Espetroscopia de emissão: Fluorescência Flashcards
O que é a espetroscopia de emissão?
Técnica que analisa os λ dos fotões emitidos por moléculas ou átomos durante a sua transição do estado excitado (de maior energia) para o estado fundamental (de menor energia).
Em que condições ocorre luminscência? (emissão de luz por uma molécula)
quando o eletrão volta ao estado fundamental a partir de um estado excitado e perde energia sob a forma de fotão
Quais as 3 técnicas de luminiscência?
flurorescência
fosforescência
quimiluminiscência
Qual o princípio de exclusão de pauli?
Só podem existir dois electrões na mesma orbital e têm de ter spins opostos
Qual o estado fundamental e os estados excitados?
fundamental singuleto (S) e estados excitados (S1/S2) e tripleto T
Qual a transição do estado fundamental para o excitado mais provável?
transição singuleto (S) para singlueto (S1/S2)
A emissão ocorre mais rapidamente na fluorescência ou na fosforescência?
fluorescência
Qual o critério para escolher a via pela qual regressam ao estado fundamental?
a via que minimiza o tempo de vida no estado excitado
Quais os processos de desativação (regresso ao estado fundamental) que existem?
relaxação vibracional
conversão interna
conversão externa
conversão intersistemas
Quais as características do processo de desativação: relaxação vibracional?
- a fluorescência de uma substância em solução só envolve o estado vibracional da mais baixa energia do estado excitado. Consequência:
- A banda de fluorescência desloca-se para maiores comprimentos de onda, em relação à banda de absorção (desvio de Stokes)
Quais as características do processo de desativação: conversão interna?
A molécula passa para um nível de menor energia sem que haja emissão de radiação. Ainda não é bem compreendido mas altamente eficiente
Quais as características do processo de desativação: conversão intersistemas?
ocorre inversão do spin do eletrão excitado
O que é a eficiência quântica de fluorescência?
Relação do nº de moléculas que sofrem fluorescência para o
número total de moléculas excitadas. Para moléculas muito fluorescentes a eficiência quântica é perto de 1
Compare os comprimentos de onda em que aparecem as bandas de fosforescência com as bandas de fluorescência
As bandas de fosforescência aparecem a maiores c.d.o. do que
as bandas de fluorescência, porque a energia do estado excitado tripleto é menor do que o correspondente estado singuleto
Quais as diferenças entre os espetros de absorção e emissão?
- Espectro de absorção:
A fluorescência é medida a um comprimento de onda fixo, faz-se variar o comprimento de onda de excitação - Espectro de emissão:
O c.d.o de excitação é constante e faz-se variar o c.d.o de emissão
dica: varia o c.d.o do tipo de espetro (emissão, varia emissão; excitação, varia excitação)
Qual a relação entre o espectro de excitação e o espectro de fluorescência?
o espectro de excitação e o espectro de fluorescência são a imagem no espelho um do outro.
Quais os fatores que favorecem a fluorescência?
- ligações duplas e triplas
- grupos aromáticos e estruturas de ressonância
- rigidez da molécula
- grupos eletrodoadores (aminas, alcoois)
- fusão de anéis benzénicos
- solventes viscosos
- presença de átomos pesados
- temperaturas baixas
Quais os fatores que contrariam a fluorescência?
- grupos eletroatratores (Cl, Br, I, carboxílico)
- concentrações muito elevadas
- presença de O2 dissolvido
- pH (não percebi bem se reduz ou não, confirmar!)
Quais os tipos de equipamento existentes?
fluorímetros (filtros) e espetrofluorímetros (prismas ou redes)
Quais os principais componentes de um espetrofluorímetro?
- fonte de energia
- selecionadores de c.d.o.
- detetores
Quais as lâmpadas que funcionam como fonte de energia no (espetro)fluorímetro?
- lâmpada de xénon (intensidade varia com c.d.o)
2. lâmpada de deutério e lâmpada de mercúrio (intensas)
Qual o tipo de selecionadores que podemos encontrar em espetrofluorímetros e em fluorímetros?
espetrofluorímetros- primas e redes de dispersão
fluorímetros- filtros
Quais os detetores que podemos encontrar em (espetro)fluorímetros?
tubos fotomultiplicadores e detetores de vetores de diodos
Quais as características das células na fluorescência?
células de vidro ou quartzo (depende do c.d.o.) com 4 faces transparentes, tubulares ou quadrangulares
Quais são alguns dos aspetos importantes a ter em conta na análise quantitativa?
Existência de grupos fluoróforos na molécula
Escolha do comprimento de onda de excitação
Escolha do comprimento de onda de emissão
Utilização do pH óptimo
Concentração
Quais as vantagens deste método em relação à espetrofotmetria de absorção?
maior sensibilidade e seletividade
Há equipamentos que usam _____ em vez de células. Além disso é necessário escolher o ____ correspondente ao comprimento de onda necessário
existem equipamentos que usam microplacas com x poços. estas podem ser de fundo negro, transparentes ou placas negras.
É necessário escolher o filtro
Em que campos/áreas pode ser utilizado este método?
vitaminas, antibióticos, hormonas, produtos alimentares e naturais, amostras clínicas, etc
