Histotechnologie (RT) Flashcards
Comment peut-on vérifier s’il y a une présence d’eau dans un bain d’alcool:
L’eau devient bleu en ajoutant un peu de sulfate anhydre.
Quelle est la méthode de fixation la plus simple:
Chaleur
Quels sont les propriétés des fixateurs:
- Additif : liaison du fixateur avec les protéines
- Non additif : la molécule perd son lien intime avec l’eau et devient moins réactive
- Coagulant : formation d’un réseau de fibres permettant aux solutions de pénétrer à l’intérieur du tissu
- Non coagulant : formation d’un gel. Il en résulte une mauvaise pénétration du tissu par les solutions et l’infiltration à la paraffine et moins efficace
- Tolérant : le tissu peut demeurer dans le fixateur pendant une longue période de temps sans causer de dommages au tissu
- Non tolérant : le tissu ne peut pas demeurer dans le fixateur plus longtemps que la période recommandé sinon, il y a durcissement excessif du tissu ou rétrécissement du tissu
Vitesse de pénétration des fixateurs, du plus lent au plus vite:
- formaldéhyde
- acide acétique
- chlorure mercurique
- alcool méthylique
- alcool éthylique
- tetroxide d’osmium
- acide picrique
Quel est le meilleur fixateur:
Formol 10%
Quels sont les buts de la fixation;
- préserver le tissu
- prépare les tissus au traitement qui suive (donne une résistance)
Quel est le but de décalcification:
Enlever le calcium des tissus.
Quel est le but de la circulation:
Préparation du tissu fixé afin de pouvoir l’inclure dans un matériau rigide qui permettra d’en faire des coupes observables.
Quel est le but de la déshydratation:
Reltrait de l’eau (et fixateur)
Quel est le but de l’éclaircissement:
Retirer l’agent déshydratant pour le remplacer par l’agent éclaircissant (rend le tissu transparent).
Quel est le but de l’imprégnation:
- retrait complet du xylène et remplacement par la paraffine
- fournir un support interne au tissu
Quel est le but de l’enrobage:
Fournir un support externe pendant et après la coupe au microtome.
Quels sont les différentes dimensions au microtome:
- routine: 4um
- argent: 2um
- rouge congo: 6um
Quel est le but de l’étalement:
Aplanir et étirer le tissu avant de le mettre sur la lame.
Quelle doit être la température d’eau d’étalement:
46-48oC
Particularités à l’étalement pour l’immunohistochimie:
- bain pas plus de 40oC
- pas ajouter d’adhésif
Attention aux adhésifs pour procédés histochimiques:
Pas d’adhésifs protéiques
Attention aux adhésifs pour procédés immunohistochimiques:
Pas d’adhésifs protéiques car on recherche des Ag (protéines)
Attention aux adhésifs pour recherches des glucides:
Pas d’adhésifs à base d’amidon.
Éléments cellulaire du plus au moins dense:
- globule rouge
- muscle
- cytoplasme
- collagène
Types de différentiation:
- différentiation par excès de mordant: par effet de compétition
- différentiation par des acides: bris du lien entre le mordant et du tissu
Attention particulière lors de la coloration APS:
On ne peut pas utiliser de colle à base d’amidon.
Quel est le seul fixateur qui est non additif:
Ethanol
Quel est le seul fixateur qui est intolérant:
Éthanol
Quels sont les avantages du fixateur formaldéhyde: (5)
- moins de rétrécissement
- durcit le plus (sauf acétone et éthanol)
- peu couteux
- versatile au niveau des colorations
- pénètre et s’additionne rapidement
Quels sont les désavantages du fixateur formaldéhyde: (2)
- coloration des éléments non nucléaires
- fixe lentement
Quels sont les avantages du fixateur glutaraldéhyde: (2)
- microscopie électronique
- fixe et pénètre en même temps
Quels sont les désavantages du fixateur du glutaraldéhyde: (3)
- tendance à être intolérant
- instable
- pénètre pas bien
Quels sont les avantages du fixateur acide acétique: (3)
- améliore la coloration des éléments nucléaires
- bon pour les mucines gastriques
- pénètre très vite
Quels sont les désavantages du fixateur acide acétique: (2)
- gonflement des tissus
- globules rouges et hémosidérine lysés donc la technique de Pearl`s est inutile
Quels sont les avantages du fixateur chlorure mercurique: (1)
- colorations plus belles
Quels sont les désavantages du fixateur chlorure mercurique: (5)
- toxique
- lente pénétration
- caude du rétrécissement
- cause du durcissement
- pigment de mercure
Quels sont les avantages du fixateur tetroxyde d’osmium: (1)
- le meilleur pour la fixation des lipides
Quels sont les désavantages du fixateur tetroxyde d’osmium: (2)
- très couteux
- pas bon pour la santé
Quels sont les avantages du fixateur acide picrique; (5)
- fixateur versatile: fixe, mordant, différentie, colore
- le seul fixateur a jouer 4 rôles
- avantageux de colorer les petits morceaux pour les répérer facilement
- décalcifie un peu
- bonne coloration avec des colorants acides et trichromiques
Quels sont les désavantages du fixateur acide picrique (7)
- pas bon pour ADN et ARN
- tendance a rétrécir
- gonfle les globules rouges
- diminue l’hémosidérine
- doit éviter les organes hématopoiétiques
- fixe mal le rein
- pigment d’acide picrique
Quels sont les avantages du fixateur bichromate de potassium: (2)
- peu couteux
- conserve bien les phospholipides
Quels sont les désavantages du fixateur bichromate de potassium: (4)
- ulcération des mains
- destruction des membranes muqueuses
- noircissement des solutions avec le temps
- pigment de chrome
Quels sont les avantages du fixateur éthanol: (2)
- ne laisse pas de trace car il ne s’additionne pas
- augmente la vitesse de pénétration si ajouté à autre fixateurs
Quels sont les désavantages du fixateur éthanol: (3)
- durcit et distortion des tissus
- tendance à dissoudre les lipides
- incompatibilité avec chrome et osmium
Quels sont les avantages du fixateur méthanol: (1)
- préservation de l’ARN
Quels sont les désavantages du fixateur méthanol: (3)
- toxique
- durcit trop
- lipides dissout en partie
Quels sont les avantages du fixateur sulfate de zinc: (4)
- bon détails de la membrane nucléaire et cytoplasmique
- étude immunoenzymatique
- bon pour la coloration trichromiques
- pourrait remplacer le mercure dans certains mélanges
Quels sont les désavantages du fixateur sulfate de zinc: (1)
- dépots et précipités: sels de phosphate si zinc entre en contact avec des phosphates
Quel fixateur est surtout utilis/ en microscopie électronique:
Glutaraldéhyde
Quel fixateur est surtout utilisé avec des méthodes d’immunofluorescences et immunochimie:
Éthanol
Quels sont les ingrédiants dans le mélange fixateur B5:
- chlorure mercurique
- formaldéhyde
- acétate de sodium
Quels sont les ingrédiants dans le mélange fixateur Bouin:
- acide picrique
- formol 40%
- acide acétique glacial
Quels sont les ingrédiants dans le mélange fixateur Gendre:
- acide picrique (sous forme d’alcool 95% saturée avec acide picrique)
- formol 40%
- acide acétique glacial
Quels sont les ingrédiants dans le mélange fixateur Hollande:
- acétate de cuivre
- acide picrique
- formol 40%
- acide acétique glacial
Quels sont les ingrédiants dans le mélange fixateur Zenker:
- bichromate de potassium
- chlorure mercurique
- dans l’eau
- plus acide acétique
Quels sont les ingrédiants dans le mélange fixateur Helly (Zenker-formol):
- bichromate de potassium
- chlorure mercurique
- dans l’eau
- plus fromol 40%
Quels sont les indications du mélange fixateur B5:
Organes hématopoiétiques
Quels sont les indications du mélange fixateur Bouin:
- colorations trichromiques
- tissus délicats
- biopsies gastrointestinales
- système endocrinien
Quels sont les indications du mélange fixateur Gendre:
- glycogène
- hydrates de carbones
Quels sont les indications du mélange fixateur Hollande:
Biopsies du tractus gastrointestinale (mieux que Bouin)
Quels sont les indications du mélange fixateur Zenker:
- Foie
- rate
- tissus de soutient
- noyaux
Quels sont les indications du mélange fixateur Helly:
- glande hypophyse
- organes lymphoides et hématopoiétiques
Quels sont les indications du mélange fixateur Formol-zinc:
Tout les tissus
Quels sont les différents décalcifiants utilisés:
- acide nitrique 5-10%
- acide formique 5-10%
- acide picrique
- résine échangeuse d’ions
- électrolyse
- agents chélateurs
Quels sont les 3 solvants universels:
- dioxyde de diéthylène (Dioxane)
- butanol tertiaire
- tétrahydrofurane ou TFH
Quels sont les désavantages de la paraffine:
- rétraction du tissu de 10%
- ne peut pas utilisé pure
Quels sont les désavantages du carbowax:
Ne peut pas être exposé à l’humidité du tout.
Quels sont les avantages du carbowax:
- peut imprégner directement après la fixation (pas de déshydratation ni d’éclaircissement)
- lipides conservés
Quels sont les adhésifs possibles:
- albumine-glycérol de Mayer
- gélatine
- lames chargés
- colle lepage
Quels sont les désavantages de l’albumine-glycérol de Mayer comme adhésif:
Laisse des traces sur le pourtour des lames si pas bien dosé
Quels sont les désavantages de la gélatine comme adhésif:
- forme une pellicule insoluble
- contamination possible par bactéries
Quels sont les désavantages des lames chargés:
- cout élevé
- date d’expiration
Quels sont les avantages de la colle Lepage comme adhésif:
Pas de faux positifs ni faux négatifs
Quel est l’origine de l’hématoxyline:
Extrait du bois d’un arbre (campêche)
Quels sont les différents hématoxyline aluminiques:
- Harris (en solution alcoolique)
- Mayer (en solution aqueuse)
- Ehrlich
- Delafield (oxydation naturelle)
Quels sont les différents hématoxyline ferriques:
- Weigert (en solution alcoolique)
- Verhoeff (en solution alcoolique)
- Heidenhain
Quel est la couleur des noyaux d’un hématoxyline aluminique:
Bleu
Quel est la couleur des noyaux d’un hématoxyline ferrique:
Noir
Quelle est la couleur de la laque d’un hématoxyline aluminique:
Rouge en milieu acide
Bleu en milieu alcalin
Quelle est la couleur de la laque d’un hématoxyline ferrique:
Noir
Quel est le mordant utilisé dans un hématoxyline aluminique:
Aluminium (toujours incorporé dans le colorant)
Quel est le mordant utilisé dans un hématoxyline ferrique:
Chlorure ferrique (incorporé dans la solution d’hématoxyline avant l’emploi ou faire un bain de mordant et un bain d’hématoxyline)
Quel est l’oxydant utilisé dans un hématoxyline aluminique:
Iodate de sodium
Quel est l’oxydant utilisé dans un hématoxyline ferrique:
Le même que le mordant (chlorure ferrique)
Quel est le mode d’utilisation de l’hématoxyline aluminique:
- Harris: régressif
- Mayer: progressif
Quel est le mode d’utilisation de l’hématoxyline ferrique:
- Weigert: progressif
- Verhoeff: régressif
Quel est le différentiateur dans un hématoxyline aluminique:
Alcool-acide
Quel est le différentiateur dans un hématoxyline ferrique:
- Weigert: alcool-acide
- Verhoeff: le mordant (chlorure ferrique)
Quel est l’utilité de la coloration H&E:
Différence entre le cytoplasme, tissu conjonctif et GR (différent teints de rose).
Quel est l’utilité de la coloration Trichrome de Masson:
Différencier le collagène (bleu) du muscle et cytoplasme (rouge).
Quel est l’utilité de la coloration Weigert Van Gieson:
Différencier le collagène (rouge) du muscle lisse et du cytoplasme (jaune).
Quel est l’utilité de la coloration Hématéine de Verhoeff:
Différencier les fibres élastiques brutes (noir) des autres structures tissulaires (jaune).
Quel est l’utilité de la coloration Fuschine paraldéhyde de Gomori:
Différencier les fines fibres élastiques (élastine) (bleu) des autres structures tissulaires (Vert).
Quel est l’utilité de la coloration Mayer Mucicarmine:
Mise en évidence des mucines épithéliales acides (rose) du reste (bleu ou jaune).
Quel est l’utilité de la coloration Réticuline de Gomori:
Différencier les fibres de réticuline (noir) des autres éléments du tissu (rouge).
Quel est l’utilité de la coloration Warthin-Starry:
Démonstration des spirochètes (noir) dans les tissus sur un fond (jaune).
Quel est l’utilité de la coloration Grocott:
Démonstration des mycoses (noir) dans les tissus sur un fond (vert).
Quel est l’utilité de la coloration APS fungi:
Mise en évidence des champignons (rose) sur un fond (vert).
Quel est l’utilité de la coloration Bleu de Prusse:
Mise en évidence du fer ferrique (Fe+++) dans les tissus.
Quel est l’utilité de la coloration Bleu de Turnbull:
Mise en évidence du fer ferreux (Fe++) dans les tissus.
Quel est l’utilité de la coloration Masson-Fontana:
Démonstration des substances argentaffines (noir).
Quel est l’utilité de la coloration Schmorls:
Mise en évidence des substances réductrices (bleu) présentes dans les tissus.
Quel est l’utilité de la coloration Méthénamine d’argent de Gomori:
Démonstration des urates (noir) dans les tissus sur un fond (vert).
Quel est l’utilité de la coloration Fouchet:
Démonstration de la bilirubine (VERT) dans les tissus sur un fond (jaune).
Quel est l’utilité de la coloration Von Kossa:
démonstration de la présence de calcium (Ca) dans les tissus sur un fond (rouge).
Quel est l’utilité de la coloration Rhodamine:
Démonstration du cuivre (rouge) dans les tissus, surtout dans le foie (maladie de Wilson)
Quel est l’utilité de la coloration Bleu de toluidine:
Démonstration des mastocytes (violet) dans les tissus sur un fond (bleu).
Quels sont les réactifs et leur rôles dans la coloration H&E:
- Hématoxyline de Harris
- alcool-acide: différentiation
- carbonate de lithium 1%: bleuissement
- alcool 95%: solvant de l’éosine
- éosine: contrecolorant
Quel est le mécanisme en cause de la coloration Trichrome de masson:
Histologique
Quels sont les réactifs et leur rôles dans la coloration Trichrome de Masson:
- Acide picrique alcoolique ou Bouin: augmente l’acidophilie
- hématéine Weigert: coloration des noyaux (le chlorure ferrique agit comme mordant)
- Biebrich écarlate-fuschine acide:
- biebrich est plus petit et pourra pénétrer dans les structures acidophiles denses (cytoplasme, GR)
- fuschine acide est plus gros et se fixera sur les structures acidophiles moins denses (muscles et collagène)
- acide phosphomolybdique et acide phosphotungstique
- rôle de différentiateur: vient prendre la place du colorant cytoplasmique dans le tissu par concurrence
- rôle de mordant :permet au bleu d’aniline de se fixer au collagène
- bleu d’aniline: colore le collagène en bleu
- vert lumière: colore le collagène en vert
- acide acétique 1%: enlève le surplus de bleu d’aniline ou vert lumière des structures
Quel est le mécanisme en cause de la coloration Weigert Van Gieson:
Histologique
Quels sont les réactifs et leur rôles dans la coloration Weigert Van Gieson:
- Hématoxyline ferrique: coloration des noyaux résistant à l’acide
- acide picrique: coloration du cytoplasme et muscle
- fuschine acide: coloration du collagène
Quelle est l améthode la plus populaire pour les fibres élastiques:
Hématéine de Verhoeff
Quel est le mécanisme en cause de la coloration Hématéine de Verhoeff:
Histologique
Quels sont les réactifs et leur rôles dans la coloration Hématéine de Verhoeff:
- Hématéine de Verhoeff: coloration des fibres élastiques
- chlorure ferrique: différentiateur (par excès de mordant)
- solution de Van Gieson: contient de l’acide picrique et fuschine acide
- thiosulfate de sodium :pour enlever l’excès d’iode sur les lames
Quel est le mécanisme en cause de la coloration Fuschine paraldéhyde de Gomori:
Histologique
Quels sont les réactifs et leur rôles dans la coloration Fuschine paraldéhyde de Gomori:
- Permanganate de K 1%: intensifie la coloration par oxydation
- acide oxalique 1%: enlever le surplus de permangate de K
- aldéhyde fuschine de Gomori: coloration des fibres élastiques
- vert lumière: contre colorant
Quels sont les désavantages de la coloration APS:
Le glutaraldéhyde donne des faux postiifs.
Quel est le mécanisme en cause de la coloration Mayer mucicarmine:
Histochimique
Quels sont les réactifs et leur rôles dans la coloration Mayer mucicarmine:
- Solution de travail Muci-Carmin: mise en évidence des mucines
- hématoxyline de Weigert: coloration des noyaux
- solution de Métanil jaune 0.25%: contrecolorant
Quel est le mécanisme en cause de la coloration Réticuline de Gomori:
Imprégnation métallique
Quels sont les réactifs et leur rôles dans la coloration Réticuline de Gomori:
- permanganate de K 1%: oxydation
- métabisulfite de K 2% ou acide oxyalique 1%: blanchiement
- chlorure d’ammonium ferrique 2%: sensibilisation
- solution de travail de nitrate d’argent: imprégnation
- formaline 20%: réducteur
- chlorure d’or 0.2%: virage
- métabisulfite de K 2%: arrêt du virage
- thiosulfate de sodium 2%: réduction (fixage)
- nuclear fast red: contrecolorant
Quel est le mécanisme en cause de la coloration Warthin-Starry:
Imprégnation argyrophile
Quels sont les réactifs et leur rôles dans la coloration Warthin-Starry:
- solution de nitrate d’argent: imprégnation (formation de complexes organo-métalliques)
- solution de nitrate d’argent-hydroquinone gélatinisée: Développeur. L’hydroquinon a deux rôles
- agent réducteur: permet à l’argent de se déposer sur les complexes organo-métalliques
- agent de développement: augmente la vitesse de transformation de l’argent ionique en argent métallique et empêche la reconversion
Quel est le mécanisme en cause de la coloration Grocott:
Imprégnation métallique
Quels sont les réactifs et leur rôles dans la coloration Grocott:
- acide chromique 5%: oxydation et production d’aldéhydes
- métabisulfite de sodium 1%: blanchiment, retire l’acide chromique résiduel
- solution de méthénamine d’argent: imprégnation
- chlorure d’or 0.1%: virage
- thiosulfate de sodium 2%: réduction (fixage)
- vert lumière: contrecoloration
Quel est le mécanisme en cause de la coloration APS fungi:
Histochimique
Quel est le mécanisme en cause de la coloration Bleu de Prusse:
Histochimique
Quels sont les réactifs et leur rôles dans la coloration Bleu de Prusse:
- solution de ferrocyanure de K + HCl: le HCl libère le fer de l’hémosidérine
- Kernechtrot: contrecolorant
Quel est le mécanisme en cause de la coloration Bleu de Turnbull:
Histochimique
Quels sont les réactifs et leur rôles dans la coloration Bleu de Turnbull:
- solution de ferricyanure de K + HCl: réagit avec les ions ferreux libres dans le tissu
- Kernechtrot: contrecolorant
Quel est le mécanisme en cause de la coloration Masson-Fontana:
Imprégnation métallique
Quels sont les réactifs et leur rôles dans la coloration Masson-Fontana:
- solution d’argent de Fontana: imprégnation
- chlorure d’or 0.2%: virage
- thiosulfate de sodium 5%: réduction (fixage)
- nuclear fast red ou éosine: contrecolorant
Quel est le mécanisme en cause de la coloration Schmorls:
Histochimiques
Quels sont les réactifs et leur rôles dans la coloration Schmorls:
- solution ferricyanure de potassium et chlorure ferrique: coloration
- Kernechtrot ou éosine: contrecolorant
Quel est le mécanisme en cause de la coloration Méthénamine d’argent de Gomori:
Imprégnation métallique
Quels sont les réactifs et leur rôles dans la coloration Méthénamine d’argent de Gomori:
- méthénamine d’argnet + borax 5%: imprégnation
- thiosulfate de sodium 2%: réduction (fixage)
- vert lumière: contrecoloration
Quel est le mécanisme en cause de la coloration Fouchet:
Histochimique
Quels sont les réactifs et leur rôles dans la coloration Fouchet:
- réactif de Fouchet: oxydation de la bilirubine en biliverdine
- chlorure ferrique 10%
- acide trichloroacétique
- eau distillée
- solution de Van Gieson: contrecolorant
Quel est le mécanisme en cause de la coloration Von Kossa:
Imprégnation métallique argyrophile
Quels sont les réactifs et leur rôles dans la coloration Von Kossa:
- nitrate d’argent 5%: imprégnation métallique
- thiosulfate de sodium: enlève l’argent non réduit
- rouge neutre 1% ou autre: contrecolorant
Quel est le mécanisme en cause de la coloration Rhodamine:
Histochimique
Quels sont les réactifs et leur rôles dans la coloration Rhodamine:
- solution de Rhodamine: mise en évidence du cuivre
- hématoxyline de Mayer: contrecolorant
Quel est le mécanisme en cause de la coloration Bleu de toluidine:
Métachromasie
Quels sont les réactifs et leur rôles dans la coloration Bleu de toluidine:
- solution de bleu de Toluidine: colore tout les éléments
Quel est le mécanisme en cause de la coloration ABC:
Immunohistochimique
Quels sont les réactifs et leur rôles dans la coloration ABC:
- traitement des lames avec H2O2 + méthanol: procédure de blocage no 1. Blocage de l’activité endogène de la peroxydase.
- solution protéique de blocage: procédure du blocage no 2. Blocage des sites chargés pour ne pas que les anticorps s’y fixent.
- anticorps primaire: spécifique à l’antigène recherché
- anticorps secondaire: conjugé à la biotine
- réactif ABC: complexe avidine-biotine couplé a un enzyme (peroxydase)
- DAB: formation d’un complexe coloré
- hématoxyline de Mayer: contrecoloration
Rétrécissement ou gonflement du tissu est quel type d’artéfact:
De fixation
Quelle est la cause de l’artéfact Rétrécissement ou gonflement du tissu:
Lors de l’utilisation d’un fixateur intolérent pendant une période de temps trop longue.
Comment éviter l’artéfact Rétrécissement ou gonflement du tissu:
- ne pas dépasser la période de temps idéale de la fixation
- choisir un fixateur tolérant
- choisir un fixateur composé ayant un ingrédient qui contrecarre l’intolérance
Desquamation est quel type d’artéfact:
De fixation
Cytolyse et autolyse est quel type d’artéfact:
De fixation
Quelle est la cause de l’artéfact Cytolyse et autolyse:
Nécrose du tissu si la fixation a débuté tardivement.
Comment éviter l’artéfact Cytolyse et autolyse:
- plonger le tissu dans le fixateur aussitôt que possible après le prélèvement
- s’assurer que le liquide fixateur est en contact avec toute la surface du tissu
Polarisation du glycogène ou effet de fuite est quel type d’artéfact:
De fixation
Comment éviter l’artéfact Polarisation du glycogène ou effet de fuite:
Utiliser un fixateur adéquat pour le glycogène forsque celui-ci doit être bien préservé.
Fixation par couche est quel type d’artéfact:
De fixation
Quelle est la cause de l’artéfact Fixation par couche:
Ralentissement de la vitesse de pénétration du liquide fixateur dans le tissu, le centre du tissu est donc mal ou pas fixé.
Comment éviter l’artéfact Fixation par couche:
- utiliser un fixateur à pénétration plus rapide
- utiliser des pièces de tissu très mince
Perte de structures ou de détails est quel type d’artéfact:
De fixation
Quelle est la cause de l’artéfact Perte de structures ou de détails:
Fixation trop courte du tissu, les éléments non fixés seront abimés lors de la circulation et lors des manipulations suivantes.
Comment éviter l’artéfact Perte de structures ou de détails:
- allonger la période de fixation en tenant compte de la grosseur du tissu
- s’assurer que le tissu congèle le plus rapidement possible car une congélation trop lente cause la formation de cristaux de glace
Quelle est la cause de l’artéfact Pigment de formol:
L’acide formique non tamponné + hémoglobine
Comment éviter l’artéfact Pigment de formol:
Utiliser du formaldéhyde tamponné.
Comment se débarasser de l’artéfact Pigment de formol:
Laver la lame dans une solution alcoolique saturée d’acide picrique.
Comment éviter l’artéfact Pigment de mercure:
Éviter les fixateurs ayant du mercure.
Comment se débarasser de l’artéfact Pigment de mercure:
Iode alcoolique (enleveur) + thiosulfate de sodium (enlève l’iode).
Quelle est la cause de l’artéfact Pigment de chrome:
Chrome + alcool (du bain) donne un oxyde insoluble.
Comment éviter l’artéfact Pigment d’acide picrique:
Éviter l’utilisation de l’acide picrique.
Comment se débarasser de l’artéfact Pigment d’acide picrique:
- blanchissement du tissu avec du thiosulfate de sodium 2.5%
- blanchissement du tissu avec du carbonate de lithium 1%
Quelle est la cause de l’artéfact Pigment de carbone:
Retrouvé dans les poumons des citadins ou causé par des tattoo.
Précipité dans la chambre et les tubulures du circulateur est quel type d’artéfact:
Circulation
Quelle est la cause de l’artéfact Précipité dans la chambre et les tubulures du circulateur:
- utilisation de formol-zinc ou formol tamponné avec phosphate et déshydratation débutée avec alcool plus de 70%
- pH formol-zinc plus de 7
Comment éviter l’artéfact Précipité dans la chambre et les tubulures du circulateur:
- débuter la déshydratation avec alcool 70%
- pH formol-zinc doit demeurer sous 7
Comment se débarasser de l’artéfact Précipité dans la chambre et les tubulures du circulateur:
Retrait du précipité en rincant la chambre et tubulures avec acide acétique 5%.
Déshydratation excessive est quel type d’artéfact:
Circulation
Quelle est la descritpion de l’artéfact Déshydratation excessive:
Sous forme de microchatter sur les bords du tissu.
Quelle est la cause de l’artéfact Déshydratation excessive:
Trop longtemps dans les bains de déshydratations.
Comment éviter l’artéfact Déshydratation excessive:
- circuler la biopsie séparément
- diminuer le temps de déshydratation
Circulation inadéquate est quel type d’artéfact:
Circulation
Quelle est la descritpion de l’artéfact Circulation inadéquate:
Coloration nucléaire pauvre ou absence de coloration de certains noyaux.
Quelle est la cause de l’artéfact Circulation inadéquate:
- reste de l’eau dans les tissus quand il va dans l’éclarcissement
- présence d’agent éclaircissement dans la paraffine (odeur xylène)
- utilisation trop de chaleur pendant le cycle
- problèmes mécaniques avec le circulateur
Comment éviter l’artéfact Circulation inadéquate:
- s’assurer d’aucune condensation dans le circulateur
- s’assurer que l’alcool du dernier bain est 100% pur
- s’assurer qu’il n’y a pas de problèmes mécaniques
- s’assurer d’une cédule adéquate
- chaleur seulement pour la paraffine
Artéfact d’éponge est quel type d’artéfact:
Circulation
Quelle est la cause de l’artéfact Artéfact d’éponge:
Utilisation des éponges donc trop de pression sur le tissu.
Comment éviter l’artéfact d’éponge:
S’assurer de tremper les éponges dans le fixateur avant de mettre le fragment.
Dessiccation accidentel du tissu est quel type d’artéfact:
Circulation
Quelle est la cause de l’artéfact Dessiccation accidentel du tissu:
Tissu laissé à l’air libre pendant la circulation.
Comment se débarasser de l’artéfact Dessication accidentel du tissu:
- enlever le plus de paraffine possible
- placer le tissu dans une solution réhydratante: eau, carbonate sodium aqueux
Tissu d’apparence molle est quel type d’artéfact:
Enrobage
Quelle est la cause de l’artéfact Tissu d’apparence molle:
- sections trop épaisses à la salle de coupe
- compression entre le dessus et dessous de la cassette, les liquides ne pénètrent pas tout le tissu
Comment éviter l’artéfact Tissu d’apparence molle:
- s’assurer que le tissu est coupé mince à la salle de coupe
- s’assurer que le tissu est bien fixé
- s’assurer qu’il n’y a pas de problème mécanique avec le circulateur
Comment se débarasser de l’artéfact Tissu d’apparence molle:
- fondre paraffine
- mettre tissu dans circulateur
- démarrer procédure de nettoyage du circulateur
- passer manuellement dans alcool 95 et 70%
- mettre dans formol
- circuler avec prochaine batch
Trous dans la section est quel type d’artéfact:
Microtomie
Quelle est la cause de l’artéfact Trous dans la section:
- attaque du bloc trop aggressive
- déshydratation excessive
- air restant dans le tissu lors de l’imprégnation
- imprégnation incomplète du tissu ou circulation
Comment éviter l’artéfact Trous dans la section:
- attaquer le bloc plus doucement lors du rabotage
- tremper le bloc brièvement dans un bain d’eau glacé
- ré-imprégner le tissu
- ré-imprégner ou re-circuler si le problème est trop sérieux
Il ne se forme pas de ruban est quel type d’artéfact:
Microtomie
Quelle est la cause de l’artéfact Il ne se forme pas de ruban:
- couteau émoussé
- paraffine trop dure
- angle de dégagement trop grand
- température de la pièce trop basse
- débris sur le couteau
Comment éviter l’artéfact Il ne se forme pas de ruban:
- déplacer ou changer le couteau
- ré-inclure dans une paraffine ayant un point de fusion plus bas
- ajuster l’angle de dégagement
- ajuster la température de la pièce
- nettoyer la lame avec un peu de xylène ou autre produit
Les sections adhèrent au bloc lors de la remontée du bloc est quel type d’artéfact:
Microtomie
Quelle est la cause de l’artéfact Les sections adhèrent au bloc lors de la remontée du bloc.
- couteau émoussé
- angle de dégagement trop faible
- température de la pièce trop élevée
- paraffine trop molle
Comment éviter l’artéfact Les sections adhèrent au bloc lors de la remontée du bloc:
- déplacer ou changer le couteau
- augmenter l’angle de dégagement
- ajuster la température de la pièce
- utiliser une paraffine plus dure
Présence d’ondulations sur la coupe est quel type d’artéfact:
Microtomie
Quelle est la cause de l’artéfact Présence d’ondulations sur la coupe:
- couteau ou bloc pas serré
- pièces du microtome trop usées
- manche du microtome sortie à son maximum
- angle de dégagement trop grand
Comment éviter l’artéfact présence d’ondulations sur la coupe:
- serrer le bloc ou la lame
- changer les pièces usées
- rentrer la manche du microtome
- réduire l’angle de dégagement
Chatter microscopique est quel type d’artéfact:
Microtomie
Quelle est la cause de l’artéfact Chatter microscopique:
- tissus trop déshydraté
- manque d’humidité dans le tissu
- couteau émoussé
- angle de dégagement trop grand
- coupe trop rapide
Comment éviter l’artéfact Chatter microscopique:
- vérifier la cédule de l’appareil à circulation
- rétablir l’humidité du tissu en exposant la surface du bloc par rabotage et en le mettant sur une surface d’eau glacée
- changer le couteau
- réduire l’angle de dégagement
- réduire la vitesse de coupe
Les sections alternent entre épaisses et minces, course à vide est quel type d’artéfact:
Microtomie
Quelle est la cause de l’artéfact Les sections alternent entre épaisses et minces, course à vide:
- angle de dégagement trop petit
- défaut dans le mécanisme du microtome
Comment éviter l’artéfact Les sections alternent entre épaisses et minces, course à vide:
- augmenter légèrement l’angle de dégagement
- vérifier le fonctionnement du mécanisme
Les sections sont excessivement comprimées: est quel type d’artéfact:
Microtomie
Quelle est la cause de l’artéfact Les sections sont excessivement comprimées:
- couteau émoussé
- couteau avec débris de paraffine
- paraffine derrière le couteau ou le porte-couteau
- angle de dégagement trop faible
- coupe trop rapide
- température ambiante trop élevée
Comment éviter l’artéfact Les sections sont excessivement comprimés:
- déplacer ou changer le couteau
- nettoyer le couteau
- nettoyer le tout
- augmenter l’angle de dégagement
- plus lentement
- diminuer la température
Présence de stries: est quel type d’artéfact:
Microtomie
Quelle est la cause de l’artéfact Présence de stries:
- couteau encoché à un endroit
- particules dures dans le tissu ou dans la paraffine
Comment éviter l’artéfact Présence de stries:
- déplacer ou changer le couteau
- décalcifier pour retirer le calcium du tissu
Les sections s’envolent et se collent aux objets ou aux autres parties du microtome est quel type d’artéfact:
Microtomie
Quelle est la cause de l’artéfact Les sections s’envolent et se collent aux objets ou aux autres parties du microtome:
Électricité statique
Comment éviter l’artéfact Les sections s’envolent et se colletn aux objets ou aux autres parties du microtome:
- humidifier l’air en soufflant sur le bloc et sur le couteau lors de la coupe
- faire bouillir de l’eau près du microtome
- mise à terre du microtome
- ioniser l’air
Les sections s’enroulent au lieu de rester à plat sur le couteau est quel type d’artéfact:
Microtomie
Quelle est la cause de l’artéfact Les sections s’enroulent au lieu de rester à plat sur le couteau:
- couteau émoussé
- angle de dégagement trop grand
- épaisseur des sections trop grande pour le type de paraffine
Comment éviter l’artéfact Les sections s’enroulent au lieu de rester à plat sur le couteau:
- déplacer ou changer le couteau
- réduire l’inclinaison du couteau si l’angle de dégagement est excessif
- réduire l’épaisseur des sections
Déparaffinage non complété est quel type d’artéfact:
Coloration H&E
Quelle est la descritpion de l’artéfact Déparaffinage non complété
Des taches ou zones blanches peuvent être observés.
Quelle est la cause de l’artéfact Déparaffinage non complété:
- eau ayant resté dans le tissu par un séchage incomplet
- eau ayant resté dans le tissu par un séjour trop court dans les bains de xylène lors du déparaffinage
Comment éviter l’artéfact Déparaffinage non complété:
- bien assécher les sections avant le déparaffinage
- laissser suffisamment longtemps dans le xylène lors du déparaffinage
- éviter l’utilisation du xylène contaminé
Comment se débarasser de l’artéfact Déparaffinage non complété:
- traiter les sections avec alcool absolue pour retirer l’eau et traiter de nouveau au xylène pour reitrer la paraffine
- si les coupes on été colorés, traiter et recolorer
Le manque de détails nucléaires est quel type d’artéfact:
Coloration H&E
Quelle est la descritpion de l’artéfact Manque de détails nucléaires:
Pratiquement impossible d’observer les différentes motifs de la chromatine dans le noyau.
Quelle est la cause de l’artéfact Manque de détails nucléaires:
- une fixation incomplète est la cause principale
- une chaleur excessive lors de la circulation des tissus ou lors du séchage des coupes
Comment éviter l’artéfact Manque de détails nucléaires:
- fixer les tissus complètement
- déshydratation et éclaircissement complète du tissu avant imprégnation
- chaleur seulement pour paraffine
- ne pas laisser le tissu dans la paraffine fondue pour une période de temps prolongée
- assécher les coupes à une tepérature convenable
Noyaux colorés trop pâle est quel type d’artéfact:
Coloration H&E
Quelle est la cause de l’artéfact Noyaux colorés trop pâle:
- un séjour trop court dans la solution d’hématoxyline
- utiliser une solution d’hématoxyline suroxydée ou expiré
- trop de différentiation de l’hématoxyline
- dans une section d’os peut être le résultat d’un décalcification excessive
Comment éviter l’artéfact Noyaux colorés trop pâle:
- laisser les coupes suffisament longtemps dans l’hématoxyline
- attention à la suroxydation ou l’expiration de l’hématoxyline
- respecter le temps de différentiation des noyaux
Comment se débarasser de l’artéfact Noyaux colorés trop pâle:
- si le tissu a été fixé avec un fixateur très acide, trop décalcifié ou trop longtemps dans le fixateur, on peut augmenter le séjour dans l’hématoxyline
- recolorer les coupes après avoir identifié le problème
Noyaux colorés trop foncé est quel type d’artéfact:
H&E
Quelle est la cause de l’artéfact Noyaux colorés trop foncés
- séjour trop long dans la solution d’hématoxyline
- sections trop épaisses
- différentiation de l’héamtoxyline insuffisante
Comment éviter l’artéfact Noyaux colorés trop foncé:
- s’assurer de la bonne épaisseur de la section
- s’assurer du bon temps dans l’hématoxyline
- s’assurer du bon temps de différentiation
Comment se débarasser de l’artéfact Noyaux colorés trop foncé:
Si la section n’est pas trop épaisse, décolorer et recolorer en s’assurant ou ajustant les temps dans l’hématoxyline et de différentiation.
Noyau de couleur rouge ou rouge-brun est quel type d’artéfact:
Coloration H&E
Quelle est la cause de l’artéfact Noyau de couleur rouge ou rouge-brun:
- la solution d’hématoxyline est sur le point de ne plus être bonne
- l’étape de bleuissement des noyaux n’a pas été effectuée correctement
Comment éviter l’artéfact Noyau de couleur rouge ou rouge-brun:
S’assurer d’un bon bleuissement des noyaux.
Cytoplasme coloré trop pâle est quel type d’artéfact:
Coloration H&E
Quelle est la cause de l’artéfact Cytoplasme coloré trop pâle:
- augmentation du pH de l’éosine au-dessus de 5
- contamination par l’agent de bleuissement
- éosine qui n’a pas été acidifié
- section trop mince
- séjour trop long dans l’alcool dilué suivant l’éosine
Comment éviter l’artéfact Ctyoplasme coloré trop pâle:
- rincer les coupes après l’agent de bleuissement
- acidifier l’éosine
- s’assurer d’une bonne épaisseur des coupes
- s’assurer que le séjour dans les alcools à basse concentration suivant l’éosine ne soit pas trop long. PLus il y a d’eau dans ces solutions d’alcool, plus il y aura d’éosine enlevé
Comment se débarasser de l’artéfact Cytoplasme coloré trop pâle:
Décolorer les coupes et recolorer en y apportant les corrections.
Éosine incorrectement différencié est quel type d’artéfact:
Coloration H&E
Quelle est la descritpion de l’artéfact Éosine incorrectement différencié:
Trois teintes de rose non apparentes.
Quelle est la cause de l’artéfact Éosine incorrectement différencié:
- mauvaise fixation
- déshydratation et éclaicissement inadéquat
- différenciation de l’éosine inadéquat
- pas un bon pH de l’éosine
Comment éviter l’artéfact Éosine incorrectement différencié:
- s’assurer que la fixation est adéquate et complète
- s’assurer que la déshydratation et éclaircissement sont adéquats lors de la circulation
- séjour adéquat dans le différentiateur
- le pH de l’éosine est adéquat
Comment se débarasser de l’artéfact Éosine incorrectement différencié:
Décolorer et recolorer si possible.
Précipités bleu noir sur les sections est quel type d’artéfact:
Coloration H&E
Quelle est la cause de l’artéfact Précipités bleu noir sur les sections:
La mince couche métallique qui se développe sur la plupart des hématoxyline a été ramassée par la lame lors de la coloration.
Comment éviter l’artéfact Précippités bleu noir sur les sections:
Filtrer l’hématoxyline tous les jours avant l’utilisation.
Eau et coupes d’aspect brumeux ou laiteux est quel type d’artéfact:
Coloration H&E
Quelle est la cause de l’artéfact Eau et coupes d’aspect brumeux ou laiteux:
Présence de xylène sur les coupes et dans le bain d’eau.
Comment éviter l’artéfact Eau et coupes d’aspect brumeux ou laiteux:
Bonne rotation des bains d’alcool.
Comment se débarasser de l’artéfact Eau et coupes d’aspect brumeux ou laiteux:
Remonter les étapes en changeant les bains d’alcool et en reprenant les étapes des bains d’alcool jusqu’au bain d’eau.
Coloration H&E irrégulière est quel type d’artéfact:
Coloration H&E
Quelle est la cause de l’artéfact Coloration H&E irrégulière:
- présence d’eau ou de liquide fixateur dans la paraffine lors de l’imprégnation
- contamination des réactifs dans un appariel à circulation du type fermée
- absorption d’eau présente dans l’atmosphère par les alcools servant à la déshydratation dans le cas d’un appareil à circulation du type ouvert
- si le niveau des solutions ne parvient pas à recouvrir toute la surface de la lame
Comment éviter l’artéfact Coloration H&E irrégulière:
Utiliser le toluène au lieu du xylène dans les zones où le taux d’humidité est élevé dans les appareils à circulation de type ouvert.