recombinant DNA Flashcards
restriksiyon enzimlari normalde nasıl kullanılıyor
bakteriler içine giren phage DNA’sını restriksiyon enzimi ile parçalayıp etkisiz hale getiriyor
restriksiyon enzimleri bakteri DNA’sını nasıl keser
polidromik sekanslarda bir uçtan kesip taa diğer uca kadar keser ve sticky end oluşturur
bazı enzimler direkt düz şekilde kesebilir
kombinant DNA teknolojisinin kullanılma sebeplerinden biri nedir
belli bir geni çoğaltmak
belli bir protein sentezni bir host cell içinde üretmek
orter gene ne şe yarar
hani host cell’in geni aldığını anlamak ve işlemin başarılı olup olmadığını anllamak için kullanılır
vektör nedir
çoğalmasını veya ifade edilmesini istediğimiz geni taşıyıcı olarak kullandığımız şeydir
genelde plazmit kullanılır ve bu plazmit bakteriye aktarılır
vektörün hangi özellikleri olmalıdır
taşıyıcı hücreden bağımsız çoğalabilmeli
restriksiyon enzimleri için tanınma sekansı içermeli
reporter gene taşımalı
taşıyıcının kromozomundan küçük olmalı
aktarılacak genden büyük olmalıld
e kullanılan vektörler hangileridir ve hangileri doğal hangileri yapaydır
DOĞAL: plasmid ve phage
YAPAY: Cosmid, PAC, BAC, YAC
küçük DNA kütüphaneleri nasıl yapılır
cDNA kullanılarak yapılır
reverse transcriptase kullanılır
bu tekniğer RT-PCR denir
RT enzimi RNA-dependent DNA polymerase’dır