HC.6 - Het gebruik van viro-immunotherapie voor behandeling van pancreas tumoren

Question 1

Wat is een oncogeen en een oncolytisch virus?

Answer 1

Oncogeen: veroorzaakt kanker
Oncolytisch: doodt kankercellen

Question 2

Voor welke kanker worden oncologische virussen gebruik?

Answer 2

Pancreas andenocarcinoom

Question 3

Wat is de incidentie en sterfte van pancreas carcinoom? Wat is de enige behandeloptie?

Answer 3

Incidentie: bijna 3000 per jaar
Sterfte: meeste < 70 dagen na diagnose (sowieso < 5 jaar bijna allemaal)

Operatie is de enige optie

Question 4

Wat is een belangrijk kenmerk van kankercellen dat zij hebben verloren? Waarom?

Answer 4

Anti-virale immuniteit: om ongecontroleerd te profileren zonder dat het immuunsysteem het kan opruimen/vechten

Normale cellen hebben dit wel nog –> voorkomen dat virus vermeerderd

Question 5

Wat is een virus? Hoe veel virussen zijn er?

Answer 5

Bolletje eiwitten met binnenin genetisch materiaal
Duizenden virus om ons heen  klein % veroorzaakt ziekte (nog minder ernstige ziekte)

Question 6

Wat zijn de 2 fases van een aanval van een virus op een kankercel?

Answer 6

Fase 1: oncolytisch effect –> tumorcel wordt geïnfecteerd waardoor hij openbarst

Fase 2: induceren anti-tumor immuunrespons
tumorantigenen komen vrij waardoor eigen immuunsysteem wordt geactiveerd –> tumorcellen worden aangevallen –> T-cellen signaleren dit en gaan ook de andere tumorcellen doden

Question 7

Welke twee soorten oncolytische virussen zijn er?

Answer 7

• natuurlijke
• gemodificeerde

Question 8

Welke twee eigenschappen moet een oncolytisch virus bevatten?

Answer 8

1. specifieke targeting van kankercellen
   - via celoppervlak, receptoren, promotoren
   - verschil in genexpressie (gevoeligheid)
   - bvb aangeboren afweer (inname immunity)
2. Anti-tumor effect
   - directe oncolyse
   - niet specifieke immuunstimulatie
   - aantrekken cytotoxische T-cellen

Question 9

Wat zijn belangrijke eigenschappen die het oncolytische virus moet bevatten voor de veiligheid van de patient?

Answer 9

1. Veroorzaakt acute infectie –> lichaam kan zelf opruimen (vaak <1 week) –> geen chronisch virus gebruiken (dat hele leven blijft)
2. Er moet GEEN vaccin of anti-virale therapie nodig zijn om het op te ruimen (lichaam moet het zelf kunnen)
3. Het virus moet NIET inbouwen in het genoom van de gastheer
4. Het virus moet NIET kunnen muteren naar gevaarlijke varianten

Question 10

Welke drie virussen moeten absoluut niet gebruikt worden? Waarom niet?

Answer 10

• ebola
• HIV
• hepatitis

Zijn te ziek makend en incorporatie in genoom

Question 11

Welke virussen worden gebruikt?

Answer 11

adenovirussen het meest

Natuurlijk voorkomend:
- paramyoxovirussen (NDV, mazelen)
- reovirus
- influenza virus
- VSV (vestibulair stomatitis virus)
- vaccinia virus
- myxoma virus
- parvovirus

Genetisch gemodificeerd
- herpesvirus
- adenovirus
- influenza virus
- paramyoxovirussen (NDV, mazelen)
- alpha virus
- coxsackie virus
- picornavirus

Question 12

Wat zijn vier eisen voor het virus? Wat is geen eis?

Answer 12

Eisen - veiligheid
1. veilig voor patient = niet ziekteverwekkend
2. Veilig voor omgeving patient (mens en dier)

Eisen - effectiviteit
3. veroorzaakt oncolyse van tumorcellen
4. induceert of verhoogd anti-tumor immuunrespons van de host

Niet inbouwen in genoom is GEEN eis maar een eigenschap!!

Question 13

Naar welke drie dingen doet men onderzoek voorr veiligheid en effectiviteit?

Answer 13

1. attenuatie
2. Versterking virulentie
3. Arming

Question 14

Wat is attenuatie?

Answer 14

= minder bijwerkingen –> veiligheid
- natuurlijk ge-attenueerde stammen: minder pathogeen –> vaccin stammen
- Virussen met andere host range = veroorzaken geen ziekte in de mens bvb animale virussen
CAVE: moet veilig zijn voor mens EN dier (omgeving patient)

Question 15

Wat is versterking van de virulentie?

Answer 15

= hogere effectiviteit
- meer tumoragressie
- virus ongevoelig maken voor de humane immuun respons

Question 16

Wat is arming?

Answer 16

= hogere effectiviteit EN veiligheid
- inbouwen immuun modulerende genen zoals IL-2, interferon, checkpoint inhibitors –> extra immuunrespons opwerken
- Inbouwen cancer markers: specifieke targetingmogelijkheden voor tumoren

Question 17

Noem een voorbeeld van een virus dat gebruikt wordt

Answer 17

Newcastle disease virus = NDV
= pseudovogelpestvirus (geen vogelpest)

Question 18

Wat zijn kenmerken van NDV?

Answer 18

• RNA virus
• bindt aan suikermoleculen op elke cel (sialic acid)
• induceert celdood van geïnfecteerde cellen
• veroorzaakt geen ernstige ziekte in mens (CAVE potentieel wel in vogels)
• stammen verschillen in virulentie (laag, middel, hoog) = afhankelijk van de knipsite van het fusie-eiwit (cleavage site: sequentie op dat stukje)
• specificiteit voor kanker gebaseerd op verschillen in innate immunity tussen kankercellen en normale cellen

Niet virulent = monobasic
virulent = multibasic

Question 19

Noem drie voordelen en twee nadelen van NDV?

Answer 19

Voordelen
1. Animaal virus: veilig voor patient
2. Eenvoudig genetisch modificeerbaar
3. Effectiviteit bewezen in verschillende clinical trials (met vaccin stammen)

Nadelen
1. tot nu toe en lage effectiviteit (moet nog verhoogd worden)
2. Virus is potentieel niet veilig voor omgeving

Question 20

Waarmee wordt gekeken naar de veiligheid voor de omgeving?

Answer 20

ERA = environmental risk assessment
pathogeniteit voor mammals en vogels (oa uitscheiding van virus)

Question 21

Hoe wordt de effectiviteit onderzocht? Wie schrijft het protocol?

Answer 21

eerst in vitro voor oncolyse

Dan in vivo voor oncolyse en anti-tumor immuunrespons

CCMO schrijft protocol

Question 22

Wat is de hypothese over de werkzaamheid bij pancreas carcinoom?

Answer 22

Hoe hoger virulentie hoe hoger oncolytisch effect

Question 23

Wat doen we om de virulentie te verhogen?

Answer 23

Knip site eiwit veranderen op multibasic cleavage site waardoor virulenter MAAR ook hoger veiligheidsrisico
Of fusie eiwit: monobasic naar multibasic maken

Question 24

Hoe kunnen we het virus veranderen buiten het virulenter maken?

Answer 24

• stimulatie anti-tumor immuun respons (interferon)
• blokken antivirale immuniteit host (eiwit van flu (SN1)
  Door inbouwen immuun modulerende genen

Question 25

Als we onderzoek doen naar een oncolytisch virus in muizen kan er over een van de aanpassingen aan het virus wel iets gezegd worden en over een niet. Welke zijn dat en waarom?

Answer 25

WEL; oncolytisch effect van het virus dus de virulentie

NIET: immuunmodulerende genen omdat geen immuuncompetente muizen kunnen zijn

Question 26

Hoe kan de veilgheid van de omgeving worden verbeterd?

Answer 26

• V-eiwit: hierdoor omzeilt het het innate immuunsysteem van het dier
• bij mens heeft het V-eiwit eigenlijk geen effect (op het IS)
• genetische modificatie: verwijderen van V-eiwit uit het virus maakt het gevoeliger voor het IS van vogels –> hierdoor niet meer dodelijk voor vogels en dus veiliger voor de omgeving MAAR hierdoor weer minder oncolytisch

Question 27

Hoe kunnen we de effectiviteit verbeteren?

Answer 27

Inbouwen immuun regulerende genen die anti-tumor immuniteit stimuleren
CM-CSF
anti-checkpoint remmers

Question 28

Wat is geen argument hierin?

Answer 28

prijs