haut et bas (en duplicata).
Comment techniquement faire une intervalle de mesure et comment détecter la linéarité?
-Pour vérification : 5-7 concentration à l’intérieur de l’intervalle de mesure connu
-Pour validation : 7-11 concentrations dépassant 20-30% l’intervalle de mesure anticipée
-Faire graphique concentration en fonction du signal (absorbance) et déterminer la linéarité par inspection visuelle
Qu’est-ce que la détermination de la sensibilité analytique? Elle dépend de quels facteurs?
-Déterminer le seuil de concentration en deçà duquel le résultat sera rapporté étant plus petit que x.
-Dépend de 2 facteurs : intensité signaux analytiques témoins (blanc) et précision des mesures témoins
Qu’est-ce que la limite du blanc (LOB) et comment l’obtenir?
-Concentration statistiquement la + élevée que peut être observé par le blanc
-20 mesures du blanc (60 pour valid) et pas plus de 5% des résultats ne devraient excéder la limite du blanc connue.
-Si gaussienne = limite blanc = moyennebl + 1,65 x ETbl.
-Si pas gaussienne, place valeurs en ordre croissant et on prend la valeur qui correspond au 95e percentile.
Qu’est-ce que la limite de détection (LOD) et comment l’obtenir?
-+ petite concentration qui peut être détectée de manière fiable (max 5% des mesures en bas de la limite du blanc)
-Analyse échantillons (vérif=20 et valid=60) avec concentration au plus 4 fois la limite du blanc
-95% devraient être plus élevé que la limite de blanc connue
- Si gaussien = limite de détection = limite de blanc + 1,65 / (1-1/4F) x ET
(ou F= nombre de résultats-nombre d’échantillons)
-Si pas gaussienne, place valeurs en ordre croissant et on prend la valeur qui correspond au 95e percentile
Qu’est-ce que la limite de quantification (LOQ) et comment l’obtenir?
-+ petite concentration qui peut être détectée de manière fiable et que l’erreur totale rencontre l’exactitude requise
-Analyse quelques échantillons (vérif = 25 et valid =40) ayant concentration similaire à limite de quantification proposée.
-95% devraient être dans la limite de l’erreur totale
Qu’est-ce que la sensibilité fonctionnelle?
-+ petite concentration pour laquelle la répétabilité ne dépasse pas les normes établis
-Habituellement: CV ≤ 15-20% (≤10% pour troponine)
Qu’est-ce que l’erreur totale et comment la calculer?
-Attribuable aux erreurs systématiques ET erreurs aléatoires
-Combinaison de l’erreur de biais et de l’erreur d’imprécision
-Assume qu’on peut mesurer l’erreur entre la mesure et la vraie valeur
TE = %biais + Z x CV = biais + 1,65 x imprécision
TE = (Z x √[(CVbiol.intra)^2+(CVbiol.inter)^2]) + 1.65 x (0,5 x CVbiologique intra)
ensuite, comparer valeur avec un objectif de performance analytique
Qu’est-ce que l’incertitude de mesure et comment la calculer?
-Quantification du degré de doute ou d’incertitude qui accompagne un résultat
-Définie l’étendue requise pour avoir un degré de confiance de 95% autour d’une mesure (ex : 40+-2 = résultat réel entre 38 et 42)
-Approche CQI/CQE
u(c) = √ (u^2(CIQ) + u^2(EEQ) )
u^2(CIQ) = variance liée aux contrôles internes
u^2(EEQ) = variance liée aux contrôles externes
Nomme d’autres caractéristiques de performance qui peuvent être analysés.
-intervalle de référence
-équivalence des matrices
-concordance clinique
-seuils de positivité
-spécificité analytique
-interférences
-stabilité des réactifs
-variations inter-lots
-stabilité des analytes
-robustesse des méthodes
Qu’est-ce que la gestion/contrôle de la qualité?
Ensemble mesures mises en œuvre qui permet de s’assurer que la réalisation d’un examen de laboratoire soit exempte d’erreurs portant atteinte à sa qualité (normes pré-établies et uniformité).
