cours 9 mcb2992 Flashcards
quelles sont les 8 étapes du cycle cellulaire bactérien
- croissance
- masse d’initiation
- initiation réplication
- élongation réplication
- terminaison réplication
- décaténation
- ségrégation/septum
- division
quels sont les problèmes dans l’étude du cycle cellulaire chez les bactéries
- population rendue a des stades différents du cycle
- difficile de synchroniser
- même avec cellules de même taille: pas synchro
quelles sont les méthodes pour étudier le cycle cellulaire
- baby machine/technique elution membrane
- cytométrie en flux
en quoi consiste la méthode de baby machine/technique élution membrane
- ajout thymine radioactive à culture en croissance qu’on fixe sur membrane
- quand cellule se divise: une des deux cellules n’est pas fixée et est relâchée
- toutes cellules filles qui sont relâchées en même temps: même age et stade de réplication
- a permis établir les périodes ICD
quelles sont les 3 période du cycle bactérien
I: temsp entre 2 initiations (selon masse initiation qui varie selon vitesse de croissance)
C: temps pour répliquer chromosome entier (souvent constant 40min: indépendant vitesse croissance)
D: temps entre fin réplication et division cellulaire (constant 20min, indépendant vitesse croissance)
que se passe-t-il à la période I en milieu pauvre vs riche
riche: I plus court que C donc plus qu’un oriC pcq atteint plus rapidement masse initiation: plusieurs réplication en même temps
pauvre: 1 cycle de réplication à la fois
qu’a permis l’étude du cycle cellulaire par cytométrie en flux
- déterminer masse individuelle des cellules/quantité ADN
- montre que milieu riche: plusieurs oriC initées en même temps
- montre lien entre masse cellualire et initiation réplication
que permet la rifampicine
bloque initiation de réplications, mais empêche pas ceux déjà répliqué
que cause une mutation dans oriC sur synchronisation
réplication pas synchronisée avec masse d’initiation
qu’est-ce que la décaténation
séparation physique des chromosomes reliés entre eux
implique FtsK, XerCD, Topo IV
qu’est-ce que la ségrégation des chromosomes
mouvement des chromosomes vers pôles cellulaires
implique FtsK, gyrase, MukB, etc
quelle méthode est utilisée pour étudier la décaténation
microscopie à fluorescence pour visualiser chromosomes et protéines protéines qui agissent sur site spécifique
comment se fait la résolution des dimères de chromosomes
- trans: avec XerCD (recombinases spécifiques
- cis: site dif situé centre région ter
- avec aide de FtsK
- FtsK place chromosome dans cellules filles
- alignement dif au centre
- interaction FtsK-XerCD à dif pour résoudre dimère
pourquoi ecq les sitedif se trouvent dans région ter
pour synchroniser avec terminaison
quel est le rôle de FtsK
- translocase: pompe ADN dans chaque cellule fille pour placer sites dif au milieu de cellules
- utilise séq KOPS pour orienter ADN
- se trouve au septum
comment se déroule la décaténation
élimination caténanes: sous-unité de Topo IV interagit avec FtsK pour régulation décaténation bon moment
comment se fait la condensation des chromosomes pour la ségrégation
- gyrase qui fait surenroulement négatif
- MukB (condensine)
- Topo IV pour éliminer caténanes
que sont des mutants fts
mutants thermosensibles: forme filaments à température non permissive: défault division cellulaire
/
que sont des mutants par
mutants thermosensible: défault ségrégation des chromosomes (partition), pas de formation de septime
quel est le premier gène de fts entre en action en premier dans division cellulaire
ftsZ
que cause l’absence de ftsZ
pas d’autres protéines de division au site
caractéristiques de ftsZ
- à la base de formation septum et maintien cohésion cytosquelette
- homologue tubuline (microtubules)
- lie GTP: formation anneaux Z
caractéristique de MreB
- homologue actine
- role dans croissance peptidoglycan
- interagit avec FtsZ pour synthèse paroi de division (synthèse longitudinale)
de quoi est constitué le divisome
- proto ring: plusieurs FtsZ avec FtsA et ZipA
- anneau cytoplasmique: proto-ring + FtsK (plusieurs domaines transmembranaires)
- après FtsK: complexe trimérique avec 1 domaine transmembranaire: FtsQ, FtsL et FtsB
- FtsW (domaines transmembranaires) + FtsI: synthèse peptidoglycan
- FtsN: permet maintien divisome
comment ecq la division cellulaire est régulée
dans temps: occlusion du nucléoide
dans espace: système Min
comment se fait l’occlusion du nucléoide comme régulation de division cellulaire
pas de septum tant qu’il y a du chromosome au centre de cellule
SlmA s’associe avec ADN au poles: inhibe FtsZ en causant désassemblage polymères de FtsZ
gradient de SlmA: fort oriC, faible ter)
comment fonctionne le système Min comme régulation de la division cellulaire
- MinC: inhibiteur FtsZ
- MinD: ATPase, MinD-ADP dans cytoplasme, MinD-ATP: lie membrane aux pôles
- MinD lie MinC qui inhibe FtsZ
- MinE fait osciller MinCD entre les pôles pour inhiber FtsZ aux pôles
- MinE inhibe MinCD: et au centre de la cellule: permet activité FtsZ
