PCR

Question 1

¿Que es la PCR?

Answer 1

Es una reacción enzimática in vitro que amplifica millones de veces una secuencia especifica de DNA durante varios ciclos repetidos en los que la secuencia blanco es copiado

Al final de la reaccion, las amplicones son analizados en geles de agarosa (electroforesis)

Question 2

¿Que se necesita para una PCR?

Answer 2

• DNA molde
• Solucion amortiguadora/buffer
  -Cofactor (MgCl2)
  -DNA polimerasa termoestable (taq polimerasa)
  -Desoxinucleosidos trifosfato (dNTPS: A,T, C y G)
  -2 cebadores 16-24 pdb

Question 3

¿Cuales son las etapas del PCR?

Answer 3

-Desnaturalizacion
-Alineacion
-Extension

Question 4

¿Cuantos ciclos se necesitan para reliazar todas las etapas de PCR?

Answer 4

25- 35 ciclos en total
En cada ciclo se produce el doble de la cantidad de copias, obteniendo al final

Question 5

ETAPAS DE LA PCR
Menciona las características de la DESNATURALIZACION

Answer 5

Consiste en separar el DNA d doble cadena en dos cadenas sencillas al calentarlas 94°C durante 29-30 segundos

Question 6

ETAPAS DE LA PCR
Menciona las características de la HIBRIDACION

Answer 6

Consiste en disminuir la temperatura para favorecer la unión de los cebadores a sus cadenas complementarias
T- 52-53°C

Question 6

ETAPAS DE LA PCR
Menciona las características de la EXTEN SION

Answer 6

Consiste en sintetizar las nuevas cadenas de DNA, por medio de la DNA polimerasa termoestable (taq DNA polimerasa)

Question 7

PCR
¿Que es la electroforesis?

Answer 7

Es la separación de grandes moléculas como nacidos nucleicos a través es de una matriz solida (filtro) en un campo eléctrico de acuerdo a su tamaño y carga eléctrica

Question 8

PCR
¿que se necesita para realizar la electroforesis?

Answer 8

-Amplicones
-Buffer (TAE o TBE)
-Gel de agarosa
-Bromuro de etidio