Histotechnologie (RT) Flashcards
Comment peut-on vérifier s’il y a une présence d’eau dans un bain d’alcool:
L’eau devient bleu en ajoutant un peu de sulfate anhydre.
Quelle est la méthode de fixation la plus simple:
Chaleur
Quels sont les propriétés des fixateurs:
- Additif : liaison du fixateur avec les protéines
- Non additif : la molécule perd son lien intime avec l’eau et devient moins réactive
- Coagulant : formation d’un réseau de fibres permettant aux solutions de pénétrer à l’intérieur du tissu
- Non coagulant : formation d’un gel. Il en résulte une mauvaise pénétration du tissu par les solutions et l’infiltration à la paraffine et moins efficace
- Tolérant : le tissu peut demeurer dans le fixateur pendant une longue période de temps sans causer de dommages au tissu
- Non tolérant : le tissu ne peut pas demeurer dans le fixateur plus longtemps que la période recommandé sinon, il y a durcissement excessif du tissu ou rétrécissement du tissu
Vitesse de pénétration des fixateurs, du plus lent au plus vite:
- formaldéhyde
- acide acétique
- chlorure mercurique
- alcool méthylique
- alcool éthylique
- tetroxide d’osmium
- acide picrique
Quel est le meilleur fixateur:
Formol 10%
Quels sont les buts de la fixation;
- préserver le tissu
- prépare les tissus au traitement qui suive (donne une résistance)
Quel est le but de décalcification:
Enlever le calcium des tissus.
Quel est le but de la circulation:
Préparation du tissu fixé afin de pouvoir l’inclure dans un matériau rigide qui permettra d’en faire des coupes observables.
Quel est le but de la déshydratation:
Reltrait de l’eau (et fixateur)
Quel est le but de l’éclaircissement:
Retirer l’agent déshydratant pour le remplacer par l’agent éclaircissant (rend le tissu transparent).
Quel est le but de l’imprégnation:
- retrait complet du xylène et remplacement par la paraffine
- fournir un support interne au tissu
Quel est le but de l’enrobage:
Fournir un support externe pendant et après la coupe au microtome.
Quels sont les différentes dimensions au microtome:
- routine: 4um
- argent: 2um
- rouge congo: 6um
Quel est le but de l’étalement:
Aplanir et étirer le tissu avant de le mettre sur la lame.
Quelle doit être la température d’eau d’étalement:
46-48oC
Particularités à l’étalement pour l’immunohistochimie:
- bain pas plus de 40oC
- pas ajouter d’adhésif
Attention aux adhésifs pour procédés histochimiques:
Pas d’adhésifs protéiques
Attention aux adhésifs pour procédés immunohistochimiques:
Pas d’adhésifs protéiques car on recherche des Ag (protéines)
Attention aux adhésifs pour recherches des glucides:
Pas d’adhésifs à base d’amidon.
Éléments cellulaire du plus au moins dense:
- globule rouge
- muscle
- cytoplasme
- collagène
Types de différentiation:
- différentiation par excès de mordant: par effet de compétition
- différentiation par des acides: bris du lien entre le mordant et du tissu
Attention particulière lors de la coloration APS:
On ne peut pas utiliser de colle à base d’amidon.
Quel est le seul fixateur qui est non additif:
Ethanol
Quel est le seul fixateur qui est intolérant:
Éthanol
Quels sont les avantages du fixateur formaldéhyde: (5)
- moins de rétrécissement
- durcit le plus (sauf acétone et éthanol)
- peu couteux
- versatile au niveau des colorations
- pénètre et s’additionne rapidement
Quels sont les désavantages du fixateur formaldéhyde: (2)
- coloration des éléments non nucléaires
- fixe lentement
Quels sont les avantages du fixateur glutaraldéhyde: (2)
- microscopie électronique
- fixe et pénètre en même temps
Quels sont les désavantages du fixateur du glutaraldéhyde: (3)
- tendance à être intolérant
- instable
- pénètre pas bien
Quels sont les avantages du fixateur acide acétique: (3)
- améliore la coloration des éléments nucléaires
- bon pour les mucines gastriques
- pénètre très vite
Quels sont les désavantages du fixateur acide acétique: (2)
- gonflement des tissus
- globules rouges et hémosidérine lysés donc la technique de Pearl`s est inutile
Quels sont les avantages du fixateur chlorure mercurique: (1)
- colorations plus belles
Quels sont les désavantages du fixateur chlorure mercurique: (5)
- toxique
- lente pénétration
- caude du rétrécissement
- cause du durcissement
- pigment de mercure
Quels sont les avantages du fixateur tetroxyde d’osmium: (1)
- le meilleur pour la fixation des lipides
Quels sont les désavantages du fixateur tetroxyde d’osmium: (2)
- très couteux
- pas bon pour la santé
Quels sont les avantages du fixateur acide picrique; (5)
- fixateur versatile: fixe, mordant, différentie, colore
- le seul fixateur a jouer 4 rôles
- avantageux de colorer les petits morceaux pour les répérer facilement
- décalcifie un peu
- bonne coloration avec des colorants acides et trichromiques
Quels sont les désavantages du fixateur acide picrique (7)
- pas bon pour ADN et ARN
- tendance a rétrécir
- gonfle les globules rouges
- diminue l’hémosidérine
- doit éviter les organes hématopoiétiques
- fixe mal le rein
- pigment d’acide picrique
Quels sont les avantages du fixateur bichromate de potassium: (2)
- peu couteux
- conserve bien les phospholipides
Quels sont les désavantages du fixateur bichromate de potassium: (4)
- ulcération des mains
- destruction des membranes muqueuses
- noircissement des solutions avec le temps
- pigment de chrome
Quels sont les avantages du fixateur éthanol: (2)
- ne laisse pas de trace car il ne s’additionne pas
- augmente la vitesse de pénétration si ajouté à autre fixateurs
Quels sont les désavantages du fixateur éthanol: (3)
- durcit et distortion des tissus
- tendance à dissoudre les lipides
- incompatibilité avec chrome et osmium
Quels sont les avantages du fixateur méthanol: (1)
- préservation de l’ARN
Quels sont les désavantages du fixateur méthanol: (3)
- toxique
- durcit trop
- lipides dissout en partie
Quels sont les avantages du fixateur sulfate de zinc: (4)
- bon détails de la membrane nucléaire et cytoplasmique
- étude immunoenzymatique
- bon pour la coloration trichromiques
- pourrait remplacer le mercure dans certains mélanges
Quels sont les désavantages du fixateur sulfate de zinc: (1)
- dépots et précipités: sels de phosphate si zinc entre en contact avec des phosphates
Quel fixateur est surtout utilis/ en microscopie électronique:
Glutaraldéhyde
Quel fixateur est surtout utilisé avec des méthodes d’immunofluorescences et immunochimie:
Éthanol
Quels sont les ingrédiants dans le mélange fixateur B5:
- chlorure mercurique
- formaldéhyde
- acétate de sodium
Quels sont les ingrédiants dans le mélange fixateur Bouin:
- acide picrique
- formol 40%
- acide acétique glacial
Quels sont les ingrédiants dans le mélange fixateur Gendre:
- acide picrique (sous forme d’alcool 95% saturée avec acide picrique)
- formol 40%
- acide acétique glacial
Quels sont les ingrédiants dans le mélange fixateur Hollande:
- acétate de cuivre
- acide picrique
- formol 40%
- acide acétique glacial
Quels sont les ingrédiants dans le mélange fixateur Zenker:
- bichromate de potassium
- chlorure mercurique
- dans l’eau
- plus acide acétique
Quels sont les ingrédiants dans le mélange fixateur Helly (Zenker-formol):
- bichromate de potassium
- chlorure mercurique
- dans l’eau
- plus fromol 40%
Quels sont les indications du mélange fixateur B5:
Organes hématopoiétiques
Quels sont les indications du mélange fixateur Bouin:
- colorations trichromiques
- tissus délicats
- biopsies gastrointestinales
- système endocrinien
Quels sont les indications du mélange fixateur Gendre:
- glycogène
- hydrates de carbones
Quels sont les indications du mélange fixateur Hollande:
Biopsies du tractus gastrointestinale (mieux que Bouin)
Quels sont les indications du mélange fixateur Zenker:
- Foie
- rate
- tissus de soutient
- noyaux
Quels sont les indications du mélange fixateur Helly:
- glande hypophyse
- organes lymphoides et hématopoiétiques
Quels sont les indications du mélange fixateur Formol-zinc:
Tout les tissus
Quels sont les différents décalcifiants utilisés:
- acide nitrique 5-10%
- acide formique 5-10%
- acide picrique
- résine échangeuse d’ions
- électrolyse
- agents chélateurs
Quels sont les 3 solvants universels:
- dioxyde de diéthylène (Dioxane)
- butanol tertiaire
- tétrahydrofurane ou TFH
Quels sont les désavantages de la paraffine:
- rétraction du tissu de 10%
- ne peut pas utilisé pure
Quels sont les désavantages du carbowax:
Ne peut pas être exposé à l’humidité du tout.
Quels sont les avantages du carbowax:
- peut imprégner directement après la fixation (pas de déshydratation ni d’éclaircissement)
- lipides conservés
Quels sont les adhésifs possibles:
- albumine-glycérol de Mayer
- gélatine
- lames chargés
- colle lepage
Quels sont les désavantages de l’albumine-glycérol de Mayer comme adhésif:
Laisse des traces sur le pourtour des lames si pas bien dosé
Quels sont les désavantages de la gélatine comme adhésif:
- forme une pellicule insoluble
- contamination possible par bactéries
Quels sont les désavantages des lames chargés:
- cout élevé
- date d’expiration
Quels sont les avantages de la colle Lepage comme adhésif:
Pas de faux positifs ni faux négatifs
Quel est l’origine de l’hématoxyline:
Extrait du bois d’un arbre (campêche)
Quels sont les différents hématoxyline aluminiques:
- Harris (en solution alcoolique)
- Mayer (en solution aqueuse)
- Ehrlich
- Delafield (oxydation naturelle)
Quels sont les différents hématoxyline ferriques:
- Weigert (en solution alcoolique)
- Verhoeff (en solution alcoolique)
- Heidenhain
Quel est la couleur des noyaux d’un hématoxyline aluminique:
Bleu
Quel est la couleur des noyaux d’un hématoxyline ferrique:
Noir
Quelle est la couleur de la laque d’un hématoxyline aluminique:
Rouge en milieu acide
Bleu en milieu alcalin
Quelle est la couleur de la laque d’un hématoxyline ferrique:
Noir
Quel est le mordant utilisé dans un hématoxyline aluminique:
Aluminium (toujours incorporé dans le colorant)
Quel est le mordant utilisé dans un hématoxyline ferrique:
Chlorure ferrique (incorporé dans la solution d’hématoxyline avant l’emploi ou faire un bain de mordant et un bain d’hématoxyline)
Quel est l’oxydant utilisé dans un hématoxyline aluminique:
Iodate de sodium
Quel est l’oxydant utilisé dans un hématoxyline ferrique:
Le même que le mordant (chlorure ferrique)
Quel est le mode d’utilisation de l’hématoxyline aluminique:
- Harris: régressif
- Mayer: progressif
Quel est le mode d’utilisation de l’hématoxyline ferrique:
- Weigert: progressif
- Verhoeff: régressif
Quel est le différentiateur dans un hématoxyline aluminique:
Alcool-acide
Quel est le différentiateur dans un hématoxyline ferrique:
- Weigert: alcool-acide
- Verhoeff: le mordant (chlorure ferrique)
Quel est l’utilité de la coloration H&E:
Différence entre le cytoplasme, tissu conjonctif et GR (différent teints de rose).
Quel est l’utilité de la coloration Trichrome de Masson:
Différencier le collagène (bleu) du muscle et cytoplasme (rouge).
Quel est l’utilité de la coloration Weigert Van Gieson:
Différencier le collagène (rouge) du muscle lisse et du cytoplasme (jaune).
Quel est l’utilité de la coloration Hématéine de Verhoeff:
Différencier les fibres élastiques brutes (noir) des autres structures tissulaires (jaune).
Quel est l’utilité de la coloration Fuschine paraldéhyde de Gomori:
Différencier les fines fibres élastiques (élastine) (bleu) des autres structures tissulaires (Vert).
Quel est l’utilité de la coloration Mayer Mucicarmine:
Mise en évidence des mucines épithéliales acides (rose) du reste (bleu ou jaune).
Quel est l’utilité de la coloration Réticuline de Gomori:
Différencier les fibres de réticuline (noir) des autres éléments du tissu (rouge).
Quel est l’utilité de la coloration Warthin-Starry:
Démonstration des spirochètes (noir) dans les tissus sur un fond (jaune).
Quel est l’utilité de la coloration Grocott:
Démonstration des mycoses (noir) dans les tissus sur un fond (vert).
Quel est l’utilité de la coloration APS fungi:
Mise en évidence des champignons (rose) sur un fond (vert).
Quel est l’utilité de la coloration Bleu de Prusse:
Mise en évidence du fer ferrique (Fe+++) dans les tissus.
Quel est l’utilité de la coloration Bleu de Turnbull:
Mise en évidence du fer ferreux (Fe++) dans les tissus.
Quel est l’utilité de la coloration Masson-Fontana:
Démonstration des substances argentaffines (noir).
Quel est l’utilité de la coloration Schmorls:
Mise en évidence des substances réductrices (bleu) présentes dans les tissus.
Quel est l’utilité de la coloration Méthénamine d’argent de Gomori:
Démonstration des urates (noir) dans les tissus sur un fond (vert).
Quel est l’utilité de la coloration Fouchet:
Démonstration de la bilirubine (VERT) dans les tissus sur un fond (jaune).
Quel est l’utilité de la coloration Von Kossa:
démonstration de la présence de calcium (Ca) dans les tissus sur un fond (rouge).
Quel est l’utilité de la coloration Rhodamine:
Démonstration du cuivre (rouge) dans les tissus, surtout dans le foie (maladie de Wilson)
Quel est l’utilité de la coloration Bleu de toluidine:
Démonstration des mastocytes (violet) dans les tissus sur un fond (bleu).