PHYSIOLOGIE BACTERIENNE II : Le métabolisme bactérien Flashcards
- Pour l’oxydation du glucose, il existe 03 voies principales qui aboutissent toutes à _________________________.
l’acide pyruvique
Les voies de métabolisme intermédiaire de dégradation du glucose sont, chez les bactéries: _______________________, _________________________ et _____________________________.
La glycolyse (Embden Mayerhof)
Voie Hexoses-monophosphates
Voie d’Entner-Doudoroff
- Selon la présence ou l’absence d’oxygène, on distingue deux principales voies métaboliques: _______________ et ___________________.
L’oxydation et la fermentation
L’accepteur final des électrons au cours de la fermentation est ____________.
un composé organique
La fermentation bactérienne se déroule au niveau de _______________.
cytoplasme
La fermentation implique la phosphorylation ____________________.
au niveau du substrat
Le bilan énergétique de la fermentation bactérienne est _______.
faible (2mol ATP/mol glucose)
(La fermentation/La respiration) se caractérise par la production de plusieurs molécules et métabolites.
fermentation
L’accepteur final des électrons au cours de la respiration est ____________.
O2 ou composé oxygéné
La respiration bactérienne se déroule au niveau de ____________________.
la membrane cytoplasmique
La respiration implique la phosphorylation ________________.
oxydative
(La fermentation/respiration) se caractérise par une grande quantité d’énergie libérée par paliers via la chaine de transporteurs d’électrons.
La respiration
Citez cinq type de fermentation.
-Fermentation lactique
-Fermentation butyrique
-Fermentation des acides complexes
-Fermentation alcoolique
-Fermentation butanediolique
La fermentation implique la production de gaz et la production d’acides organiques (V/F).
V
Lors de la fermentation, il y a (oxydation/réduction) du NAD en NADH2.
réduction
L’épreuve de Hugh-Leifson permet de déterminer si une bactérie ________________________________________.
utilise la voie oxydative ou fermentaire
L’épreuve Hugh-Leifson implique l’utilisation du milieu ______.
MEVAG (Milieu d’Etude de la Voie d’Attaque des Glucides)
Le milieu MEVAG est constitué de: ___________________, __________________ et __________________.
Gélose semi-solide, 1% de glucose et le rouge de phénol.
Le rouge de phénol vire au (rouge/jaune) en cas d’acidification du milieu.
jaune
L’expérience Hugh-Leifson nécessite l’emploi de deux tubes, l’un________________ et l’autre ___________________.
recouvert de vaseline (tube fermé) et tube ouvert
Expérience Hugh-Leifson
Une fois ensemencé par piqure centrale, les deux tubes son incubés 18h à ___°C.
37°C
Expérience Hugh-Leifson
Une fois ensemencé par piqure centrale, les deux tubes son incubés __h à 37°C.
18 heures
Expérience Hugh-Leifson
Une fois ensemencé par ___________________, les deux tubes sont incubés 18h à 37°C.
piqure centrale
En l’absence d’oxygène, certains bactéries font recours à la fermentation par deux voies: _________________ et ___________________.
La voie des acides mixtes et la voie Butylène glycol
On utilise le (milieu de culture) pour identifier la voie fermentaire des bactéries.
Bouillon de Clark & Lubs
Les tests ______________ et ____________ sont réalisés au parallèle pour identifier la voie fermentaire des bactéries.
Test rouge de méthyle (RM) et Test Vauges Proskauer (VP)
Une bactérie qui utilise la voie des acides mixtes donnerait un test RM (positif/négatif) et un test VP (positif/négatif).
RM: Positif
VP: Négatif
Une bactérie qui utilise la voie butylène glycol donnerait un test RM (positif/négatif) et un test VP (positif/négatif).
RM: Négatif
VP: Positif
Dans l’étude des voies fermentaires des bactéries, le bouillon de Clark et Lubbs est ensemencé puis incubé ___ heures à 37°C.
18 heures
Le test RM implique l’utilisation du rouge de méthyle, qui vire au rouge en milieu (acide/alcalin).
acide
Une coloration jaune indique un test RM positif (V/F).
F
Une coloration rouge cerise indique un test RM négatif (V/F).
F
Le test VP utilise deux réactifs: VP1 (______________) et VP2 (______________).
VP1: Potasse (KOH)
VP2: Alpha naphtol
Une coloration rose indique un test VP positif (V/F).
V
Le test VP met en évidence _______________, intermédiaire de la voie butylène glycol.
l’acétoine
L’acétoine réagit avec VP (01/02) et donne du diacétyl.
VP1
L’acétoine réagit avec VP1 et donne du __________.
diacétyl
La réaction du VP1 avec le diacétyl est responsable de la coloration _________.
rose
Les tests RM et VP peuvent être conjointement positifs (V/F).
F: Les tests RM et VP s’excluent mutuellement.
L’étude du type respiratoire d’une bactérie implique l’utilisation de (milieu de culture).
la gélose viande foie
Dans l’étude du type respiratoire des bactéries, Le tube est ensemencé par _______________ puis incubé 18h à 37°C.
piqure centrale
Etude du type respiratoire des bactéries
Une culture à la surface d’un tube signifie que la bactérie est __________________.
aérobie stricte
Etude du type respiratoire des bactéries
Une culture au fond d’un tube signifie que la bactérie est __________________.
anaérobie stricte
Etude du type respiratoire des bactéries
Une culture le long d’un tube signifie que la bactérie est __________________.
aéro-anaérobie facultative
Etude du type respiratoire des bactéries
Une culture proche de la surface d’un tube signifie que la bactérie est __________________.
micro aérophile
En pratique, trois enzymes respiratoires bactériennes sont recherchées: ______________, _______________ et ____________________.
catalase, oxydase, nitrate réductase
La durée de réponse du test à la catalase ou l’oxydase est de __________.
< 05 minutes
La durée de réponse du test à la nitrate réductase est de _____.
18 à 24 heures
La catalase permet à la bactérie de dégrader ___________, produit toxique pour cette dernière.
H2O2 (Peroxyde d’hydrogène)
Le peroxyde d’hydrogène est produit lors de (la respiration/fermentation).
respiration
Le peroxyde d’hydrogène est dégradé selon les deux réactions suivantes:
H2O2 + 2H+ + 2e- ==========> 2H2O
peroxydase
2H2O2 =====> 2H2O + O2
catalase
Le test à la catalase consiste à rajouter une goutte de H2O2 (___V) à une colonie bactérienne à identifier.
10V
Un dégagement de bulles signifie un test de catalase (positif/négatif).
positif
En pratique, le test de catalase sert surtout à différencier entre les (coccis/bacilles) (Gram+/-).
Cocci gram +
Les staphylocoques sont catalase (positif/négatif).
positif
Les streptocoques sont catalase (positif/négatif).
négatif
Au cours de la respiration aérobie, deux cytochromes, __________ et __________ interviennent dans la réaction
finale de la chaine de transporteurs d’électrons.
Cytochrome C et Cytocrhome A/A3
Les bactéries oxydase (+/-) possèdent les deux cytochromes C et A/A3.
oxydase +
Les bactéries oxydase + sont soit _____________________ ou ____________________.
aérobie strictes ou aéro-anaérobies facultatives
Les bactéries oxydases (+/-) no possèdent pas de cytochrome C ou A/A3 ou en possèdent une seule.
Oxydase -
Les bactéries qui ne possèdent ni la cytochrome C ni la cytochrome A/A3 sont ____________________.
anaérobies strictes
Les bactéries qui possèdent uniquement la cytochrome A/A3 sont _________________________.
aéro-anaérobies facultatives
Le test à l’oxydase implique l’oxydation du _________________________ en semi-quinone par l’oxydase.
para diméthyl para phénylène diamine
L’oxydation du para diméthyl para phényle diamine en ________________ donne une couleur rouge violacée
semi-quinone
En pratique, le test de l’oxydase est utilisé pour différencier entre ____________________ et _____________________.
Les BGN oxydase - (Entérobactéries) et les BGN oxydase +
Au cours de la _________________________, les nitrates (NO3-) joue le rôle d’accepteur final des électrons.
respiration anaérobie
la nitrate réductase réduit les Nitrates en ______________.
Nitrites (NO2-)
La Nitrate Réductase est mise en évidence par le test _______________.
Griess-Ilosway
le test de Griess-Ilosway est réalisé sur (milieu de culture).
Bouillon nitraté (Bouillon nutritif+ KNO3)
Test de Griess-Ilosway
La révélation se fait en deux temps par une réaction de _____________.
Diazotation
Les deux réactifs utilisés par le test de Griess-Ilosway sont NR1 _______________________ et NR2 _________________________.
NR1: Acide sulfanilique
NR2: Alpha naphtylamine
Test de Griess-Ilosway
Un virage au rouge (NR+) après ajout des réactifs NR1 et NR2 indique _________________.
La réduction des nitrates en nitrites par la nitrate réductase
Test de Griess-Ilosway
Une absence de virage en rouge après ajout des réactifs NR1 et NR2 indique soit _____________________ ou ___________________________.
L’épuisement des nitrites complètement réduites en azote.
Absence de Nitrate Réductase.
Test de Griess-Ilosway
L’ajout des _________ permet de confirmer ou d’infirmer définitivement l’absence de Nitrate Réductase
ions Zinc
Test de Griess-Ilosway
Une absence de virage après ajout des ions de Zinc est témoin d’un NR (+/-)
NR + (Les Nitrates ont déjà été réduites en Nitrites par la Nitrate Réductase, à leur tour réduites en azote moléculaire)
Test de Griess-Ilosway
Une présence de virage au rouge après ajout des ions de Zinc est témoin d’un NR (+/-)
NR- (Les nitrates sont réduites par les ions de Zn en Nitrites)
Le __________________ est un milieu utilisé dans un test mettant en évidence l’utilisation du citrate comme unique source de carbone
Citrate de Simmons
Citez les composantes du milieu Citrate de Simmons.
Milieu solide coulé en pente
Citrate
Bleu de Bromothymol
Le Bleu de Bromothymol est _______ à l’état acide et _________ à l’état alcalin.
vert à l’état acide et bleu à l’état alcalin
La partie (inférieur/supérieur) du milieu Citrate de Simmons peut être utiliser comme témoin.
supérieur
Test Citrate de Simmons
Certaines bactéries utilisant le citrate comme seule source de carbone donnent un résultat négatif due à un ___________________.
défaut de perméases
Parmi les bactéries qui donnent un test Citrate de Simmons négatif malgré l’utilisation du citrate comme seule source de carbone: ______________________.
Escherichia Coli
Un virage au bleu du milieu Citrate de Simmons indique un résultat (positif/négatif).
positif
Test Citrates de Simmons
Afin d’éliminer le problème des perméases, on procède à un second test: _______________________.
Citrate de Christensen
Le milieu Citrate de Christensen est un milieu (solide/liquide).
liquide
Le milieu Citrate de Christensen contient du citrate et une faible quantité de ___________ afin d’amorcer la synthèse des perméases.
glucose
L’indicateur utilisé dans le test de Citrate de Christensen est _____________.
Le rouge de phénol
Le rouge de phénol est ________ en milieu alcalin et ________ en milieu acide.
rouge, jaune
Un virage au rouge du milieu Citrate de Christensen signifie que la bactérie _______________________.
utilise le citrate comme unique source de carbone mais avec défaut de perméases
L’étude du métabolisme glucidique chez les bactéries comprend:
L’étude de la voie d’attaque des glucides
Etude de la dégradation des sucres
Recherche d’enzymes spécifiques ( β-Galactosidase)
Le principal indicateur coloré utilisé pour l’étude de la dégradation des sucres sur milieu simple est _______________.
Le rouge de phénol
Les milieux glucidiques liquides simples sont à base de _________________, ________________ et ________________.
Eau peptonée, sucre, indicateur coloré (rouge de phénol).
Les milieux glucidiques gélosés simples sont à base de: ________________, _______________ et _______________.
gélose, sucre, indicateur coloré (rouge de phénol)
Le CTA est un milieu de culture utilisé pour étudier ___________________ et éventuellement _____________.
la voie d’attaque des glucides, mobilité
Le Mannitol-Mobilité-Nitrate est un milieu de culture caractérisé par l’utilisation de mannitol et de Nitrate et permet la mise en évidence de _________________ et ___________________.
mobilité bactérienne et métabolisme énergétique
Le milieu TSI (Triple Sugar Iron) est un milieu complexe à base de __________, _____________, ___________ et _____________.
glucose, lactose, saccharose, cystéine et rouge de phénol
Le TSI est ensemencé en __________________.
en pente puis par piqure centrale
Milieu TSI
Un virage au jaune du culot signifie __________________.
une fermentation du glucose
Milieu TSI
Un virage au jaune de la pente signifie _________________________.
Fermentation du lactose et saccharose
Milieu TSI
Une production de gaz s’accompagne par __________________.
un décollement de la gélose
Milieu TSI
Une apparition d’un dépôt noirâtre signifie _____________.
production du H2S
Le milieu KIA(Kilinger Iron Agar) est similaire au milieu TSI présentant comme seule différente l’absence de _____________.
saccharose
Milieu TSI
La couleur noire résulte la réduction du ______________ par certaines bactéries en H2S, qui réagit __________.
thiosulfate, sel de Fer
La _______________ est une enzyme qui dégrade le lactose en galactose + glucose.
β-galactosidase
La β-galactosidase est __________ et ___________.
intracellulaire et inductible
La recherche de la β-galactosidase doit toujours se faire à partir d’un milieu contenant du __________.
lactose (TSI, KIA)
La recherche de la β-galactosidase à mettre en contact la bactérie en présence d’un analogue structural du lactose: ______________________.
ONPG (ortho-nitro-phényl-galactoside)
La recherche de la β-galactosidase consiste à mettre en contact la bactérie en présence d’un analogue structural du lactose: ______________________.
ONPG (ortho-nitro-phényl-galactoside)
L’ONPG est structurellement similaire au lactose, sauf que ___________________a été substitué au glucose.
l’orthonitrophényle
Recherche de la β-galactosidase
Un disque d’ONPG est ajouté à une suspension bactérienne dense et incuber de ____ à ____.
30 minutes à une heure
Recherche de la β-galactosidase
Un test positif se traduit par l’apparition d’une coloration ______.
jaune
Recherche de la β-galactosidase
__________________ est responsable de la coloration jaune.
orthonitrophényle
L’ONPG est dégradée par la β-galactosidase en _______________ et _______________.
galactose et orthonitrophényle
Citez les cinq enzymes recherchées dans l’étude du métabolisme protidique des bactéries.
1-Désulfhydrase
2- Uréase
3- Tryptophanase
4- Décarboxylase
5- Tryptophane désaminase
La ________________ est une enzyme impliqué dans le métabolisme des acides aminés soufrés.
Désulfhydrase
La désulfhydrase est une enzyme impliqué dans le métabolisme des ____________________.
acides aminés soufrés (cystéine…)
La recherche de la désulfhydrase se fait sur les milieux: ____, _____ ou ________.
TSI, KIA, Hecktoen
Une coloration _____ sur les milieux TSI/KIA/Hecktoen témoigne de la présence de la désulfhydrase.
noire
La désulfhydrase agit selon la réaction suivante:
NH2
|
SH- R ========> R-NH2 + H2S
désulfhydrase
H2S+ sels de métaux lourds ===> sulfure noir
la recherche de ___________, _____________ et _____________ se fait sur milieu Ferguson (milieu à l’urée ou milieu urée-indole).
uréase, tryptophane désaminase (TDA), tryptophanase
Le milieu Ferguson est un milieu (solide/liquide).
liquide
Citez les composantes du milieu Ferguson.
urée, tryptophane (AA aromatique), rouge de phénol
Le rouge de phénol donne au milieu Ferguson non-ensemencé une couleur _________.
jaune-orangé
Le milieu Ferguson est ensemencé est incubé à _____ pendant 18 heures.
37°C
Milieu Ferguson
La recherche des enzymes doit se faire suivant cet ordre:
01- Uréase
02- Tryptophanase
03- Tryptophane désaminase
L’uréase dégrade l’urée en _____ + _____.
NH3+ + CO2
Milieu Ferguson
Une présence d’une coloration ___________ indique la présence d’uréase.
Rose Fuchsia
La tryptophanase dégrade le tryptophane en _______.
indole
Milieu Ferguson
Après le test de l’uréase, on ajoute au milieu le réactif __________.
Kovacs
Le nom chimique du réactif Kovacs est: _________________.
PDAB (para-diméthyl-amino-benzaldéhyde)
Le para-diméthyl-amino-benzaldéhyde est (miscible/non-miscible) avec le milieu Ferguson
non-miscible
Le réactif Kovacs a la propriété __________________
d’extraire le noyau indole du milieu Ferguson
La présence d’indole produit par la tryptophanase se traduit par la présence de __________.
d’un anneau rouge
La tryptophane désaminase dégrade le tryptophane en ________________.
Acide Indole Pyruvique
Milieu Ferguson
Après le test de la tryptophanase, on ajoute________________ au milieu.
TDA (perchlorure de fer)
Le perchlorure de fer réagit avec l’acide indole pyrivique produit par la tryptophane désaminase et donne __________________.
un complexe au précipité brun-marron
Trois décarboxylases sont recherchées en pratique dans l’étude du métabolisme protidique des bactéries: __________________, ______________ et ________________.
Lysine décarboxylase (LDC), Ornithine Décarboxylase (ODC) et Arginine Di-hydrolase (ADH).
L’ODC dégrade l’ornithine en _____________.
Putrescine
La LDC dégrade la lysine en _________________.
Cadaverine
ADH dégrade l’arginine en _________.
Citrulline
La recherche des décarboxylases se fait sur milieu _____________________.
Moeller-Falkow
Le milieu Moeller-Falkow est un milieu (solide/liquide).
liquide
Le milieu Moeller-Falkow est un milieu liquide contenant du __________ à faible quantité.
glucose
Le milieu Moeller-Falkow contient comme indicateur coloré____________.
Pourpre de Bromocrésol
Le Pourpre de Bromocrésol est ____ en milieu acide et _____ en milieu alcalin.
jaune en milieu acide
violet en milieu alcalin
Mise en évidence des décarboxylase
Chaque tube doit contenir (tous les acides aminés/un acide aminé) à étudier.
un acide aminé
Mise en évidence des décarboxylases
Le tube témoin contient uniquement ________ et __________.
le glucose et l’indicateur coloré
Mise en évidence des décarboxylases
Au départ, tous les tubes sont (couleur).
violets
Mise en évidence des décarboxylases
Après ensemencement, on recouvre les tubes de ___________ et les incube pendant 18 heures à 37°C.
vaseline
Mise en évidence des décarboxylases
La bactérie utilisera toujours (le glucose/l’acide aminé) en premier.
glucose
Mise en évidence des décarboxylases
L’utilisation du glucose se traduit par une (acidification/alcalinisation) du milieu.
Acidification
Mise en évidence des décarboxylases
L’acidification du milieu s’accompagne d’un virage au ______.
jaune
Mise en évidence des décarboxylases
Une __________________ du milieu se verra si la bactérie possède la décarboxylase.
alcalinisation
Mise en évidence des décarboxylases
Une alcalinisation du milieu se traduit par un virage au _______.
violet
Mise en évidence des décarboxylases
Le tube témoin doit toujours êtes _____ pour valider le test.
jaune
La recherche des enzymes lipidiques est surtout de pratique courante en bactériologie (alimentaire/médicale).
alimentaire
En bactériologie alimentaire, on recherche des bactéries à activité _______________ responsable d’altération des aliments (fromages, laits, viandes….).
lipolytique
Trois types d’activités enzymatiques bactériennes lipolytiques sont recherchés: _________________, _________________ et___________________.
Activité lipasique (Trybutyrinase), Activité estérasique,
Activité lécithinasique.
______________ est une substance élaborée recherchée chez les Streptocoques.
L’Hémolysine
Identification bactérienne au laboratoire est basée sur un faisceau d’arguments:
1- Aspect des colonies/exigence en facteurs de croissance
2- Aspect du GRAM
3- Culture sur les milieux sélectifs
4- Tests d’orientation rapides
5- Atmosphère de croissance
