kromatografija Flashcards
kaj je KROMOTOGRAFIJA
ločevanje, čiščenje ali izolacija posameznih komponent iz raztopin ali plinov na trdnem nosilcu na podlagi razlik v fizikalno-kemičnih lasnostih
kaj je ANALIT
snov, ki se loči med kromotografijo (snov, ki jo želimo dobiti iz zmesi)
kaj je KROMOTOGRAM
predstavitev rezultatov kromotografije v obliki diagrama ( x - os je retenzijski čas, y - os je signal)
kaj je MOBILNA FAZA
je faza, ki se giblje v določeno smer (tekočina, plin, superkritična tekočina). Potuje skozi kolono (stacionarno fazo).
kaj je RETENZIJSKI ČAS
je čas, ki ga določen analit potrebuje, da prepotuje skozi kolono do detektorja
kaj je VZOREC
analizira pri kromotografiji, ena komponenta ali več
kaj je TOPILO
snov, ki je sposobna raztapljanja snovi - MF
kaj je STACIONARNA FAZA
postopkom kromatografije fiksirana.
Analiti iz mobilne faze tvorijo interakcije s stacionarno fazo.
Komponente mobilne faze, ki tvorijo s stacionarno fazo
močnejše interakcije se na njej zadržujejo dalj časa in na
podlagi tega pride do ločbe različnih komponent vzorca.
Primer stacionarne faze je silica gel pri tankoplastni
kromatografiji
kako delimo kromatografske metode glede na vrsto stacionarne in mobilne faze
-plinska kromatografija (gc)
-tekočinska kromatografija (lc)
področje uporabe kromotografije?
+ Kemije naravnih spojin,
+ Farmacija,
+ Medicina,
+ Raziskave v okolju
Opiši plinsko kromotografijo
ločimo organske spojine z maso do 1000 D ter nekatere hlapne anorganske substance, z izločitveno kromatografijo (SEC) pa celo molekule z molsko maso do 107 D
posledica česa je kromotografska seperacija
razlik v hitrosti potovanja posameznih komponent pod vplivom mobilne faze (plin, tekočina), zaradi selektivnega zadrževanja (retenzije) komponent na stacionarni fazi (trdna površina ali nemobilna tekočina).
opiši plinsko kromotografijo
+ Separacijo in kvantitativno doLočitev termično stabilnih spojin, ustrezen parni talk (hlapnost), termično stabilne do 300- 350 °C
+ GC – najpogostejša izbira – separacija na osnovi porazdelitve komponent v vzorcu med MF (He, N2) in SF (tekočina na nekem trdnem nosilcu).
+ Detektor – FID, ECD, MS
Iz česa je sestavljen plinski kromatograf?
Sestavljen iz:
* injektor,
* kromatografska kolona,
* detektor.
Najpogosteje uporabljeni plini pri plinski kromotografiji?
He, N2, Ar, mešanica Ar - CH4
Injektor pri plinskem kromotografu
Omogoča vnos vzorca v tok nosilnega plina.
Kaj je liner?
steklena cevka (raven ali enostransko zaobljen, polnjen z nosilcem ali prazen)
Opiši kolono pri plinskem kromotografu
+ Kapilarna kolona (iz kremenčevega stekla z notranjim premerom 0,1 – 0,53 nm, dolžina 10 -100 m)
+ Notranja stran kolone – stacionarna faza v obliki tankega filma , navadno kemijsko vezan na površino stekla
+ Kapilarne kolone – za majhne količine vzorcev, višja delovna T
na osnovi česa so najpogosteje kolone za plinski kromotograf
na osnovi polioksanov (HP-1,..)
Kaj je naloga detektorja pri plinski kromotografiji
da na koncu zazna eluirane komponente, ki jih pretvori v električne signale
Lasnost detektorja plinskega kromotografa
Mora biti občutljiv na sledove tujih spojin v nosilnem plinu, stalen, ponovljiv, hiter
Velikost signala v detektorju plinskega kromotografa mora biti sorazmerna s čim?
koncentraciji komponentne v vzorcu
katere detektorje plinskih kromotografov poznamo?
+ FID detektor (plamensko izolacijski detektor) (T: 200-400°C, visoka občutljivost, odzivnost)
+ TCD detektor (termično prevodnostni detektor)
+ MS detektor (masno selektivni detektor)
+ ECD detektor ( detektro na zajetju elektronov)
LSC
adsorpcijska kromotografija, liquid solid chromotography
LLC
porazdelitvena kromotografija, liquid liquid chromotography
IC
IONSKA KROMOTOGRAFIJA, ION CHROMOTOGRAPHY
izločitvea kromotografija
Size exclusion chromotography
Opiši tekočinsko kromotografijo
+ Separacijska metoda, pri kateri je mobilna faza tekočina.
+ Omogoča hitro in natančno analizo vzorcev.
+ Ločevanje analitov vzorca glede na njihove kemijske in
fizikalne lastnosti, ki temeljijo na porazdelitvi med mobilno
in stacionarno fazo
Mobilna faza v tekočinski kromotografiji
+ MF – potuje skozi kolono s pomočjo visokotlačno črpalko,
pretok od 0,4 – 5,0 mL/ min
+ Pravilo MF – ne sme reagirato s polnilom (SF) in drugimi
kovinskimi deli aparata
+ Rezervoar MF – potrebno jo je razpliniti
Stacionarna faza pri tekočinski kromotografiji
+ SF – velika izbira na trgu
+ REVERZIBILNA SF – kemijsko zelo stabilna, odporna na
visoke tlake, nepolarna površina – ločevanje nepolarnih
snovi
črpalka pri tekočinski kromotografiji
+ Potiska MF skozi kolono ob konstantnem pretoku.
+ Batna črpalka – najpogostejša
+ Ena MF – izokratsko metodo
+ Več MF – gradientna metoda (za ločevanje z zelo različnimi
časi zadrževanja na koloni)
injektor pri tekočinski kromotografiji
+ Injiciranje določene količine vzorcev
+ Avtomatski vzorčevalnik – točno določeno količino vzorca,
(5 – 500 µL)
+ Preprečiti kontaminacijo vzorcev
kaj poteka v koloni?
seperacija vzorcev
vzrok zadrževanja komponent na koloni?
porazdelitev topljenca med SF in MF
iz česa je narejena kolona pri tekočinski kromotografiji
nerjavečega jekla
detektor pri tekočinski kromotografiji
določi koncentracijo analita v MF
Odzove se na fizikalno kemijske lastnosti analita na koloni
Je dovolj občutljiv in sposoben zaznati nizke množine analita
