Cours 14

Question 1

Uilité de la méthode de séquencage de deuxième génération ?

Answer 1

Utilisation pour re-séquençage + recherche de mutations ponctuelles.

Question 2

Que faire d’un ADNc?

Answer 2

• On établit sa séquence nucléotidique, puis un déduit sa séquence en a.a. de la prot.
• sert aussi à savoir o se trouvent les exons et introns dans l’ADN génomique

Question 3

Que sont les EST ?

Answer 3

Marqueurs de séquences exprimées., C’est alors un bout de séquence qui correspont à un ou des exons d’un gène.

• On fait des banques d’ADNc et au lieu de cribler avec une sonde pour trouver des clones spécifiques, on sélectionne des clones au hasard et on séquence des pb aux extrémités de l’insertion.
• On les obtient en isolant ARNm et faire un ADNc, qu l’on clone pour faire une banque de clones, on en pique un et le squence en 5’ et en 3’. Ensuite on l’envoie dans une banque de donnée.
• fournit un passage facile de la séquence peptidique artielle a son ADNc cloné.
• on peut donc les faire venir et ainsi cribler la banque d’ADNc
• ou peut servir a faire des amorces pour amplifier adnc

Question 4

Quelle est la différence entre une banque d’ADNc et la vanque de données (dbEST)?

Answer 4

ADNc : ensemble de clones microbiologiques conservés dans des éprouvettes
dbEST : enseble de séquences d’ADNc entrposées dans des ordis