Eletroforese Capilar (EC) Flashcards
em que consiste a EC?
é uma técnica de separação de espécies quimicas ionizadas ou nao presentes nas amostras em estudo
os analitos migram com base em que fatores?
carga, tamanho e campo elétrico aplicado
qual o fundamento da EC?
uma ddp é aplicada nos extremos do capilar, que contém uma solução tampão com um certo ph e origina uma corrente constante
quais as forças envolvidas?
força eletrostática e força de atrito
quais os fatores que afetam a separação?
do ião: tamanho e carga
do meio: ph, temperatura, viscosidade, força iónica e fluxo eletrostático
para onde se deslocam os catiões e os aniões?
catiões - cátodos
aniões - anôdo
Como é que o ph afeta a separação?
quanto menor ph menor tempo de migração (mais rápido)
Como é que a temperatura afeta a separação?
quanto maior a temperatura maior a mobilidade
Como é que a viscosidade afeta a separação?
quanto menor viscosidade, maior a mobilidade
Como é que a força iónica afeta a separação?
o número de cargas À volta dificulta a mobilidade
quais os modos de injeção?
• Hidrodinâmica: – Diferença de alturas; – Aplicação de pressão; – Vácuo; • Electrocinética
quais as características ideias de um tampão?
ser estável
originar separação satisfatória e repetível noutros ensaios
quais os tampões mais usados em EC?
químicos: citrato, fosfato, acetato, borato
biológicos: MES e TRIS
quais os surfactantes mais usados?
SDS, CTAB
quais os detetores?
uv visível(capilar com célula em bolha ou célula em z), fluorescência, eletroquimicos, espetrometria de massa
quais as vantagens da EC relativamente à eletroforese clássica?
rapidez, menor consumo de análise e baixo custo. pode-se reproduzir os ensaios
quais as desvantagens da EC?
depende da temperatura e é menos sensível. não é possível repetir os tempos de migração