Generalidades Flashcards
Para que se realiza la prueba directa de antiglobulina humana?
Detecta glóbulos rojos sensibilizados con anticuerpos.
Para estudio de anticuerpos cuando el autocontrol da positivo, estudio de AHAI, de rx post transfusional y EHRN
Cual es la sensibilidad de la prueba directa antiglobulina humana?
Detecta sensibilización del GR cuando tiene 120-500 moléculas de anticuerpo por GR, o 400-1000 moléculas de complemento por GR
Cual es el fundamento del reactivo de antiglobulina humana?
El reactivo es capaz de detectar anticuerpos no aglutinantes o incompletos; al unirse a la región Fc de la IgG que recubre GR sensibilizados, el reactivo Coombs permite evidenciar la aglutinación de los GR
Causas de resultado positivo en Coombs directo:
Adsorción inespecifica de proteínas
Fármacos que alteren la membrana del GR
Inmunocomplejos
Transferencia pasiva de Acs (en transfusiones de plasma)
Contaminantes en los tubos
Causas de resultado negativo en Coombs directo:
Niveles bajos de anticuerpos
Sensibilización por IgAs o IgMs
Autoanticuerpo de baja afinidad, se separan del GR rápidamente
Para que se realiza la prueba indirecta antiglobulina humana?
Estudio de Acs irregulares, deteccion e identificación
Pruebas cruzadas pretransfusionales
Estudios de Acs post elución y adsorción
Estudio de ciertos fenotipos (Kell, Duffy, Kidd, Rh débil)
Qué me puede causar un resultado falso negativo en el Coombs indirecto?
Fallos en los lavados, al no lavar bien, el reactivo puede rx con proteínas solubles y neutralizarse
Contaminación del reactivo con proteínas q lo neutralicen
Exceso de paraproteinas IgG, en pac con mieloma
Congelación del reactivo: lo deteriora
Lectura tardía de la rx: disociación de los Acs
Pérdida de los Ags en cel evaluadoras
Causas de resultado falso positivo en Coombs indirecto:
Aglutininas potentes en el suero: ya está aglutinado antes de hacer el Coombs indirecto
Contaminantes en el tubo, fibrina
Sobrecentrifugación.
Centrifugación con un potenciador como el polietilenglicol
Células Coombs directo positivo: si las células que se usan para detectar los Acs ya están positivas
Complemento: la activación del complemento ocurre x coagulación de la sangre o x utilización de anticoagulante como el CPDA-1.
Muestras obtenidas de vías con infusión de suero dextrosa: dextrosa activa el C’
Que usos tienen las técnicas enzimáticas en el tx de GR?
Se utilizan para rastreos de anticuerpos, e identificación especialmente cuando hay más de 1 Ac.
Qué enzimas utilizan los métodos enzimáticos y qué efectos pueden tener?
Todas son proteasas.
Bromelina, ficina, papaina: ruptura de enlaces peptidicos de amplio espectro.
Tripsina y quimotripsina: más específicas.
Al romper glicoproteinas se logra: que las glicoprot q son hidrofilicas tengan q “compartir” las moléculas de agua, permitiendo que se acerquen; que si la molécula era grande, se achique y se reduce el impedimento estérico para q los Acs accedan a los Ags.
Neuraminidasa: elimina residuos de ácido sialico, disminuyendo las cargas neg en la supf del GR, pero expone criptoAgs que activan linfos T.
Que es hemolisis intravascular y extravascular?
Intravascular: hay destruccion de GR mientras circulan en sangre periférica por activación del complemento. Esto lleva a liberación de hemoglobina y hemoglobinuria, con consecuente daño renal, la orina y el plasma son de color rojo-marrón, Haptoglobinas aparece disminuido, LDH elevado. Los Acs más comunes que causan esto: anti-A y anti-B IgMs. Se liberan anafilotixinas C3a y C5a por la activación del C’.
Extravascular: hay destruccion de GR en hígado o bazo, quienes reconocen anormalidades en el GR (cubiertos por Ig o C’) y son capturados x los macrofagos. Puede cursar con bilirrubinas elevadas, reticulocitos altos, Coombs directo positivo. Usualmente se asocia a Acs IgG, ya que no activan el complemento.
Qué ocurre durante una rx hemolitica post transfusional?
Ocurre destrucción de glóbulos rojos, ya sea aguda (inmediata) o retardada (hasta 14 días después). La hemólisis puede ser intra o extra vascular, según el Ac implicado. Si es un IgM, se activa el C’ y se da hemólisis intravascular. Si es un IgG, no activa el C’ y los GR son destruidos por macrofagos en bazo o hígado, quienes reconocen la porción Fc de los IgG unidos a los GR y también reconocen el C3c.
Cuáles son los principales Acs asociados a la EHRN?
Los IgG son los principales causantes de hemólisis severa en el feto y neonato, ya que cruzan la barrera placentaria, mientras q los IgM no. Los IgG contra D, c y K son los mas severos.
Que es el potencial Z en los GR?
Los GR tienen carga negativa en la memb x las sialoglicoproteinas. En suspensión con salina, se rodean de iones Na+ que hace que se repelan entre sí. El potencial Z es la diferencia de potencial eléctrico entre las cargas neg del GR y los iones positivos en el medio. La aglutinación ocurre cuando la distancia entre GRs se disminuye al mínimo; hay una lucha entre fuerzas de cohesión que tiende a agregarlos, y fuerzas de repulsión. Si no hay aglutinantes en el medio, predomina la fuerza de repulsión y los GRs se mantienen en suspensión.
Si se reduce la carga eléctrica de los GRs (con ez q cortan las prot x ej) se reduce el potencial Z, al haber menos cargas neg habrá menos iones Na+ alrededor.
También al añadir macromoléculas como albumina o PEG disminuye el potencial Z, estas tienen un extremo neg y uno positivo q interactúan con las prot del GR, neutralizándolos y dispersando la nube de iones Na+.
Y finalmente si hay exceso de proteínas en el medio (como en mieloma), aumenta la constante dielectrica hasta el punto de alcanzar el potencial Z crítico y ocurre aglutinación espontánea aunque no haya Acs.
