Técnicas de Preparação de Amostras Flashcards
Quais são os passos da preparação de amostras?
Extração, limpeza ou fracionamento, concentração e derivatização
Qual é o principal objetivo?
Retirar os analitos com interesse da matriz da amostra, numa forma mais adequada para a sua introdução no sistema cromatográfico ou outro método analítico
Quando se faz uma análise direta?
Quando os teores são significativos
Quando se faz um enriquecimento prévio?
Quando os teores são vestigiais
As técnicas de preparação podem ser classificadas temporalmente e são:
técnicas clássicas e técnicas modernas
As técnicas de preparação podem ser classificadas tendo em conta o meio:
amostras gasosas, liquidas e sólidas
Técnicas clássicas: LLE (extração liquido-liquido)
Basicamente decantação
baseia-se na distribuição ou partição dos analitos entre a fase aquosa onde normalmente estão e uma fase orgânica imiscível;
para recuperar os analitos e ganhar em sensibilidade, parte-se de volumes consideráveis de amostra para finalizar com pequenos volumes de solvente orgânico;
são vulgarmente feitas extrações sucessivas com solvente orgânico
Desvantagens da LLE:
é necessário um passo de concentração
grande tempo dispendido e consumo excessivo de solventes organicos toxicos
não permite automatização
Técnicas clássicas: SPE (extração em fase sólida)
cromatografia em coluna
Baseia-se nas propriedades adsortivas das superfícies sólidas;
técnica muito poderosa, versátil, relativamente rápida e possibilita automatização online
Para que é utilizada a técnica SPE?
para extração, concentração e limpeza de analitos presentes em diversos tipos de matrizes
Em que consiste o processo de SPE?
o analito é transferido para uma fase sólida, disco ou cartucho,
elui-se com o primeiro solvente promovendo a saída de impurezas e com o segundo solvente, o analito adsorvido pela fase estacionária é agora recolhido
Qual a diferença entre um disco e um cartucho?
No disco, o tamanho de partícula é menor, o que permite uma maior capacidade de retenção
Os cartuchos são de polipropileno ou vidro
LLE vs SPE
LLE: manipulação do analito várias vezes, aplicação restrita, grandes volumes de solvente e muito tempo
SPE: manipulação do analito uma vez, pouco tempo e pouco volume de solvente, grande aplicação e pode ser automatizada
Onde é feita a SPE?
cromatografia em coluna
Técnicas clássicas: LSE (lixiviação com solventes orgânicos)
O solvente é aquecido e vaporizado, condensando e caindo sobre o cartucho que contém a amostra
Os analitos são lixiviados ficando retidos à superficie do enchimento, regressando o solvente ao balão de enchimento
SPME: microextração em fase sólida/extração sorptiva
Os analitos são extraídos de uma matriz liquida ou gasosa, para um polimero liquido imiscivel
Se a amostra é liquida, a fibra é colocada no interior da solução; se é gasosa, a fibra é colocada no espaço de cabeça
Vantagens e objetivos da SPME
Vantagens: bom desempenho analitico, sensivel e baixo custo
O objetivo é obter extratos relativamente limpos e concentrados, ideais para espectrometria de massa
Limitação da SPME:
quantidade de material polimérico é muito pequena, logo a quantidade de analito extraído é baixa
SBSE (Extração sorptiva em barra de agitação):
Muito mais sensível e com maior capacidade extrativa do que SPME devido ao volume do revestimento da barra ser bastante superior
Características de SBSE:
extração eficiente, técnica robusta, possivel de automatização, barra e agitação magnética revestida com PDMS; pode ser SBSE, HSSE ou PASSIVO
QUECHERS: extração em fase solida dispersiva
muito explorado na analise de vestigios de pesticidas;
baseia-se na extração ou particao com adição de um solvente organico e limpeza com PSA, SPE dispersivo, etc
Técnicas de amostras gasosas: SHS (espaço de cabeça estático)
a amostra é aquecida num frasco fechado, é removida e vai diretamente para o cromatograma
Técnicas de amostras gasosas: DHS ( espaço de cabeça dinâmico)
Faz-se borbulhar um gás inerte, que vai levar a amostra atrás de uma “ratoeira”. Aquece-se a ratoeira e a amostra volátil vai para o cromatograma
Derivatização
Transformação quimica do composto a analisar, de modo que seja mais adequado ao método analitico selecionado;
deve ser evitado porque encarece o processo;
Está associado a outros processos
Em que consiste a derivatização?
Converter um composto num mais estável, Aumentar a volatilidade e/ou reduzir a polaridade, Melhorar a eficiência da extração, seletividade e deteção,
Aumentar a sensibilidade d o método
