Cours 19

Question 1

Connaître ce qu’est une étude d’association pangénomique (GWAS) et à quelles fins une
telle analyse peut être utile.

Answer 1

• elles sont utiles pour trouver un lien entre des marqueurs polymorphes et des traits ou maladies non monogénique (= pas 1 seul gène).
• principe : génotyper bcp de marqueurs (SNP) chez 2 groupes d’individus (ceux qui présente ou non le trait) –> trouve fréquences plus élevée de certains allèles chez ceux avec le trait
• ils sont soit : des polymorphisme banals en déséquilibre de liaison avec mut ou directement responsables de causer le phénotype.
• sujet dans pop peut avoir le genootype associé mais pas le phenotype -> polymorphisme non causal, mais lié génétiquement au SNP qui lui est causal. -> désiquilibre de liaison
• GWAS :vérifie si on a ue association entre le SNP associé à la maladie et lui du génotype.

Question 2

Savoir ce que sont les mutations de novo et par quelle méthode on peut les identifier.

Answer 2

• une mut qui apparait chez un individu mais qui nest pas présent chez ses parents, donc mutation survenue dans les gametes des parents
• pn cherche alors des SNp présents chez l’enfant mais pas chez les parents. (si bcp de différences = pas les mm parents oupsi).

Question 3

• Connaître les principes impliqués dans la mise en culture de cellules eucaryotes.

Answer 3

-on se sert souvent de cultures de fibroblastes (tissu conjonctif sécrétant composantes matrice extracellulaire + prot du tissu conjonctif.

Question 4

• Savoir ce qu’est une lignée cellulaire et comment il est possible d’en générer une.

Answer 4

• en entrant en crise, elle peut devenir immortalisée de facon spontanée. -> division infinie -> lignée cellulaire.
• humains -> immortelle si a une mutation

Question 5

• Comprendre ce qu’est la limite de Hayflick.

Answer 5

-les cellules de mamms en culture primaire ont une durée de vie limitée (apres une 5oaine de génération).

Question 6

• Savoir ce qu’est la fusion cellulaire chez les cellules eucaryotes en culture et quelles sont
ses utilités.

Answer 6

• forme de transfert génique entre cellules eukaryotes, transfert du génome entier à une autre cellule.
• premiere c fusionnée = dicaryon car elle a deux noyaux. On les fait pousser sur un milieu sélectif alors juste les cellules hybrides puevnt pousser.
• permet de : effectuer des tests de complémentations avec des c de mamms. et obtenir des animaux clonés.
• avoir des anticorps monoclonaux.

Question 7

• Savoir ce qu’est la transfection chez les cellules eucaryotes en culture et quelles sont ses
utilités.

Answer 7

-mm processus que la transformation chez les bactries.
-ADN nu pénètre dans la cellule cible.
-

Question 8

Connaître les caractéristiques principales des vecteurs d’expression utilisés chez les
cellules eucaryotes en culture.

Answer 8

• assurent la transcription et la traduction des séquences codants dans les c de mamms
• initiation transcription assurée par promoteur-enhancer actif ds c mamms.
• efficacit de la traduction

Question 9

Savoir différencier l’expression stable et l’expression transitoire.

Answer 9

• TRANSITOIRE : vecteur expression perdu par dilutionet dégradation car pas intégré dans le génome. Expression durant premiers jours seulement (pas de sélection, court délais, adn exra-chromosomique)
• STABLE : cellules integre le plasmide dans le adn et survie au milieu de culture; synthétise la ptot codé par le gene. et lexpression est maintenue dans le temps. (sélection, délais en semaines, adn sintegre au genome)