Chapitre 5 Flashcards
Type de tranfert d’information génétique?
- transfert horizontal : entre 2 organismes afin acquérir nouveau matériel (plasmide se transfert)
- transfert vertical : entre un parent et sa descendance (division)
Quels sont les types d’échanges d’information génétique chez les bactéries?
- transformation (gene resistance transmis)
- conjugaison
- transduction
Peu importe le type d’échange de matériel, quelle sont les 2 étapes?
- Transfert marqueurs génétique donneur au receveur
- Recombinaison du marqueur au génome de receveuse
Quest ce que l’expérience de Griffith?
Transformation bactérienne :
ADN se transforme du pneumocoque R (mutant non lisse/rugueux non virulent) en forme S en partie (lisse et virulence a cause de la couche de polysaccharide, septicémie mortelle).
Lorsque R + S dénaturé = mort, car transformation de R en S
Que démontre Avery?
Que l’ADN présent dans pneumocoque S tué est la seule classe qui transforme les R (pas protéine/lipide). ADN est donc la substance de l’hérédité (onc royait que c’était les protéines)
Définition de transformation bactérienne?
Processsus dans lequel bactérie receveux absorbe ADN nu par la lyse, accidentelle/provoqué de la donneuse, l’ADN qui peut être recombiner au chromosome de bactérie receptrice et produire des transformants (recombinant).
Quest ce que cela signifie?
ADN ajouté a transformer auxotrophe en hétérotrophe
Quest ce que la compétence bactérienne? Facteur?
Aptitude à absorber fragment ADN libre et incorporer au génome. Change selon :
- espèce
- phase de croissance
- milieu culture
- changement rapide température
Facteurs de compétence: récepteur, nucléase, protéines liant ADNsb
Mécanisme transformation.
Transformation ADN
- absorption ADN (récepteur)
- entrée ADNsb (peut se faire dégrader, pas tjrs efficace)
- recombinaison homologue (crossing over)
- bactérie transformé = transformant / recombinant peut se diviser mtn (transfert vertical)
Quel autre type de transformation existe t-il?
Transformation avec plasmide (entre aussi simple brin)
Que se passe t-il ici?
Transfert génétique horizontale = transformation
- Induction cellule donneuse par traitement CaCl2 (chlorure calcium) et choc thermique
- Entrée forcée par déstabilisation paroi par choc électrique (électroporation)
Quest ce que le clonage?
Insérer de l’ADN dans un plasmide avant de faire une transformation
Qui découvre la conjugaison bactérienne?
Lederberg et Tatum : ils étalent 10^8 bactérie de souche A ou B (témoin) et mélange des 2 souches (expérimentale : préalablement incubé pendant 5h sur milieu riche) sur milieu minimale (eau, sels minéraux, glucose, agar)
2 souches auxotrophe :
- A : Bio - Phe - Cys - Thr + Leu + Thi +
- B : Bio + Phe + Cys + Thr - Leu - Thi -
CONCLUSION : aucune colonie sur témoins, mais 10 colonie visible sur mélange (10^-7) = colonie prototrophe (A : Bio + Phe + Cys + Thr + Leu + Thi +) car bactérie recombinante
Quelle est la seule faon de transformer un auxotrophe en prototrophe?
Avoir souche HFr
Quest ce qui est nécéssaire pour faire fonctionner la conjugaison?
- contact physique
- présence facteur fertilité dans donneur
- transfert horizontale (linéaire) de donneur (F ou HFr) a réceveuse (F-)
Quelle expérience prouve qu’un contact physique est nécéssaire pour faire une conjugaison?
Tube en U : membrane de filtre de verre ne permet pas à ADN de passer, donc aucun contact physique ne se fait = pas de conjugaison
Quest ce que l’origine de transfert?
Origine ou le plasmide/chromosome se défera pour etre transmis en simple brin au receveur
Quest ce que la conjugaison?
Mécanisme qui consiste en transfert horizontale et unidirectionnel du chromosome HFr ou plasmide F du donneur au receveur F- à l’aide d’un contact direct par pilus sexuel
Qu’arrive t-il si lors d’une conjugaison Hfr X F-, dont le temps de conjugaison est court?
Pas nécéssairement toutes les protéine qu’elles codait seront transférer (moins de matériel transférer). Dans une situation Hfr, on reste tout de même F- (même si le temps est long et qu’on a tout transferer), car il est impossible que tout le chromosome de la donneuse soit passé au complet.
Quest ce que la cartographie par conjugaison interrompu?
On arrete la conjugaison à chaque minute (vitesse de transfert constante = temps entrée marqueur donne idée de distance qui les sépare) pour observer ou elle est rendue lors d’un croisement Hfr X F- en agitant pendant cours laps, mais violemment.
Par la suite, on étale sur milieux différents pour dénombrer les différents types de recombinant
Quest ce que cela représente? Convention?
Cartographie d’un chromosome E coli (à l’aide des souches Hfr) divisé en 100 minute ou 1 minute = 20 loci.
Convention :
- Position 0 = locus thr de Hfr Hayes
- trasnfert dans sens horaire
Quest ce que le plasmide F’ ou sexduction?
Le fait que la partie plasmide du chromosome Hfr décide de reprendre une position de plasmide dans la bactérie, mais en faisant une erreur d’excision, emportant avec lui un peu de matériel du chromosome.
La bactérie n’est pas F+, mais plutot F’ car nous avons plus que slm du plasmide. Le plasmide F’ peut maintenant faire de la conjugaison dans une nouvelle bactérie
Cycle lytique VS lysogène?
Qu’observe t-on sur un milieu solide VS liquide qui nous indique l’apparition de phage?
Solide : apparition de plage = colonie de phage
Liquide : densité cellulaire réduite (milieu devient clair car pu de bactérie
Mécanisme d’une trasnduction généralisée?
- infection phagique des bactéries donneuses.
- réplication ADN de phage et déterioration ADN bactérien
- erreur lors de assemblage de phage (encapsidation) : court fragment ADN du chromosome bactérien détruit peut etre incorporé dans la formation d’un phage transducteur
- lyse des bactéries donneuse et libération phage normaux et transducteur (1%) (ne contiennent pas ADN viral, juste bactérien)
- infection des bactéries receptrice par phage normaux et transducteur (produira un transductant : recombinaison de l’ADN bactérien au génome de la bactérie receveuse)
Mécanisme transduction spécialisé?
- Libération prophage de bactérie lysogène sauvage (excision du chromosome si irradier au UV)
- Erreur excision du prophage (enzyme phagique crée excision normale produisant génome phagique et bactérien intact) : fréquence faible clivage incorrect qui produit fragment hybride ADN (phagique + bactérien)
- prc prophage lamda s’intègre dans chromosome entre gènes gal et bio, certains phage contenant gal/bio (phage lamda détectif gal) peuvent être produit
- Lyse donneur et libération phage normaux et détectif (fréquence 10^-6 à 10^-7)
- Infection receveur par plage normaux/détectif
- Recombinaison de ADN transduit au génome de receveuse avec gène gal/bio (transductant)
Différence transformation, transduction et conjugaison?
- Transformation : Pneumocoque R à S avec Griffith
- Transduction : bactériophage virulent/tempéré, généralisé ou spécialisé
- Conjugaison : auxotrophe a prototrophe par contact physique (pilus), plasmide, sexduction F’
