F1: Aminosyrer, primærstruktur og analyse af primærstruktur Flashcards

1
Q

Find et stykke papir. Tegn de 20 aminosyrer og skriv deres trebogstavs- og enbogstavsforkortelser:
Glycin, alanin, valin, leucin, isoleucin, phenylalanin, tyrosin, prolin, histidin, glutamin, asparagin, glutamat, aspartat, tryptofan, serin, cystein, lysin, arginin, methionin, threonin.

A

Se s. 77+79 i Lehninger

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
2
Q

Hvad er pKr for Tyr?

A

Tyr: 10,07

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
3
Q

Hvad er pKr for Cys?

A

Cys: 8,18

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
4
Q

Hvad er pKr for Lys?

A

Lys: 10,53

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
5
Q

Hvad er pKr for His?

A

His: 6,00

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
6
Q

Hvad er pKr for Arg?

A

Arg: 12,48

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
7
Q

Hvad er pKr for Asp?

A

Asp: 3,65

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
8
Q

Hvad er pKr for Glu?

A

Glu: 4,25

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
9
Q

Ved hvilken bølgelængde absorberer tryptofan UV-stråling?

A

Ca. 280 nm

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
10
Q

Hvordan ser Lambert-Beers lov ud?

A

log(I_0/I) = Ecl

log(I_/I) kaldes af og til absorbansen A

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
11
Q

Hvilke atypiske aminosyrer findes i collagen?

A

4-hydroxyprolin og 5-hydroxylysin

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
12
Q

Hvad er pKa-intervallet for aminosyrers carboxylgruppe og aminogruppe?

A
  • COOH: 1,8-2,4

- NH3+: 8,8-11,0

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
13
Q

Hvordan kan man undersøge proteiners aminosyresekvens med enzymer?

A

Man kan kløve med fx trypsin og chymotrypsin (hver for sig) og sekvensere fragmenterne og sammenholde resultaterne.

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
14
Q

Hvad er Edman-degration?

A

Fraspaltning af N-terminus fra resten af peptidet med phenylisothiocyanat, så aminosyren kan undersøges.

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
15
Q

Nævn et stof, der kan bruges til at bryde disulfidbroer på

A

Man kan reducere med DTT (dithiothreitol) eller oxidere med performic acid

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
16
Q

Nævn 5 vigtige karakteristika ved peptidbindingen

A

1: Der er delvis dobbeltbindingskarakter pga. resonans => ikke fri rotation
2: Den er plan
3: Trans-konfigurationen foretrækkes (ikke for prolin)
4: Der er rotation om de andre bindinger end selve peptidbindingen (C og N), dvs. bindingen mellem C-alfa og N samt C-alfa og C
5: Peptidbindingen er termodynamisk ustabil men fysiologisk stabil, da nedbrydelsen af peptidbindingen går meget langsomt

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
17
Q

Hvad er phi-bindingen?

A

Bindingen mellem C-alfa og N

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
18
Q

Hvad er psi-bindingen?

A

Bindingen mellem C-alfa og C

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
19
Q

Hvad er en rotamer?

A

Sidekædekonformationer med lav energi

20
Q

Hvor findes ladede rester?

A

Findes normalt på proteinoverfladen, hvor de vekselvirker
med vand og andre biologiske molekyler. Vigtige for genkendelse af modsat ladede grupper på andre molekyler/andet sted i samme molekyle.

21
Q

Hvor findes polære rester?

A

Findes både begravede og på overfladen af proteiner. De danner enten hydrogenbindinger med andre polære rester i proteinet eller med vand.

22
Q

Hvor findes ikke-polære rester?

A

De vekselvirker ikke favorabelt med vand. Kernen af de
fleste proteiner består næsten udelukkende af ikke-polære rester og stabiliseres af mange van der Waals vekselvirkninger. Der findes dog også ikke-polære rester på proteinoverfladen, fx i hydrofobe patches.

23
Q

Hvilke aminosyrer er forgrenede på beta-carbon?

A

Valin og isoleucin + Threonin

24
Q

Hvorfor har Gly stor hovedkædefleksibilitet?

A

Fordi der kun er bundet et H, så der er ikke meget sterisk hindring

25
Q

Hvad betyder den store hovedkædefleksibilitet for Glys evne til at indgå i alfahelix?

A

Gly favoriserer den udfoldede tilstand af et protein, da der er stort tab i entropi ved helixdannelse, fordi Gly er så fleksibel

26
Q

Hvad er karakteristisk ved Ala?

A

Lille, ret uskadelig og simpel

27
Q

Hvilke aminosyrer er gode kernedannere?

A

Ala, Val, Ile og Leu

28
Q

Er Val, Thr og Ile gode i alfahelix?

A

Nej, de er forgrenede på beta-carbon, så der er ikke plads til dem

29
Q

Kan Pro danne H-bindinger?

A

Nej, der er intet amidhydrogen i peptidhovedkæden

30
Q

Kan Pro indgå i alfahelix?

A

Nej, den bryder hydrogenbindingsmønstret og laver et knæk i helix. Den har tit cis-peptidbinding og en helt fast struktur med phi = -60 grader.

NOTE for membranproteiner:

  1. Der er stabiliserende kræfter i det hydrofobe miljø, og alfahelices i membran er stabile. Derfor kan de godt klare, at der er prolin.
  2. Prolin kan lave knæk i helixes, der kan være vigtig for fx kanalers funktion.
  3. Den kan også gå mellem cis- og trans-konfiguration, så den kan give dynamik for en carrier.
  4. 4 aa-rester væk fra prolin sidder en gruppe, der ikke har en hydrogenbindingspartner (pga. manglende amidproton i prolin) – måske den spiller en rolle for transport.
  5. Prolin kan forhindre dannelse af betafoldebladsstreng og bevarer derfor alfahelix i membranproteinet. Prolin har kun -60 i tilladt phivinkel, og de kan derfor ikke indgå i betafoldeblade.
31
Q

Hvorfor er Phe den mindst polære af de tre aromatiske aminosyrer?

A

Tyr har -OH og Trp har N, der bidrager med elektronegative egenskaber.

32
Q

Ved hvilken bølgelængde absorberer Tyr UV-stråling og hvordan kendes spektret fra tryptofans spektrum?

A

275nm. Trp absorberer mere end 3 gange så meget.

33
Q

Hvilke polære, uladede aminosyrer danner H-bindinger?

A

Ser, Thr, Asn og Gln

34
Q

Hvad betyder det, når en aminosyre deamiderer? Hvilke aminosyrer kan deamidere? Og under hvilke forhold?

A

Ved høj pH kan Gln og Asn deamidere. Det betyder, at amidgruppen bliver til en carboxylsyregruppe
Det kan også ske ved sur hydrolyse

35
Q

Er cystin (oxideres cystein) polær eller upolær?

A

Upolær

36
Q

Er Met en reaktiv nukleofil?

A

Delvis reaktiv pga. lone pair

37
Q

Hvilke stoffer kan oxidere Met og Cys?

A

Fx hydroxylradikaler og peroxider

38
Q

Hvorfor fungerer His ofte som syre/base i katalystiske reaktioner?

A

pKr ligger i det fysiologiske område

39
Q

Hvor i et protein forefindes de forskellige dele af Lys og Arg?

A

Den ladede del er eksponeret på overfladen, mens den alifatiske del er en del af hydrofobe interaktioner.

40
Q

Er de to NN-atomer i His kemisk ens?

A

Nej, det, der er bundet til H-atom er elektrofilt, det andet er nukleofilt. De er hhv. donor og acceptor i H-bindinger.

41
Q

Hvor findes Asp og Glu oftest?

A

På overfladen af proteiner

42
Q

Ved hvilken pH er et protein mest opløseligt?

A

Ved pH = pI

43
Q

Hvad vejer en gennemsnitlig aa-rest?

A

110 g/mol, dvs. Mr=110

44
Q

Forklar hvorfor lysins epsilon-aminogruppes pKa er højere end alfa-aminogruppens.

A

alfa-aminogruppen påvirkes af den elektronegative carboxylsyregruppe på C-alfa. Denne trækker i elektronerne, så protonen i alfaaminogruppen bliver mere sur. Der er ikke nogen elektronegative atomer i nærheden af epsilonaminogruppen.

45
Q

Forklar hvorfor glutamats gamma-carboxyl gruppe har en pKa der er højere end pKa for alfacarboxylsyregruppen.

A

Når der er en positiv ladning på aminogruppen, frastødes protonen - det er mere favorabelt at have deprotoniseret carboxylsyregruppe.

46
Q

Ud fra hvad findes pI for et peptid?

A

De grupper, der kan protoniseres/deprotoniseres.

47
Q

Hvorfor spiller Arg en strukturel rolle i mange proteiner?

A

Har både lang alifatisk kæde og en ladet del, der kan eksponeres på overfladen. Den kan lave hydrogenbindinger og høj pKr gør, at ladningen er stabil.