HPLC Flashcards
qual a tradução de HPLC?
cromatografia líquida de elevada eficiência
Em que consiste a HPLC?
é uma técnica que utiliza um líquido como fase móvel e equipamentos para separar os componentes de uma amostra pela interação entre a fase estacionária e a fase móvel
Quais as aplicações da HPLC?
fármacos, cosméticos, vitaminas, alimentos etc
qual é uma das condições na HPLC para a amostra?
A amostra tem de ser solúvel na fase móvel
Quais os componentes de um equipamento HPLC?
- reservatório de solventes
- bomba
- injetor
4 coluna - detetor
- computador
Quais as características que os solventes da fase móvel devem ter?
- Deve ter alto grau de pureza
- Dissolver a amostra sem decompor os seus componentes
- Ter polaridade e viscosidade adequadas
- Não degradar a fase estacionária
- Ser compatível com o detector utilizado
Quais as caracaterísticas que a água da fase móvel em HPLC deve ter?
Água deve ser grau HPLC: purificada com resinas de troca iónica, carvão activado ou filtros de membrana (isentos de bactérias)
Deve ser produzida no momento do uso pois é facilmente contaminável
Qual a função das bombas de alta pressão?
enviar fluxo constante e reprodutível da fase móvel, a uma pressão elevada, para o injetor, coluna e detetor
Quais as duas formas em que pode ocorrer eluição?
isocrática: mesmo composição da fase móvel durante a eluição
gradiente: composição da fase móvel varia durante a eluição. é mais rápido e sensível e tem mais resolução
quais as duas posições em que a válvula de injeção pode estar?
load ou inject
o que signfifica sobrecarga de volume da amostra?
para obter uma máxima de eficiência não se deve injetar um volume maior do que 1% do volume da coluna vazia
Como se pode injetar a amostra?
injeção manual - com seringas
amostrador automático
porque razão se coloca pré-colunas?
• previne a entrada de partículas estranhas
provenientes do eluente ou da amostra
• aumenta a duração da coluna
para que serve a coluna de separação?
faz o equilibrio entre a fase móvel e a fase estacionária
Que tipo de partículas de enchimento existem?
porosas, não porosas e monolíticas (apresentam poros, separam rapidamente e permitem utilizar fluxos elevados sem mais pressão)
Qual a polaridade da fase normal e da fase inversa (ambas fases estacionárias)?
fase normal- polar
fase reversa - apolar
Qual a fase com mais vantagens: fase normal ou fase reversa (ambas fases móveis)
menos tóxicas e de menor custo •Boa estabilidade •Rápido equilíbrio •Compatível com gradiente •Análises rápidas •Vasto campo de aplicação
Desvantagem: intervalo de ph grande
Qual a polaridade da fase normal e fase reversa (ambas fase móvel)?
fase normal apolar
fase reversa polar
Quais os tipos de picos que queremos obter em HPLC?
estreitos
Qual o principal tipo de detetor que o HPLC utiliza?
detetores UV visível (obedece À lei de lambert beer)
Quais as diferentes cromatografias HPLC?
derivatização, cromatografia de pares iónicos, Cromatografia com Fase Estacionária Quiral, Cromatografia de Adsorção, Cromatografia iónica
para que serve o supressor?
suprime o sinal elevado do eluente pois este retira a sensibilidade ao método
o que é a UPLC?
cromatografia líquida de ultra eficiência. é mais rápida, tem mais resolução e maior sensibilidade
