Cours 21 Flashcards
Savoir comment effectuer la transgénèse chez la souris et, de manière générale, connaître
les principes impliqués dans la transgénèse ainsi que l’utilité de la transgénèse.
- utilité : apprendre ce que font es gènes chez l’animal
- transmission selon le mode autosomal dominant
Comprendre l’utilité de l’expression de gènes dans des cellules eucaryotes en culture.
-
Connaître la démarche permettant l’inactivation ciblée de gènes chez la souris et
l’obtention de lignées de telles souris.
- effets phénotyipiqes dus a labsence de la prot codée du gene
- on veut obtenir des homozygotes récessifs pour un gene X, pour créer des mutations de perte de fonxtion.
- -les souris chimere possedent deux types de cellules : une qui dérive des cellules ES injectés dans un blastocyste et lautre = blastocyste de la mere prteuse, pas de fusion cellulaire
Comprendre l’utilité de l’inactivation ciblée de gènes chez la souris pour la recherche en
génétique.
- injecte le gene neo dans le gene cible, le gene X est alors inactivé. À ce moment, il peut y avoir du corssing over
- des fois le fragment peut s’intégrere au hasard et nactivera pas le gene ciblé :(
- pour que le gène activé soit transmis à la progéniture il faut que les cellules ES Xx colonisent la lignée germinale (mis en évidence par transmission de la couleur du pelage)
Savoir ce que sont les cellules souches embryonnaires et connaître certaines de leurs
propriétés.
- afin de faire une inactivation ciblée, on doit passer par des cellules souches embrionnaires.
- elles sont totipotentes; elles peuvent se transformer en nimporte quel type cellulaire
- ces cellules sont isolés du blastocyte.
- quand on les integre dans un blastocyte, peuvent former un embryon
- on remplace par recombinaison homologue l’allèle sauvage du gene ciblé par une version inactivée.
- inactivation en insérant le gene neo dans un exon du gene ciblé
Connaître la démarche globale permettant de cloner un animal à partir de cellules
différenciées et comprendre les implications fondamentales du clonage de la brebis Dolly
pour la génétique.
-dolly = premier animal cloné à partir d’une cellule adulte
1-Énucléation du zygote en questiom
2-Transfert d’une cellule - ajout d’un noyau adulte
3-Électro fusion - permet au zygote de se fusionner avec le noyau
4-activation
5-oeuf avec noyau somatique - on peut alors l’incorporer dans une mere porteuse
-chercheurs voulaeitn comprendre sil y a des changements génétiques au cours du développement dans les cellules différenciers -> non vu que Dolly est née. donc pas de changement de séquence ADN au cours du dévelo.
Connaître la nature des mutations et les mécanismes de mutagénèse impliqués dans les
maladies à expansion de triplets.
- mécanisme de mutation qui peut résulter en des maladies génétiques particulières.
- associé à des mutations de perte ou gain de fonction toxique ou les 2.
- région où il y a un triplet répété un nb de fois, polymorphe dans la pop normal
- ces triplets se trouvent dans des régions non-dodantes (comme X fragile) ou codante (huntington)
Connaître les bases génétiques du syndrome de l’X fragile ?
- 2 plus grandes catégories de maladies à expansion de triplets.
- non-codantes -> x fragile
- codante -> huntington
- pourquoi nom x fragiel -> chromosome a tendance a se casser (lié au sexe, femmes porteuses affectées moindrement, retard mental…)
- X FRAGIL: protéine FMR1 ubiquitaire (présente dans tous les tissus), jouant un role dans la traduction des ARNm, mutattion de perte de fonction, car inactive le gene fmr1.
- X : symtpomes physiques et mentaux ->caractéristique de triplet se retrouve dans une séquene non codante.
- X : on ne peut pas dire si cest dominant ou récessif puisque les femme sont aussi affectée que les hommes mais a moindre échelle.
Comprendre la notion de prémutation.
-personnes avec 55-200 triplets = prémutation. chez les femmes porteuses de cette prémuttatio, les triplets sont susceptibles de prendre de lexpansion et se transformer en mutation causale dans la ligné germinale., chez les hommes, pas dexpansion dans les cellules germinales.
Maladie de Huntington.?
- codante -> huntington
- symptomes juste neurologiques -> indique que le triplet de départ est dans la séquence codante.
- domiance
- protéine huntingtine est ubiquitaire, mais role inconnue.
- mutation de gain de fonction
- fait des mouvements incontrôlés.
- nb de répétitions a une incidence sur la nature de la maladie
- peut prendre des souris où on inactive le gene de la hungtingtine (Hdh) -> découvre donc que le protéine est essentielle à la survie.
- À RETENIR : cas mutation dominante de gain de fonction, avec une mutation elle a une new propriété que la prot sauvage n’a pas = fonction toxique.
