Métodos cromatograficos Flashcards
O que são métodos cromatográficos?
Separação dos componentes de uma mistura devido à diferente afinidade desses para 2 fases presentes: estacionária e móvel
A cromatografia tem que objetivos?
E como é obtido cada um?
Separação dos componentes da amostra
Identificação através do tempo de retenção desses componentes
Quantificação através da área do pico que é diretamente proporcional à concentração desse componente
Que tipos de cromatografia existem, atendendo à natureza da fase móvel?
fase liquida, gasosa ou fluido supercritico
Que tipos de cromatografia existem, atendendo ao equipamento utilizado?
Leito aberto- não é coluna - de papel ou de camada fina
Coluna - clássica, de alta eficiência (HPLC) ou gasosa (GC)
Que tipos de cromatografia existem, atendendo à natureza do equilibrio quimico?
De partição Adsorção Permuta Exclusão Afinidade
O que é a fase estacionária e a fase móvel ?
Fase estacionária- fase imóvel (coluna, papel, placa de TLC)
Fase móvel- fase que percorre a fase estacionária e vai arrastar os compostos de formas diferentes
Cromatografia de Partição
Fase móvel e estacionária liquidas
O soluto dissolvido liga-se à superficie da coluna
Cromatografia de adsorção
Fase móvel é um liquido e fase estacionária é um sólido
Soluto é adsorvido na superfície da fase estacionária
Cromatografia de Permuta
Fase móvel é um liquido e fase estacionária é um sólido
Fase estacionária está carregada, estabelecendo maior afinidade com analitos da carga oposta
Moléculas pequenas penetram os poros
Os que não interagirem com estas cargas serão eluidos logo e os que se ligam têm maiores tempos de retenção
Cromatografia de Exclusão
Feita com base no tamanho das partículas
As mais pequenas ficam retidas nos poros da fase estacionária e as grandes são eluidas
Moléculas grandes são eluidas
Cromatografia de afinidade
Fase estacionária tem uma molécula com grande afinidade para um dado analito, que fica retido enquanto os outros são eluidos.
O analito só é eluido com variacao do pH do meio
É das mais específicas!
O que é e para que serve o tempo de retenção? Varia com o que?
É o tempo que decorre entre a injeção e o máximo do pico cromatográfico
Serve para identificar e diferenciar um analito, porque é especifico para este
É tanto maior quanto maior for a concentração do analito
O que é o tempo morto?
Tempo de retenção de um composto não retido, que não interage com a fase estacionária
O que é o fator de capacidade ou de retenção?
Razão entre o tempo do soluto na fase estacionária e o tempo do soluto na fase móvel
Descreve a velocidade a que um dado composto migra ao longo da coluna
O que é o coeficiente de partição?
É a razão entre a concentração na fase estacionária e a concentração na fase móvel
O que nos dá a resolução?
A separação entre os dois picos ou seja se estão bem separados
O que é a retenção relativa?
É o tempo de retenção de um composto em relação a outro
A separação é tanto maior quanto maior … e quanto menor …
retenção relativa
largura dos picos
Em que consiste o tempo de retenção corrigido?
Tr-tm
O pico do cromatograma vai ter o tempo de retenção quando for o seu máximo/minimo?
Máximo
Maior tempo de retenção - maior ou menor afinidade para a fase móvel?
Menor
Para uma análise quantitativa é desejável que a resolução seja
igual ou superior a 1,5
O que influenciam os pratos teóricos?
Quanto maior o seu numero, maior a eficiência da coluna, obtendo picos mais estreitos
Em que consistem os pratos teóricos?
É o alargamento relativo da “banda” durante o processo e depende do comprimento da coluna
é uma camada imaginária da coluna em que há um equilibrio entre as 2 fases
AEPT?
L/N
O que afeta a resolução cromatográfica?
O numero de pratos teoricos, a retençao relativa e o fator de capacidade
Como aumentar a eficiência do processo?
Aumentar o comprimento das colunas, Uniformizar percursos possiveis para as particulas e otimizar o fluxo
Como alterar a seletividade ?
Através da alteração da natureza das fases e da alteração da temperatura
A que é devido o alargamento dos picos?
Na diminuição da velocidade de introdução da amostra
Tempo de passagem no detetor
Fenómenos na coluna (diferentes percursos, difusão longitudinal, processos de transferência de massa)
