Diagnostic des Infections Virales Flashcards
L’intérêt principal du diagnostic virale est __________________________.
apporter la preuve de l’origine virale de l’infection
Le diagnostic viral contribue à ________________, ________________ et _________________.
- Surveillance épidémiologique.
- Sécurité virale pour les produits distribués.
- Dépistage des infections nosocomiales.
Le diagnostic viral indirect fait appel à la _____________.
sérologie
Le diagnostic viral indirect est fonction de ____________ et _____________.
du virus recherché et de la clinique
L’analyse microbiologique des virus comporte trois étapes _________________, _______________ et _________________.
Prélèvement
Choix de techniques et réalisation
Validation et interprétation
En virologie, le choix du prélèvement dépend de ______________, _____________, _______________ et _________________.
La clinique
Porte d’entrée
Sites de multiplication des virus recherchés
Sites d’excrétion des virus recherchés
En virologie, toute lésion accessible doit être prélevée. (V/F)
V
Le prélèvement virologique doit être réalisé le plus tôt possible après le début des ______________.
signe cliniques
La multiplication virale est optimale lors de la phase _____________.
d’incubation
Le transport des échantillions en virologie doit être ___________, ____________ et ____________.
Dans un milieu de transport
Rapide
Sécurisé
Le diagnostic viral direct comprend ____________, ____________, _________________ et _________________.
- Détection des Ag
- Détection du Virus
- Détection du génome
- Microscope Electronique
______________ est une méthode immuno- enzymatique utilisée pour mettre en évidence des anticorps antiviraux.
ELISA (Enzyme Linked ImmunoSorbent Assay)
Les avantages de la technique ELISA sont ________________, ____________, ____________ et _______________.
- Développée pour tout types de virus.
- Automatisable.
- Adaptée à de grandes séries.
- Différencie les IgM et IgG.
Les indications du diagnostic viral sérologique sont___________________, ___________________ et ___________________.
- Mise en évidence des anticorps résiduels protecteurs témoins d’une infection ancienne (rougeole, rubéole, hépatite A…).
- Mise en évidence des anticorps vaccinaux à un titre protecteur (hépatite B, rubéole).
- Mise en évidence des anticorps dont la présence prouve que le sujet est porteur du virus (HIV, HTLV) ou est susceptible de présenter des récurrences (CMV, EBV, HSV…).
Le diagnostic sérologique permet d’établir un lien entre des manifestations cliniques et un virus donné au stade _____ de l’infection.
aigu
Le diagnostic sérologique permet de suivre l’évolution d’une infection virale aiguë vers une ______ou vers une ______________________.
guérison, infection chronique persistante (hépatite B)
Le diagnostic sérologique permet, en aigu, de mettre en évidence _________________, _________________ et _________________.
-Une séroconversion.
-Une élévation significative du titre des anticorps.
- La présence d’IgM spécifiques.
Hormis l’ELISA, les autres techniques sérologiques comportent ______________, ________________, ____________, __________________ et _____________________.
- Fixation du complément.
- Agglutination.
- Inhibition de l’hémagglutination.
- Neutralisation de l’ECP.
- Western Blot.
La _____________________ est une méthode surtout utilisée pour la détection des anticorps contre les virus respiratoires.
Fixation du complément
Fixation du complément
Les protéines du compléments déjà présentes dans le sérum du malade sont détruites par ______________ et remplacées par une quantité connue et standardisée de protéines du complément.
chauffage
Fixation du complément
Après standardisation des protéines du complément, ____________ est rajouté au sérum.
l’antigène d’intérêt
Fixation du complément
La dernière étape comprend le rajout de _________________ qui ont été pré-liés à des _______________________.
Globules rouges de mouton
Anticorps anti globule rouge de mouton
Fixation du complément
Si le sérum du patient contient des anticorps contre l’antigène d’intérêt, _________________________ qui réagiront avec _______________________.
ils se lieront à l’antigène d’intérêt pour former des complexes antigène-anticorps qui réagiront avec les protéines du complément
Fixation du complément
Chez un patient positif, les globules rouges du mouton _________________________.
resteront intacts au fond du tube (Plus de complément pour réagir)
Fixation du complément
SI le sérum du patient ne contient pas des anticorps contre l’antigène d’intérêt, le complément _________________ et _____________________________________.
ne sera pas épuisé et va réagir avec les complexes anticorps-GR ajoutés
Fixation du complément
La lyse des globules rouges donnent une couleur _____________ à la solution.
rose
Fixation du complément
Chez un patient négatif, le solution est _______________.
rose
Fixation du complément
Chez un patient positif, la solution est ________________.
incolore
Un test d’agglutination implique l’usage de particules en ___________________ sensibilisées avec _____________.
latex, antigène d’intérêt
Une ______________ visible se produit si y a présence d’anticorps contre l’antigène d’intérêt attaché au particule du latex.
agglutination
La sérologie de la ____________ fait appel au test d’agglutination.
Rubéole
Inhibition de l’agglutination
La première étape consiste à combiner _______________ avec ____________.
le sérum du malade avec l’antigène d’intérêt
Inhibition de l’agglutination
La deuxième étape consiste à rajouter _________________.
une solution d’érythrocytes
Inhibition de l’agglutination
En absence d’anticorps, il y a _________________.
hémagglutination
*Inhibition de l’agglutination:
En présence d’anticorps, il y a __________________.
pas d’hémagglutination
____________________ est utilisé pour la sérologie des virus polio.
Neutralisation de l’ECP
Western Blot
Des détergents vont solubiliser les _______________ et libérer les _______________ de la cellule.
lipides
protéines
Western Blot
La dénaturation des protéines permet de les séparer selon leurs ________________.
poids moléculaires
Western Blot
On utilise _______________________ pour séparer et reconnaitre les protéines préalablement dénaturées selon leur poids moléculaire.
un gel
Western Blot
Après migration des protéines sur le gel, on transfère les protéines vers une membrane en ______________.
cellulose
Western Blot
La membrane en cellulose est incubée avec un _____________.
anticorps dirigé contre la protéine d’intérêt
Western Blot
Un anticorps couplé à une _________ est rajouté à la membrane.
enzyme
Western Blot
En présence du ____________, l’enzyme réagit et l’anticorps secondaire ___________.
substrat, de la lumière
Le Western Blot est utilisé pour la confirmation du dépistage pour _______________ et _____________.
Le VIH
Virus T-lymphotrope humain (HTLV)
L’effet cytopathique correspond à la plus (grande/petite) dilution protégeant encore la culture cellulaire.
grande
Les techniques simples et rapides à mettre en place pour le diagnostic viral direct manque de _______________.
sensibilité
__________________ permet de détecter l’antigène à l’intérieur de la cellule.
Immunofluorescence
Le prélèvement destiné à l’immunofluorescence doit être ______________, puis déposer le ___________sur lame.
centrifugé, culot
_______________, _________________ et ________________ permettent de détecter l’antigène libre ou ayant été libéré.
ELISA
Agglutination
Immunochromatographie
ELISA, Agglutination et l’Immunochromatographie demandent une __________ de l’antigène en faisant recours à des _____________.
extraction, détergents
Un contrôle de la spécificité de la réaction est surtout primordial lors de l’identification du ____________ par méthode ELISA.
Herpes simplex virus
Pour identifier _____________ et ____________ dans les selles, on fait surtout recours à ______________.
Rotavirus, Adénovirus, ELISA
On peut faire recours à ___________________ et ______________ pour identifier Rotavirus et Adénovirus dans les selles.
Immunochromatographie
Agglutination
On utilise généralement _________________ pour détecter le Virus Respiratoire Syncytial.
Immunofluorescence
On peut faire recours à ___________________ pour détecter le Virus Respiratoire Syncytial.
Immunochromatographie
Pour les virus respiratoires __________________ et ________________ on fait surtout recours à ELISA pour les détecter.
Virus de la grippe
Virus parainfluenza
On peut utiliser __________________ et ________________ pour détecter le virus de la grippe.
Immunochromatographie
Immunofluorescence
On peut utiliser ____________________pour détecter le virus parainfluenza.
Immunofluorescence
On utilise généralement ______________________ et ________________pour la détection du Herpes Simplex Virus.
ELISA et Immunofluorescence
On utilise _________________________ pour la détection du Virus Varicelle Zona.
Immunofluorescence
L’immunochromatographie est basée sur la migration d’un échantillon à travers une membrane de _______________.
nitrocellulose
Les avantages des techniques immunologiques sont __________________, ___________________ et _______________.
Facilité et rapidité
Spécifique
Commercialisées
Les inconvénients des techniques immunologiques sont __________________, _______________ et ______________.
Faible sensibilité
Cout élevé
Difficulté à interpréter
Dans la détection du génome viral, une étape de _______________ est nécessaire.
Extraction de l’acide nucléique
L’étape d’extraction fait recours à la _________________ pour l’ARN et ________________ pour l’ADN.
ARN: Lyse cellulaire
ADN: Extraction sur colonne
La détection du génome viral est applicable, à priori, à tous les virus surtout à des virus _______________ ou ______________.
difficiles ou impossibles à isoler
La détection du génome viral repose sur le principe de ______________par une sonde nucléique spécifique avec les acides nucléiques du virus éventuellement présent dans le sérum.
hybridation
La détection du génome viral peut se faire directement sur les produits biologiques ou après amplification in vitro de la séquence nucléique virale par _________________________.
Réaction de polymérisation en chaîne (PCR)
La PCR a révolutionné la virologie en raison de sa _____________, _______________ et _________________.
Sensibilité
Spécificité
Automatisation
La visualisation de la PCR se fait sur ________________________.
gel en bromure d’éthidium
La PCR quantitative permet de mesurer ____________________.
Quantité initiale d’ADN
La PCR est utilisé comme diagnostic d’urgence en cas de méningo-encéphalite induite par ________________.
Herpes simplex virus
La PCR quantitative est utilisé pour la détection du _________________ chez les greffés de rein.
Cytomégalovirus
____________________ est utilisé pour le dépistage du VIH chez le nouveau né.
PCR qualitative
___________________ est utilisé pour le suivi de la charge virale chez les sidéens.
PCR quantitative
On associe sérologie et PCR pour la détection du _______________.
Virus de l’Hépatite C
Pour la culture des virus, on est obligé de faire recours à _______________.
un hôte
Les hôtes potentielles d’une culture virale sont ____________, ______________ ou ________________.
Animal
Œuf de poule embryonné
Cellules en culture in vitro
On utilise des animaux pour cultiver _____________________.
Coxsackievirus A types 1 à 6
On utilise des œufs de poule embryonnés pour cultiver _______________ et __________________.
Poxvirus
Virus de la grippe
Le transport du prélèvement viral destiné à la culture s’effectue dans un milieu de transport qui se compose de ___________, ____________, _____________ et ______________.
Antibiotique
Tampon
MEM (Milieu Minimum Essentiel)
Protéines (Sérum de veau fœtal)
La culture des virus se fait sous ________________________.
hôte à flux laminaire
Culture cellulaire in vitro des virus
On examine les cellules sous microscope pour détecter ___________________.
L’effet cytopathique
Le temps d’apparition de l’effet cytopathique de __________________ est de 24 heures.
Entérovirus
Le temps d’apparition de l’effet cytopathique de ________________ est de 2 à 3 jours.
Herpes simplex virus
Le temps d’apparition de l’effet cytopathique de ___________________ est de 4 à 5 jours.
Virus zona varicelle
Le temps d’apparition de l’effet cytopathique du ________________ est de 10 à 15 jours.
Cytomégalovirus
Une détection précoce du virus par des ____________________ est effectuée à _____-______ heures de culture.
Anticorps monoclonaux
24 à 48 heures
On utilise ___________________ pour détecter le cytomégalovirus dans une culture à 48 heures.
Immuniperoxydase
__________________ et _______________ sont utilisés dans la détection précoce des virus après culture cellulaire in vitro.
ELISA
Immunofluorescence
Une inoculation en double se fait pour ____________________.
Cytomégalovirus
Inoculation double CMV
La première plaque est destinée à __________________ et la deuxième plaque est destinée à ___________________.
Plaque 01: Détection à 48 heures
Plaque 02: Détection de l’ECP (culture longue)
L’indentification d’un virus détecté par ECP se fait par ___________________, _____________________ ou ___________________.
- Anticorps monoclonaux (IF, ELISA)
- Neutralisation de l’ECP par des anticorps spécifiques
- Inhibition de l’hémagglutination
Le microscope électronique reste utilisé dans certaines situations _______________ particulières.
épidémiques
