immuno selection pos et negatif du T Flashcards
La CPA presente koi a sa surface
un peptide
la CPA presente un peptide a travers ki
CMH
CD4 et CD8 reconnaisse kel CMH
Coengagement du co-récepeteur CD4 (CMHII) ou CD8 (CMHI)
DONC RESTRICTION PAR LE CMH
LE CMH et la reconnaissance antigenique est cmt
restricter, le concept de “restriction par le CMH” se réfère au fait que chaque lymphocyte T est capable de reconnaître les antigènes uniquement lorsqu’ils sont présentés par les molécules de CMH correspondantes
risque du CMH et sa reconnaissance antigenique
-risque d’auto-réactivité
-risque d’inutilité
a cause de Reconnaissance du non soi dans le contexte du soi
cmt on evite les risk de reconn antigenique par le CMH
education thymique
ckoi education thymique
Création d’un répertoire de cellules T utiles et non-autoréactives
maturation de cellule T ayan kel caracteristic
Maturation de cellules T restreintes au CMH et des cellules T non autoréactives
education thymique a kel deux type de selection
Sélection positive: survie des cellules T dont les RCT reconnaissent les molécules du CMH du soi
Sélection négative: élimination des cellules T qui réagissent trop fortement avec le CMH du soi
ou se fai ke developpemen des LT
Le thymus est le site de développement des lymphocytes T et est la source principal
de cellules T
Le thymus doit être constamment colonisé par des précurseurs hématopoiétiques
provenant de la moëlle osseuse
Les cellules en cours de différenciation dans le thymus sont nommées
thymocytes
le thymus est formé de cmb de lobe
de deux lobes séparés en lobule
zone du thymus c leskel
cortex et médulla
cellule epitheliale c ds kel zone
cortex et medulla
cellule epithelialle dorigine hematopoietique
non
cellule epitheliale exprime koi
expriment les molécules de classe I et II du CMH
Les macrophages et les cellules dendritiques, cellule de kell ligné
s de la lignée
hématopoiétique, e
Les macrophages et les cellules dendritiques, exprime koi
expriment aussi les molécules de classe I et II du CMH.
Les cellules
dendritiques se retrouvent
à la jonction cortico-médullaire et la médulla
macrophage reparti ou
Les macrophages sont répartis ds tout l’organe
Les précurseurs hématopoiétiques qui colonisent le thymus, entrent ou
t à la jonction
corticomédullaire, reçoivent des signaux par les ligands de Notch
ligan notch sont exprimé par ki
exprimés par les
cellules épithéliales
ligan de notch se lie a ki
reçoivent des signaux par les ligands de Notch (exprimés par les
cellules épithéliales) qui se lient au récepteur Notch qu’ils expriment à leur surface
cellulaire
la liaison des ligan de notch a leur recepteur provoque koi
provoque l’engagement vers la différenciation en lymphocytes T
lors du dev des LT o debu ell son double positif
fau, double neg, elle n exprime ni CD4 NI CD8
apre double neg en koi se differenci les LT
en double positive
apre double pos
simple pos soi CD4 soi CD8
cmb dtem sa pren pr la differenciation en CD4 OU CD8 SIMPLE = MATURE
3 semaine
Les précurseurs les plus immatures qui colonisent le thymus ont
réarrangé les gènes du RCT
fau Les précurseurs les plus immatures qui colonisent le thymus n’ont pas encore
réarrangé les gènes du RCT
cmb on a de DN
4 sous population
ckoi l expression des DN
l’expression des molécules de surface CD44,
CD25 et c-kit
CD44, CD25 et c-kit ckoi
CD44:molécule d’adhésion
CD25: chaîne alpha du récepteur à l’IL-2
C-kit:récepteur du facteur de croissance des cellules souches
prk les cellule DN1 et DN2 polifere
prolifèrent afin d’augmenter le nombre de précurseurs des cellules T (très peu
de précurseurs colonisent le thymus)
le stade DN2 c le debu de koi
Au stade DN2, début du réarragement de la chaîne beta du RCT (D-J)
et début du réarrangement des
locus gamma/delta (diapo suivante)
Les cellules DN3 nouvellement produites fon koi
arrêtent de proliférer afin d’effectuer le réarrangement complet de la chaîne beta du RCT
DN3 pr rearranger le TCR exprime koi
pre TCR si le rearangemen beta est productif
L’expression du pré-RCT permet
-la survie du thymocyte DN3,
-la prolifération massive des DN3 (environ 14 divisions cellulaires),
-la différenciation en cellules DP
-et l’exclusion allélique de la chaîne beta du RCT.
la differenciation est nommé cmt
beta selection
l entree en poliferation des DN3 degrade ki
En effet l’entrée en prolifération des DN3 déstabilisent la protéine RAG-2 ce qui mène à sa dégradation.
prk on degrade RAG et cki RAG deja
Cela a pour conséquence d’empêcher tout autre réarrangement de chaîne beta; ce phénomène s’appelle exclusion allélique (cela empêche aussi de débuter le réarrangement de la chaîne alpha
La prolifération massive des DN3 suite à la beta-sélection (expression du pré-RCT) permet
permet de créer un clone avec le même réarrangement beta et d’y associer différentes chaînes alpha.
Les enzymes RAG1 et RAG2 (responsables du réarrangement des gènes du RCT) sont transcrits de kel stade
Les enzymes RAG1 et RAG2 (responsables du réarrangement des gènes du RCT) sont transcrits du stade DN2 à DP.
tt les thymocyte arrive a maturation
non 98% des thymopcytes n’arrivent pas à maturation
graph slide 12
Est-ce qu’un thymocyte DN3 sait que le
réarrangement de la chaine beta est
productif (code pour une protéine
fonctionnelle)?
Est-ce qu’un thymocyte DN3 qui n’a pas fait
un réarrangement productif de la chaine beta
du RCT poursuivra sa différenciation?
cmt on sai si le rearrangement beta est productif pr exprimé pre TCR
Afin de savoir si son réarrangement beta est productif, les DN3 produisent une chaine
pré-Talpha invariable
role pre t alpha invariable
Elle remplacera la chaine alpha du RCT afin de permettre l’expression à la surface cellulaire du pré-RCT.
et Ceci n’aura lieu que si le réarrangement beta est productif puisque
l’expression du pré-RCT requière la présence de toutes les composantes du pré-RCT recheck
TCR composition?
(pré-Talpha, chaine beta du RCT et complexe CD3) recheck
L’expression du pré-RCT à la surface cellulaire indique au thymocyte koi
qu’un
réarrangement productif de la chaîne beta a été effectué. Ce processus s’appelle la
beta-sélection
beta selection necessite interaction avec ligan
fau Ceci ne nécessite pas d’interaction avec un ligand
exclusion allellique role
L’exclusion allélique permet de supprimer tout réarrangement ultérieur au locus de la
chaîne beta du RCT
exclusion allelique provoqué par koi
Cette exclusion allélique est provoquée par la dégradation de
RAG2 pendant la phase de prolifération.
La phase de prolifération est importante prk
pour créer un clone de thymocyte avec la
chaine beta réarrangée.
chaine beta rearranger et poliferation necessaire pr cree kel type de thymocyte
thymocyte DP
L’expression de la chaine pré-Talpha est perdue kan
e lors de la différenciation en
thymocytes DP
si rearrangement beta bien, DP arrete de poliferer et ya exclusion allelique donc keski spasse avec RAG
Ceci stabilise la protéine RAG2 afin de permettre le réarrangement au locus alpha du RCT. PUI DEGRADER?
Conséquence de la sélection positive et négative
création d’un répertoire de cellules T
restreint au CMH mais autotolérant.
SELECTION pos et neg permet koi
Permet aussi de s’assurer que la cellule T exprime un RCT fonctionnel
ckoi t restrein au cmh mai autotolerant
la selection neg s arrete o stade SP =simple pos
fau, La sélection négative continue aussi au stade SP
prk etape selection necessaire
Ces étapes de sélection sont nécessaires à cause du réarrangement aléatoire des
chaines du RCT
et du mode de reconnaissance de l’Ag par le RCT
lors du dev ds thymus kel LT est eliminer et lekel survi
-élimination des lymphocytes T exprimant un RCT autoréactif (sélection
négative)
-survie des lymphocytes T exprimants un RCT capable d’interagir avec les molécules de classe I ou II du CMH du soi (restriction par le
CMH, sélection positive)
ya des LT selectionner pos ki meur?
oui rechek bes
-mort des lymphocytes T ayant un RCT incapable d’interagir
avec les molécules de classe I ou II du CMH
-mort des lymphocytes T n’exprimant pas un RCT
ou c selection ng?
cmt et cmb de thymocyte meur
98% des thymocytes vont mourir par apoptose lors de la sélection thymique
manque de selection pos=
mor de majorité des thymocyte DP
cmb meur par conseq de selection neg
environ 2 à 5 % des DP meurent des conséquences de la sélection négative
ag de LCMV virus est tué par LT kan il es presenté par kel CMH
CMH B
EXPLIQUE experience du slide 18
1-Greffe de thymus MHC b (irradié pour enlever les cellules T matures) à des souris (A x B) F1 (expriment CMH A et CMH B) thymectomisées et irradiées.
2-Reconstitution du système immunitaire par injection intraveineuse de cellules hématopoiétiques de la moelle osseuse d’une souris (A X B)F1.
3- les progéniteurs A x B maturent dans un thymus qui n’exprime que CMH b sur les cellules stromales ou épithéliales (radio-résistantes).
4-Infectent les souris avec le virus LCMV,
5- prélèvent les cellules T et regardent si elles peuvent tuer des cibles MHCb ou MHC a. .
ds experience de slide 18 la lyse des cibles est cmt
on observe que la lyse des cibles de type MHC b
SI YA Maturation des thymocytes du greffon (exprimant CMH a et b) dans un thymus d’haplotype b (CMH). Le thymus greffé exprime le CMH b sur ces cellules stromales
Ces cellules sont-elles restreintes au CMH de l’haplotype du thymus?
oui car apre infection Il y a uniquement lyse des cibles présentant l’antigène sur le CMH b. Le thymus implanté a donc sélectionné que des T exprimant un RCT capable d’interagir avec le CMH b.
explique ce concept -Maturation des thymocytes du greffon (exprimant CMH a et b) dans un thymus d’haplotype b (CMH). Le thymus greffé exprime le CMH b sur ces cellules stromales
Est-ce que les cellules dendritiques (d’origine
hématopoïétique) peuvent induire la sélection
positive?
La sélection positive se fait au stade et ou
La sélection positive se fait au stade DP lorsque les thymocytes sont dans le cortex
au cortex kel cellule exprime molecule class 1 ett 2
cet endroit seules les cellules épithéliales expriment les molécules de classe I et II du
CMH.
La sélection positive va induire la migration des DP ou
la migration des thymocytes DP vers la jonction corticomédullaire et la médulla où se trouvent les cellules demdritique
Les macrophages présents dans le thymus contribuent au processus de sélection
Les macrophages présents dans le thymus ne contribuent pas au processus de sélection
les macrophage jou un role ou
mais jouent un rôle important de phagocytose des thymocytes qui meurent pendant le
développement thymique
Les thymocytes DP survivent cmb de jour a ce stade
Les thymocytes DP survivent environ quatre jours à ce stade
prk les DP survive 4 jour a ce stade prk
Cela leur permet de tester différentes chaînes alpha du RCT (la configuartion du locus alpha du RCT fait en sorte que cela est possible)
La sélection positive sélectionne les thymocytes ayant un RCT interagissant avec
avec le CMH du soi, ceci inclut des cellules de faible et haute affinité
dans cette interaction les molécules du CMH du soi sont chargé
i sont chargées avec des peptides dérivés des protéines du soi
La sélection négative se fait ou
t à la jonction cortico-médullaire au stade DP et dans la médulla au stade SP
Selection negatif ceci permet
d’éliminer les thymocytes exprimant un RCT qui réagit trop fortement envers nos molécules du CMH du soi (chargées avec peptide du
soi).
En absence d’infection keski sera charger sur le CMH
En absence d’infection, ce sera des peptides dérivés de nos propres protéines
qui seront chargés sur les molécules du CMH
slide 22
slide 23 exam?
Est-ce que l’absence des molécules de
classe I et II du CMH va affecter la
génération des thymocytes DP?
Est-ce que l’absence des molécules de classe
I du CMH va affecter la génération des
thymocytes CD4SP
Est-ce que l’absence des molécules de classe
II du CMH va affecter la génération des
thymocytes CD4SP?
a kel stade se fai selection pos
DP
absence cmh1 ou 2 sue dev des thymocyte cause koi
deficience soi en cd8 ou cd4 hassab kel cmh absen
prk la génération des DN et DP est normale
puisqu’elle est indépendante du ligand
que la spécificité du RCT pour les molécules de classe I ou II dicte koi
dicte le choix du co-récepteur.
kel cd es produi
Production de CD8SP si le RCT est restreint aux molécules de classe I du CMH et production de CD4SP si restreint classe II
Si on ajoute l’expression des molécules de classe II par transgénèse dans les souris déficientes pour les molécules de classe II du CMH sur kel ce;;u;e et conseq
seulement sur les cellules épithéliales corticales, il y a restauration de la sélection positive et du développement des cellules CD4SP
L’introduction par transgénése de gènes déjà réarrangés et codant pour les chaînes alpha et beta du RCT fai koi
inhibe les réarrangements endogènes au locus alpha et beta du RCT.
et Cela crée donc une souris monoclonale où toutes les cellules T expriment le même RCT de la spécificité voulue
kan ya pa de selection pos
Il n’y a pas de sélection positive lorsque les transgènes sont introduits dans la souche H-2d puisqu’elle exprime le mauvais haplotype du CMH
car Ici spécifique pour un peptide du virus de la grippe en association avec la molécule de classe I du CMH, H2-k
Est-ce que nous retrouverons les mêmes
populations de thymocytes (DN, DP, CD4SP et
CD8SP) chez le mâle et la femelle?
Quelle population de thymocytes sera
absente chez le mâle?
34
Exogenous superantige cki
superantigène exogéne, sont produits par les bactéries et les
virus
Endogenous superantigen: cki
superantigène endogène, ce sont des protéines codées par
des rétrovirus endogènes, qui se sont intégrés dans le génome des souris
Les superantigènes (endo et exo) se lient cmt
sous leur forme entière aux molécules de
classe II du CMH à l’extérieur de la niche à peptide. Leur liaison n’est pas restreinte
par l’haplotype du CMh
ksel region impliqué ds reconn superantigene
Uniquement la région Vbeta du RCT sera impliqué dans la reconnaissance des
superantigènes
superantigene et vbeta tcr permet koi
Ceci permet à une grande proportion de cellules T de répondre (plus de 5% des
cellules T). Cette réponse massive mène à la production massive de cytokines qui
mènera à une toxicité systémique
cki superantigene
Plusieurs bactéries causant des empoisonnements alimentaires produisent des toxines
bactériennes qui agissent en tant que superantigène.
donc superantigene role
si tcr pas specific a peptide l elimine en produisan toxine?
36/37
repete ki survi selection pos et selction neg
sélection positive: survie des thymocytes réactifs contre le CMH du soi
-sélection négative:élimination des cellules autoréactives
Comment le processus de sélection négative n’élimine pas
tout le répertoire sélectionné ?
HYPOTHÈSE DE L’AFFINITÉ (AVIDITÉ)
Le niveau d’intensité des signaux médiés par le RCT reçus par le
thymocyte détermine l’issue de l’interaction
avidité ckoi
différence dans la force du signal transmis par le RCT
L’avidité dépend de
l’affinité de l’interaction entre le RCT et le complexe peptide-CMH et de la densité des complexes peptide-CMH sur la cellule présentatrice d’antigène
TAP cki
transpoteur de peptide du cytoplasme au réticulum endoplasmique.
prk tap necessaire
TAP est donc nécessaire pour l’expression des molécules de classe I du CMH puisque l’association des molécules de classe I du CMH avec un peptide est requise pour l’expression stable à la surface cellulaire
en absence de tap keski spasse
les molécules vont quand même à la surface mais elles sont rapidement internalisées et dégradées.
en absence de tap cmt on retabli
On peut donc rétablir l’expression des molécules de classe I en ajoutant des peptides dans la culture. Le niveau d’expression des molécules de classe I à la surface sera proportionnelle à la quantité de peptide ajouté
FTOC CKI
Ce système de culture de lobe thymique fétal est un outil unique pour étudier les processus de sélection thymique
AU JOUR 16 DE GESTATION KESKIL YA
À ce stade le thymus ne contient que des thymocytes DN. On peut donc suivre leur vague de différenciatio
KEL lobe on use lors dexperience
. Pour faciliter le travail, on utilise des lobes thymiques de souris RCT transgéniques. Donc tous les thymocytes qui se différencient portent le même RCT et ont donc la même spécificité.
ajou peptide
L’ajout d’une petite quantité de peptides mènera à une interaction de faible avidité avec le RCT (signal faible): survie et sélection positive des thymocytes
L’ajout d’une grande quantité de peptides mènera à une interaction de forte avidité (signal fort): mort par sélection négative
kel signal permet la selecition pos
Seuls les thymocytes dont les RCT se lient faiblement aux complexes CMH-peptide subissent la sélection positive et évitent la sélection négative
Comment un thymocyte DP sait-il que son RCT a vu une molécule du CMH de classe I ou II
-Les cellules CD4 vont voir des antigènes exogènes présentés par les molécules de classe II du CMH. Efficace contre les bactéries extracellulaires, les CD4 aideront à la réponse humorale des cellules B
-Les cellules CD8 vont voir des antigènes endogènes présentés par les molécules de classe I tel que les antigènes viraux. Et justement ces cellules auront une activité cytotoxique qui permettra d’éliminer les cellules infectées.
cmt diff a partir de 4 caracteristic
intructif
stochastic
cinetic de liaison
explique chake caratcteristic
kestu=ion
Treg naturelles
se développent dans le thymus, voie
alternative de différenciation pour les lymphocytes T
autoréactif
Treg induites
se développent à partir des cellules T CD4
conventionnelles lors de la réponse immune
kel markeur exprime les t regulatrice
expriment CD25 et le facteur de transcription Foxp3
mode d action des treg
slide 49
*Inhibe la prolifération d’autres cellules T in vitro
*Inhibe le développement de maladies autoimmunes chez la souris
(diabète, sclérose en plaques…)
*Leur suppression est antigène spécifique (nécessite leur stimulation
par le RCT)
*Nécessite un contact cellulaire entre Treg et cellule cible
impact clinique des t reg
*déplétion de Treg pour améliorer la vaccination
*déplétion de Treg pour améliorer la réponse anti-tumorale
*injection/activation de Treg pour traiter les maladies autoimmunes
