Diagnostic de laboratoire Flashcards
Quelles sont les 3 phases du cheminement diagnostiques
- Phase pré-analytique
- Phase analytique
- Phase post-analytique
Donner 5 étapes de la phase pré-analytique
- Patient consulte avec des symptômes/signes d’une maladie infectieuse
- Diagnostic clinique tentatif
- Prescription de prélèvements de culture
- Prélèvements identifiés au nom + numéro d’assurance maladie du patient puis acheminés au laboratoire avec la demande d’analyses
- Réception des prélèvements au laboratoire
Donner 8 étapes de la phase analytique
- Examen direct sur le prélèvement
- Rapport partiel émis au médecin : interprétation
- Mise en culture du prélèvement
- Incubation des milieux ensemencés
- Lecture des milieux (le lendemain)
- Identification bactérienne
- Rapport partiel: interprétation
- Finalisation de l’identification
Donner 2 étapes de la phase post-analytique
- Émission du rapport final
- Interprétation finale du médecin
Quelles sont les 4 raisons pour effectuer un examen direct?
- Quantifier les globules blancs présents dans le prélèvement: ceci nous informe sur la réponse inflammatoire et la «purulence» de l’échantillon.
- Dans certains cas, exprimer en valeur relative la quantité de polynucléaires présents dans le prélèvement
- Observation de micro-organismes pour poser un diagnostic présomptif (bactéries, éléments mycéliens, levures, structures parasitaires, inclusions virales)
- Évaluation de la qualité du prélèvement pour décider si le résultat final sera fiable
Nommer 4 examens directs effetués de façon routinière
- Sérum physiologique
- Hydroxyde de potassium (KOH)
- Iode
- Fond noir
Qu’est-ce que permet le sérum physiologique? (2)
- permet d’observer la mobilité de certains micro-organismes
- permet d’évaluer rapidement les micro-organismes avec des formes particulières, ex.: levures
Décrire l’examen direct par hydroxyde de potassium et son utilité
- KOH 10 % digère la kératine
- utile pour diagnostiquer des éléments mycéliens (champignons) à partir de prélèvement d’ongles, de peau et de cheveux
Décrire le diagnostic direct par iode et donner son utilité
- colore les noyaux et organelles cytoplasmiques
- utile pour colorer rapidement les selles d’un patient et diagnostiquer la présence de protozoaires (ex.: amibes)
Quelle est l’utilité du diagnostic direct par fond noir?
- utile pour mettre en évidence des micro-organismes mal visualisés en microscopie optique standard et qui se colore difficilement (ex. : spirochète)
Nommer 2 types d’examens directs avec coloration
- Coloration de Gram *****
- Coloration de Ziehl-Neelson
Quel est le principe de la coloration de Gram?
La teneur en lipide de la paroi cellulaire des bactéries est variable.
Les parois pauvres en lipides retiennent plus le colorant cristal
violet (Gram positif).
** Pauvre = Positif **
Quand la paroi est riche en lipides, le cristal violet ne s’imprègne pas de façon permanente. Le décolorant le déloge (Gram négatif).
Quelles sont les 10 étapes techniques de la coloration de Gram?
1) étaler sur une lame une couche mince du prélèvement à colorer
2) fixer à la chaleur
3) cristal violet (1 minute)
4) laver
5) iode (1 minute) pour bien fixer le cristal violet
6) décolorer quelques secondes à l’acétone alcool
7) laver
8) safranine (1 minute)
9) laver, assécher
10) lire au microscope
Quelle est l’interprétation d’une bactéries colorée de couleur bleue par coloration de Gram?
Le cristal violet n’a pas été décoloré par l’acétone alcool: la contre-coloration à la safranine (rose) a été inefficace. La couleur finale de la bactérie est bleue ce qui implique une paroi pauvre en lipide : bactérie Gram positif (ex. : Staphylococcus).
Quelle est l’interprétation d’une bactéries colorée de couleur rose par coloration de Gram?
La paroi est riche en lipides. Le cristal violet est facilement libéré de la paroi par le décolorant. La contre-coloration avec la safranine est possible car la paroi est libre de colorant : bactérie Gram négative (ex. : Escherichia coli).
Quelles sont les 4 utilités de la coloration de Gram ?
- Permet de reconnaître rapidement le ou les bactéries possiblement pathogènes présentes dans le prélèvement et d’en informer rapidement le clinicien.
- Permet d’évaluer la présence ou l’absence de flore normale quand le prélèvement provient d’un site non stérile.
- Permet d’évaluer la réponse inflammatoire car les globules blancs sont colorés dans le processus.
- Permet de quantifier de façon relative les polynucléaires versus les cellules mononucléées. Ceci aide dans certains cas à distinguer les infections bactériennes des infections virales.
Donner 5 exemples d’identification préliminaire de bactéries selon l’aspect macroscopique
Quelle est l’interprétation de la présence d’un pathogène classique dans un prélèvement à partir d’un site normalement stérile?
Lorsqu’un pathogène classiquement associé à une infection d’un liquide normalement stérile est mis en évidence, le médecin qui prend connaissance du rapport considère que l’infection suspectée ou non est confirmée
Quels sont les 2 critères à respecter pour bien interpréter les résultats de cultures obtenus à partir de sites non stériles?
- connaître la flore normale de ces sites
- porter attention seulement aux bactéries qui ne font pas partie de cette flore ou qui sont reconnues pour causer des infections.
