pp 5 Flashcards
exame
Os TLRs interagem com diferentes moléculas adaptadoras que ativam
diferentes vias de sinalização
Todos os TLR interagem com
MyD88
, exceto o TLR-3
denominações
MyD88: myeloid differentiation factor 88
MAL: MyD88 adaptor-like
TRIF: TIR domain-containing adaptor-inducing
IFN-
TRAM: TRIF-related adaptor molecule
Sistema Imunitário Adaptativo
celulas T e B
celulas B
- Expressam recetores de antigénio de
células B (B-cell antigen receptor,
BCR), que são anticorpos
(imunoglobulinas) de superfície
*Quando encontram antigénio
proliferam e diferenciam-se em células
plasmáticas produtoras de anticorpos
celulas T
*Expressam recetores de células T
(T-cell receptor, TCR)
*Quando encontram antigénio
proliferam e diferenciam-se em
células T efetoras
Memória Imunológica
Antigénio: qualquer molécula que se ligue especificamente a um anticorpo
ou que gere fragmentos peptídicos reconhecíveis pelo TCR
Estrutura dos recetores de antigénio
anticorpo
TCR
anticorpo
Região constante
e região
variável
2 cadeias leves
2 cadeias pesadas
TCR
Região constante e
região variável
1 cadeia alfa
1 cadeia beta
antigenios
- qualquer tipo
de estrutura química
(proteínas, glicoproteínas,
polissacáridos) - proteínas; os epítopos (péptidos) só são
reconhecidos se forem apresentados por glicoproteínas
de superfície especializadas chamadas Major
Histocompatibility Complex (MHC)
Epítopo ou determinante antigénico:
parte do antigénio reconhecida pelo recetor
Geração de recetores de antigénio
- Os genes dos recetores de antigénio são gerados por rearranjos somáticos de
segmentos incompletos de genes do recetor. - Esta diversidade combinatória garante a codificação de uma grande diversidade
de recetores por uma pequena quantidade de material genético. - Esta diversidade é aumentada pela adição ou subtração aleatória de nucleótidos
na junção dos segmentos génicos (diversidade juncional).
Repertório de recetores de linfócitos:
pelo menos 10^8 especificidades diferentes
expansão clonal
Linfócitos ativados por antigénio geram clones de
células efetoras com a mesma especificidade
deleção clonal
Linfócitos com recetores auto-reativos são
normalmente eliminados durante o desenvolvimento
(deleção clonal) ou são funcionalmente inativados
Princípios da Teoria da Seleção Clonal:
(4)
- Cada linfócito possui apenas um tipo de recetor com uma especificidade única
- A interação entre uma molécula estranha e um recetor de linfócito capaz de ligar essa
molécula com alta afinidade leva à ativação do linfócito - As células efetorasdiferenciadas derivadas de um linfócito ativado terão recetores de
especificidade idêntica à da célula parental - Linfócitos portadores de recetores específicos para moléculas ubíquas próprias são
eliminadas numa fase inicial do desenvolvimento da célula linfoide e, portanto, estão
ausentes do repertório de linfócitos maduros
Os anticorpos protegem …
contra patogénios extracelulares e seus produtos tóxicos.
anticorpo:
regioes
- Região variável (V) de reconhecimento do antigénio
- Região constante (C) que determina a classe de imunoglobulinas (IgA,
IgD, IgE, IgG, IgM) e a função efetora
afinidade
força da interação entre um local de ligação de antigénio e o antigénio
avidez
força total da interação anticorpo:antigénio
Estrutura dos anticorpo
- Moléculas com ~150 kDa
*Compostos por 4 cadeias polipeptídicas:
2 cadeias leves (L) - Lambda (Y) ou kappa (k)– 2 cadeias pesadas (H)
- Isotipos: u,s, y,alfa ou e, correspondentes às classes de imunoglobulinas
A região “hinge” da Ig permite …
… flexibilidade na ligação a múltiplos antigénios
A molécula de anticorpo pode ser clivada em fragmentos funcionalmente distintos
Enzimas proteolíticas que clivam a molécula de anticorpo permitem separar as
zonas de ligação do anticorpo (fragment antigen binding, Fab) das
zonas que interagem com moléculas efetoras (fragmento cristalizável, Fc)
As diferentes classes de Ig são distinguidas pela estrutura das suas
cadeias pesadas da região constante
- Inicialmente expressas
em células B naïve: - IgM e IgD
- Expressas após “class switching”
(envolve recombinação somática de DNA): - IgG, IgE e IgA.
IgM
primeira classe de Ig produzida após ativação das células B; pentâmero, logo maior avidez;
mas sendo uma molécula grande está sobretudo em circulação e não nos tecidos
IgD
co-expresso com IgM na superfície das células B maduras e quase não é secretada; função
ainda não é conhecida
IgG
produzidas durante a resposta imunitária; em circulação e em tecidos (espaço extracelular)
IgE
defesa de parasitas multicelulares; envolvida em alergias
IgA
em circulação e em mucosas; pode formar dímeros
A IgM e a IgA podem formar polímeros
Polimerização permite ligar
epítopos repetitivos e aumentar
a avidez
IgA
geralmente forma dímeros nas mucosas (dimerização importante para o transporte
através do epitélio) e monómeros no plasma.
IgM
forma pentâmeros
; polimerização importante pois a IgM é produzida como
primeira resposta à infeção e a afinidade do anticorpo é baixa.
A região constante confere …
… especialização functional ao anticorpo.
Os domínios de uma molécula de imunoglobulina têm estruturas
semelhantes
- Cada domínio C ou V é constituído
por duas sheets, cada uma feita
de vários strands - O domínio Ig é constituído pelas
duas sheets ligadas por uma
ponte dissulfeto entre resíduos de
cisteína das beta sheets
qual é a Interação do anticorpo com o antigénio específico
Sequências hipervariáveis (HV) que formam
regiões determinantes de complementaridade
(CDRs) formam o local de ligação ao antigénio
Os anticorpos ligam
- ligam os antigénios via contatos nos CDR que são
complementares em tamanho e forma ao antigénio.
*ligam-se a formas conformacionais na superfície dos
antigénios usando forças
não covalentes
Rearranjo genético das imunoglobulinas
*Os genes que compõem a região variável são gerados por recombinação
somática de segmentos
genéticos :
- a sequência de DNA que codifica o exão da região variável não
está presente no genoma,
é codificado por segmentos de DNA separados que são editados para formar o exão (durante o
desenvolvimento da célula B, que ocorre na medula óssea). Em células não linfóides não ocorre
rearranjo e os segmentos de gene da região variável permanecem distantes.
Segmentos de gene:
V ou variável
J ou de junção
D ou de diversidade (só na cadeia pesada)
Múltiplos segmentos de gene V …
… estão presentes em cada locus de imunoglobulina
O rearranjo dos segmentos de gene V, D e J é guiado por sequências de DNA
adjacentes
Regra 12/23: segmentos de gene com espaçador RSS de 12 bp só se ligam a
espaçador RSS de 23 bp
A reação que recombina os segmentos
V, D e J envolve vários tipos de enzimas
modificantes de DNA (V(D)J recombinase), específicas ou não de células linfoides.
RAG-1 e RAG-2:
RAG-1 e RAG-2:
enzimas específicos de
células linfoides; formam um dímero e
iniciam
a recombinação V(D)J.
A adição e subtração de nucleótidos nas junções dos segmento contribui para
a
diversidade da região de ligação ao antigénio (HV3)
nucleotidos P
palindrómicos
nucleotido N
non-template-coding
A diversidade do repertório de anticorpos é gerada por 4 processos:
- Diversidade combinatorial
- Diversidade de junção
- Diferentes cadeias leves e pesadas V
- Hipermutação somática
- Diversidade combinatorial:
existem múltiplas cópias de cada segmento de gene
que podem ser combinadas de formas diferentes
- Diversidade de junção:
nas junções entre os segmentos de gene há introdução ou
deleção de nucleótidos pelo processo de recombinação
- Diferentes cadeias leves e pesadas V
podem emparelhar para formar o local de
ligação ao antigénio
- Hipermutação somática
que ocorre apenas em células B após início de uma
resposta imunitária; introduz mutações pontuais nos genes da região V rearranjados
A IgM e a IgD são originadas a partir…
do mesmo transcrito de pre-mRNA e são
simultaneamente expressas na superfície de células B maduras
As formas transmembranar e secretada das Ig são …
geradas de transcritos de RNA da
cadeia pesada alternativos
Reconhecimento do antigénio por células T:
Cada célula T tem cerca de 30,000 recetores de
antigénio idênticos na superfície
Cada recetor consiste em 2 cadeias polipeptídicas
chamadas T-cell receptor a (TCRa) e TCRB
TCR
*O heterodímero TCRα:β é muito semelhante ao
fragment Fab da Ig: cada cadeia é composta por 2
domínios Ig e as 2 cadeias são unidas por uma
ponte dissulfeto; diferenças: apenas 1 local de
ligação ao antigénio e nunca é secretado
* Outro tipo de TCR semelhante: TCR: (população
minoritária mas importante)
MHC:
- O recetor de células T reconhece o antigénio na forma de um
complexo péptido:MHC - Há 2 classes de moléculas de MHC que composição diferente mas
estrutura 3D parecida: classe I e II. - O péptido fica ligado ao MHC como parte integral da estrutura
- As moléculas de MHC são instáveis sem péptido ligado
MHC class I:
liga péptidos curtos ( 8 -10 aa) pelas extremidades
MHC class II:
liga péptidos de qualquer comprimento (pelo menos 13 aa) por
interações intermédias
CD4 e CD8
- As proteínas de superfície das células T CD4 e CD8 contactam diretamente com
moléculas de MHC e são necessárias para uma resposta eficiente ao antigénio
As moléculas de MHC classe I são expressas:
em
todas as células nucleadas, embora sejam mais
fortemente expressas em células hematopoiéticas;
MHC I
aumenta na presença de IFN-a, -B e −y
As moléculas de MHC classe II são normalmente
expressas:
*apenas por um subconjunto de células
hematopoiéticas e por células do estroma tímico;
podem
ser expressas por outros tipos de células
após
exposição à citocina inflamatória IFN-
(produzida por células CD4 Th1 ativadas, T CD8 e
NK)
Gene do recetor de células T:
Os segmentos de gene de recetor de células T são rearranjados de forma
semelhante ao das Ig e pelos mesmos enzimas .
