Serologi Flashcards
Antigen
1. Vad är antigen för en molekyl oftast?
2. Vad är epitop?
3. Vad är definitionen på antigen?
- Protein eller kolhydrat.
Kan vara alla molekyler egentligen men dessa är mest retande. Dem måste också vara tillräckligt stora oftast för att vara så kallade imminogena. - Del av antigenet som känns igen av antikropp
- Molekyl som känns igen av antingen
- specifik antikropp
- T-cellsreceptor
Alla antikroppar är immunoglobuliner men inte
gammaglobuliner
Biologiska effekter av antikroppar
Vad betyer
- protektion
- opsonisering
Protektion
- neutralisera virus och toxiner oftast
Opsonisering
- krävs vid kapslade bakterier.
- opsoniseringen ökar fagocytos med 100x
- barn under 2 år kan inte bilda antikroppar mot kapslar
Överkänslighetsreaktioner, autoimmunitet
- kvinnors immunitet bygger på B-cellsfunktionen oftare - bra för graviditet. har mes östrogen att göra. därför inte lika mycket sepsis hos fertila kvinnor som män.
IgM
- Vilka 2 Ig-klasser är oftast dem man analyserar på lab?
- IgM är den äldsta evolutionärt.
- När börjar IgM bildas och försvinna oftast vid en infektion? Tidsspann
- Hur används IgM kliniskt vid infektioner för att säga något om tid? - Varför är denna bäst komplementbindare? Och varför är detta nackdel labmässigt?
- Varför viktigt att skriva om patienten har myelom, RF+ eller annan autoimmun sjukdom på remissen vid analys av IgM?
- Selektiv IgM-brist.
- Ovanlig, ofta sekundär till vilka sjukdomar?
- IgM och IgG
- IgM bildas efter 24 h. Försvinner inom 1-2 månader.
IgM används för att avgöra ålder på infektion
- IgM talar för nyligen genomgången eller aktuell infektion.
- Mest klistrig av alla Ig. Detta gör att den kan binda många olika epitoper och därför kan man få falskt positiva svar vid analys.
- IgM kan öka vid dessa sjukdomar t.ex. Monoklonalt vid myelom. Detta kan göra analyserna svårtolkade på lab
- Immunsuppression vanligast.
- malignitet
- autoimmunitet
- GI-sjukdom
IgG bildas efter IgM
1. Hur lång tid efter infektion krävs för att kunna mäta IGG? Hur länge kvarstår IgG i blodet?
- Hur lång halveringstid har IGG?
- Passerar placenta?
- Vilken subklass IGG är vanligast i blodet?
- Strax efter IGM. 1-2 V krävs för att mäta. Peak vid 2-4 veckor. Kan kvarstå flera år
- 23 dagar
- Ja
- IGG-1
IgG subklasser
- Vilka agens riktar sig IgG 1-3 mot?
- Vilken IgG subklass är vanligast att ha brist på som vuxen och vilken sjukdom kopplas detta till?
- IgG4 korrelerar med IgE. Således vid vilka tillstånd ökar IgG4?
- G1 + G3
- proteiner
G2
- kolhydratier
- vanligaste bristen hos barn - IgG3. Kopplad till fibromyalgi och ME
- atopi, men också parasitos
Brister av IgG
1. Det krävs oftast brist på flera subklasser för att få svåra infektioner.
IgG2-brist dock kan orsaka recidiverande infektioner - vilka?
Dessa svarar inte på okonjugerade vaccin förutom 2 vilka?
- Vad är specifik antibody deficiency?
- t.ex. pneumonier, sinuiter.
Svarar inte på okonjugerade vaccin - men på stelkramp och diftervaccin
- Normala IgG nivåer men inga antikroppar specifikt agens t.ex. pneumokocker
- hjälper ej med vaccin mot pneumokocker!
IgG tester
1. Varför krävs parade serum - ett tidigt och ett sent prov när man testar antikroppar (IgM och IgG)
- Om man har infektion men tar IgG sent i förloppet - vilken parameter tittar man då på för att avgöra om det är en aktuell infektion?
- Vid specifikt legionella IGG så räknar man alltid höga titrar som aktuell infektion oavsett spädning innan - varför?
- Prov 1 - tidigt i förloppet i sjukdomen. Då har förhoppningsvis inte IGG bildats.
Prov 2 - lite senare. IGG positivt.
- detta för att avgöra om man börjat bilda IGG (serokonvertering) mot agens vilket talar för aktuell infekiton = tyngsta beviset på aktuell infektion
- Fyrfaldig titerökning
- man späder provet och ser hur mycket man kan späda innan man inte hittar IGG längre. - Pga kan ge stora utbrott och konsekvenser och då behandlar man hellre än riskerar att det inte är infektion som kropen själv kan ta hand om
- Vilken fas är den som man inte kan detektera antikroppar ännu för?
- Vad betyder dem olika faserna?
- Om man exponeras 2 gånger för ett antigen - hur påverkas lagfasen?
- Lag-fasen
- t.ex. HIV kan ha lång lagfas på 6 månader. - Lag-fas - antikroppar har börjat bildats men är för låg nivå för att detektera
Logfas- snabb uppgång av titrar antikroppar
Platåfas -
Nedgångsfas - antikroppar går ner.
Varför behövs levande vaccin bara tas en gång?
Levande mikroorganismer stimulerar IGG-svaret så mycket första gången man exponeras att man behåller sina IGG-nivåer.
- man behöver ingen booster - undantag för mässlingvaccinet
Det är därför COVID-vaccin kräver boosters efter för att få ett bra antikroppsnivåer. - mRNA vaccin
IgA
- I vilka kroppsvätskor dominerar denna antikropp?
- Koleravaccin är ett IgA vaccin - hur intas det? Hur länge håller skyddet för barn respektive vuxna?
- Hur många i populationen har IgA-brist?
- Sekret och slemhinnor - tårar, snuva, saliv, bröstmjölk, slem
- Vuxen - 2 år
Barn - 6 mån - 20 % - därför testar man alltid om en patient har IgA brist om man utför en IgA analys. T.ex.vid celiaki
Immunkemiska reaktioner - interaktioner antikropp-antigen
- Vad är aviditet?
- Vad påverkar aviditeten av en antikropp-antigen bindning?
- Aviditeten ökar med tiden vid en infektion. Hur nyttjas detta kliniskt vid analyser?
- Mått på bindningsstyrka mellan antikropp och dess epitoper
- affinitet, antal epitoper, avstånd mellan epitoper på antikroppen
- Aviditeten ökar med tiden när man är infekterad - ger mer inbindning mellan antikropp-antigen.
Detta används för att datera infektioner.
Vilka 5 sätt inom serologi kan man använda för att datera en infektion?
- Serokonvertering (iGG bildats)
- Aviditet - starkare med tiden - infektion varit längre om stark aviditet
- Fyrfaldig titerstegring - används om man redan serokonverterat och vill försöka veta om infektion är aktuell eller inte
- enstaka höga titrar - används vid t.ex legionella
- IgM - bildas tidigt vid aktuell infektion.
Olika patogener kan ha samma epitoper = svårare att veta vilken av patogenerna det är man har antikropp mot
- Vilken antikropp korsreagerar mest? varför man inte ska lita för mycket på ett sådant positivt svar
- Varför har serologi dålig sensitivitet generellt om man analyserar med “biologisk effekt”?
Vad är en annan nackdel med serologi i akuta situationer (sjuk patient vid “biologisk effekt”?
- IgM
- Pga man behöver mycket antikroppar för att detektera
Tar lång tid att få svar - ska hinnas bilda antikroppar, tar lång tid att analysera sen på labbet
Inom kliniken används fysikaliska metoder för att detekera antikroppar inom serologi och diagnostik
- Komplementbindning
- Vilka analyser använder man denna metod för?
- Förklara kortfattat metoden. - Komplementbindning var det första serologiska testet och användes förr för syfilisdiagnostik. Om en patient testar pos för komplementbindning - har patienten syfilis då?
- OM antigen-antikropp komplex finns, kommer det komplement man tillsätter i provet att binda in till komplexet -> komplementaktivering. Om komplex inte finns kommer det bli hemolys
= negativt prov.
- mykoplasma, terponoma pallidum, virus
- Syfilis
- nej, det är ospecifikt test. Testet korsreagerar med olika saker.
- om pat skulle bli pos på testet får patienten göra ett annat test.
Tekniska analyser för serologi inom kliniken - precipitation
Används ej längre. Men förklara hur principen fungerar- viktigt för att förstå varför man ska följa instruktionerna exakt för snabbtester som använder antikroppsmetoder
Man vet att lika mycket antikroppar osm antigen ger högst koncentration av antikropp-antigenkomplex.
Snabbtester
- om man tillför för lite eller för mycket vätska i provet kommer förhållandet mellan antikroppar och antigen bli för stor och då kommer man inte få positivt test. §
Tekniska analyser för serologi inom kliniken - Immundiffusion
I vilket kliniskt sammanhang används denna metod (dock övergår man mer till PCR)
Serotypning av pneumokocker.
Man tar reda på hur lika två olika arter (proteiner) är. En bestämd protein jämförs med ett okänt protein.
Tekniska analyser för serologi inom kliniken - Agglutination
- Förklara principen
- Vilka kliniska tester använder man denna för idag?
- Fördelar 2 st med testet?
- Vilka patienter kan man inte använda denna metod för?
- Ag-AK komplex bildar nät som syns visuellt som klumpar. IgM är bäst för dessa tester - högre sensitivitet. Dock blir dem inte lika specifika därmed.
- Snabbtester: EBV, syfilis, salmonella, serotypning i lab
- Billigt och snabbt.
- Reumatoid faktor positiv patienter (RA-patienter) - deras RF korsreagerar med IgM hos patienten - falskt neg
Tekniska analyser för serologi inom kliniken - Immuntester
1.Beskriv Enzyme immunoassay (EIA)
2. Varför är metoden känslig för fel om man inte gör rätt i labbet?
3. Felkällor
- vad är Hookeffekten och antikroppsinterferens
- AK-AG komplex inmärkt med enzym. Substrat tillförs -> utfällnng. Man tvättar bort AG och AK och enzym som inte bundit in innan man tillför substratet.
- Om man tvättar för mycket så släpper dem icke kovalenta bindningarna mellan ag-ak
- Hooke
- extrema mängder antikroppar i provet - falskt neg svar
Interferens
- fattar inte
Tekniska analyser för serologi inom kliniken - Immuntester
Western blot
1. Detta test har HÖGST specificitet av immuntester/serologi.
När använder man därför Western blot- exempel på infektion?
- För vissa infektioner kan man avgöra tiden för infektion med Western blot - hur då?
- HIV-diagnostik. Är ett KONFIRMERANDE test på att en patient faktiskt har HIV.
- antikroppar mot olika proteiner vid infektioner kommer i olika tidsordning ofta i förloppet av infektionen. Om man vet den bestämda ordningen så kan man analysera provet och då få fram vilka antikroppar som man bildat mot proteiner, och på så sätt veta när infektionen skedde
Serologiska metoder
Rangordna testerna efter specificitet.
Och - vilket test är absolut känsligast som används som konfirmerande test vid HIV
- EIA
- Komplementbindning
- Agglutination
- PRecipitation i rör
EIA är den känsligaste metoden - sedan Western blot
- EIA är känslig, men ocksår risk för fel i provhanteringen på lab och korsreaktioner
Specialfall - intertekala antikroppar och IgM nyfödda/små barn
- Varför måste man ta antikroppar i blodet också alltid när man analyserar antikroppar i CSV?
- Vad talar för en intratekal antikroppsbildning (infektion i CNS) vid jämförelse av blod och CSV?
IgM
3. Vad måste man tänka på gällande IgM hos nyfödda?
4. Hur kan man lösa detta “lätt”?
- Pga antikroppar kan läcka från blodet via blodhjärnbarriären till CSV - och då vet man inte om infektionen kommer från blod eller CSV
- Om kvoten likvor/serum är s… fattade inte kolla med ELLEN
- IgG från mamman kan ha gått till barnet och stör då IgM mätning
- Man tvättar bort IgG eller väntar lite till att ta provet
