HPLC

Question 1

qual a tradução de HPLC?

Answer 1

cromatografia líquida de elevada eficiência

Question 2

Em que consiste a HPLC?

Answer 2

é uma técnica que utiliza um líquido como fase móvel e equipamentos para separar os componentes de uma amostra pela interação entre a fase estacionária e a fase móvel

Question 3

Quais as aplicações da HPLC?

Answer 3

fármacos, cosméticos, vitaminas, alimentos etc

Question 4

qual é uma das condições na HPLC para a amostra?

Answer 4

A amostra tem de ser solúvel na fase móvel

Question 5

Quais os componentes de um equipamento HPLC?

Answer 5

1. reservatório de solventes
2. bomba
3. injetor
   4 coluna
4. detetor
5. computador

Question 6

Quais as características que os solventes da fase móvel devem ter?

Answer 6

• Deve ter alto grau de pureza
• Dissolver a amostra sem decompor os seus componentes
• Ter polaridade e viscosidade adequadas
• Não degradar a fase estacionária
• Ser compatível com o detector utilizado

Question 7

Quais as caracaterísticas que a água da fase móvel em HPLC deve ter?

Answer 7

Água deve ser grau HPLC: purificada com resinas de troca iónica, carvão activado ou filtros de membrana (isentos de bactérias)
Deve ser produzida no momento do uso pois é facilmente contaminável

Question 8

Qual a função das bombas de alta pressão?

Answer 8

enviar fluxo constante e reprodutível da fase móvel, a uma pressão elevada, para o injetor, coluna e detetor

Question 9

Quais as duas formas em que pode ocorrer eluição?

Answer 9

isocrática: mesmo composição da fase móvel durante a eluição

gradiente: composição da fase móvel varia durante a eluição. é mais rápido e sensível e tem mais resolução

Question 10

quais as duas posições em que a válvula de injeção pode estar?

Answer 10

load ou inject

Question 11

o que signfifica sobrecarga de volume da amostra?

Answer 11

para obter uma máxima de eficiência não se deve injetar um volume maior do que 1% do volume da coluna vazia

Question 12

Como se pode injetar a amostra?

Answer 12

injeção manual - com seringas

amostrador automático

Question 13

porque razão se coloca pré-colunas?

Answer 13

• previne a entrada de partículas estranhas
provenientes do eluente ou da amostra
• aumenta a duração da coluna

Question 14

para que serve a coluna de separação?

Answer 14

faz o equilibrio entre a fase móvel e a fase estacionária

Question 15

Que tipo de partículas de enchimento existem?

Answer 15

porosas, não porosas e monolíticas (apresentam poros, separam rapidamente e permitem utilizar fluxos elevados sem mais pressão)

Question 16

Qual a polaridade da fase normal e da fase inversa (ambas fases estacionárias)?

Answer 16

fase normal- polar

fase reversa - apolar

Question 17

Qual a fase com mais vantagens: fase normal ou fase reversa (ambas fases móveis)

Answer 17

menos tóxicas e de menor custo
•Boa estabilidade
•Rápido equilíbrio 
•Compatível com gradiente
•Análises rápidas
•Vasto campo de aplicação

Desvantagem: intervalo de ph grande

Question 18

Qual a polaridade da fase normal e fase reversa (ambas fase móvel)?

Answer 18

fase normal apolar

fase reversa polar

Question 19

Quais os tipos de picos que queremos obter em HPLC?

Answer 19

estreitos

Question 20

Qual o principal tipo de detetor que o HPLC utiliza?

Answer 20

detetores UV visível (obedece À lei de lambert beer)

Question 21

Quais as diferentes cromatografias HPLC?

Answer 21

derivatização, cromatografia de pares iónicos, Cromatografia com Fase Estacionária Quiral, Cromatografia de Adsorção, Cromatografia iónica

Question 22

para que serve o supressor?

Answer 22

suprime o sinal elevado do eluente pois este retira a sensibilidade ao método

Question 23

o que é a UPLC?

Answer 23

cromatografia líquida de ultra eficiência. é mais rápida, tem mais resolução e maior sensibilidade