Transkriptionell genreglering Flashcards
Hur ser uppbyggnad av kärnporen och omkringliggande/associerade strukturer ut?
- Kärnmembranet är dubbelt med ett lipidlager som “svänger runt” då det når kärnporen för att bygga upp det andra lagret. Det yttre lagret är i direkt kontakt med och bygger upp ER-membranet
- Laminer bildar intermediärfilament på kärnsidan.
- Kärnporen är rund och stabiliseras i membranet. Scaffold nucleoporins bygger upp dess struktur (längst ut i poren) och channel nucleoporins (i mitten av poren) står för transportmekanismen genom poren.
- Mot den cytoplasmatiska delen finns cytosoliska fibriller.
- På insidan av poren finns kärnkorgen som byggs upp av proteiner
Hur sker kärntransport med NLS?
- Importin som finns i cytoplasman binder till proteinet med NLS
- När de når channel nucleoporins går de mellan proteinernas utskott tills de är genom poren.
- Ran-GDP binder till importin så att det släpper importproteinet
- Importin med Ran går tillbaka ut i cytoplasman
- Ran-GAP hydrolyserar till Ran-GDP som sedan kan gå tillbaka till kärnan
- Ran-GEF omvandlar GDP till Ran-GTP
Varför är det viktigt med omvandling mellan Ran-GDP och Ran-GTP vid kärntransport?
För att när Ran-GTP har bundit till ett transportkopmlex på insidan av kärnmembranet kommer lasten att låsas på denna sida. Det omvända gäller för Ran-GDP.
Hur sker mRNA-export från kärnan?
Då mRNA transkriberas i kärnan kommer mRNA exporter/transporter att binda till molekylen och föra den mot kärnporen för bindning till nukleoporiner. På den cytoplasmatiska sidan finns ATP-beroende helikaser som lossar exportörerna och ett cytoplasmatiskt protein binder istället till mRNA och låser den då på denna sida. På så sätt kommer hela proteinet successivt att gå ut ur kärnan.
Vad är generella transkriptionsfaktorer?
Transkriptionsfaktorer som är gemensamma för alla gener som uttrycker mRNA med RNApol II
Vad är specifika transkriptionsfaktorer?
Transkriptionsfaktorer för ett begränsat antal gener/en gen. Dessa kommer att styra de allmänna.
Vad är en mediator?
Co-faktorer till aktivatorerna och överför signalen från aktivatorn till de allmänna transkriptionsfaktorerna
Vad är silencers?
En sekvens som binder repressorer
Vad är enhancers?
Relativt stora sekvenser på 50-200 bp och kan då binda till flera aktivatorer.
Vilken är gränsen mellan distala och proximala reglerande element?
Ungefär 200 bp bort
Vilka är de olika typerna av transkriptionsfaktorer som finns?
- Leucine-zippers
- Helix-loop-helix
- Helix-böj-helix
- Homeodomänprotein - styr anläggande av organ
- Zn-finger
De interagerar med major groove
Med vilka bindningar binder transkriptionsfaktorn till DNA:t?
- Vätebindningar (H-O, H-N)
- Hydrofoba interaktioner
- Jonbindningar
I major groove kommer ett särskilt mönster av väte, syre och kväve att ha bildats som måste matchas av transkriptionsfaktorn som nyckel i låset. Om matchningen är bra så kommer det bli bra transkription.
Vilka histonmodifieringar är vanliga?
- Acetyleringar/deacetyleringar
- Metyleringar
- Fosforyleringar
- Ubiquitinyleringar
- Modifierade histoner
På vilka sätt kan kromatinremodulering ske?
- En gen i heterokromatin har en transkriptionsregulator tillgänglig “utåt”
- Därefter kan fyra olika alternativ ske:
•Kromatinremoduleringskomplex rekreyteras och initierar nukleosome sliding som öppnar upp strukturen och tillåter tillträde av transkriptionsmaskineriet till DNA
•Histonchaperoner som exempelvis binder upp histoner och då lämnar DNA öppet
•Histonchaperoner kan också ge större access till nukleosomalt DNA
•Histonmodifierande enzym kan exempelvis acetylera histoner för att luckra upp kromatinstrukturen
Vad innebär reader-writer?
Det är processen då förändring i kromatinstruktur på en plats kommer att sprida sig. En molekyl “reader” sätter sig på modifieringen som finns. “Writer” hittar därefter en histon i närheten och ger denna samma modifiering varpå processen kan upprepas. Efter ett tag kommer dock reader att släppa och det hela upphör. Det finns även barriärer i genomet som stoppar spridning.