Chapitre 3 Flashcards
Comment est définie la croissance?
Croissance est définie par l’accroissement du nombre de cellules ou masse cellulaire
Comment se poursuit la croissance de la plupart des procaryote?
Par fission binaire (scissiparité) : division en 2 nouvelles cellules identiques à la mère
Comment représentons la croissance d’une population bactérienne en milieu liquide?
Dans un système fermé (discontinue) : Courbe de croissance de log10 de la concentration bactérienne (bact/ml) par rapport au temps (heures). Formé de 4 phases :
- Latence
- Exponentielle (phase optimale)
- Stationnaire
- Mortalité
Quest ce que la phase de latence? Durée varie en fct de quoi?
Phase adaptation (pas actif) ou il n’y a pas de division cellulaire. La durée de la phase varie en fonction de l’age des bactéries et leur origine (composition et T)
Quest ce que la phase exponentielle (log)?
- Acceleration de croissance et division cellulaire
- Microorganismes se développent/divisent à vitesse maximale
- Population uniforme (propriétés chimiques/physiologique)
- Courte durée
- Relation entre concentration nutriments et croissance
Quest ce que la phase stationnaire?
Nombre totale de microorganismes viables est constant, donc équilibre entre division et mort cellulaire (10^9cellule/ml) : semble inactif, mais est plutot un équilibre. Causes : limitations nutriments et accumulation conditions défavorables (déchets, acidités)
Quest ce que la phase de mortalité?
Arrêt de la division cellulaire = diminution nombre de bactérie viable de façon constante en fonction du temps. Causes :
- dégats irréparables = perte de viabilité
- réponse génétique déclenché (mort programmé)
- formation cellules viables non cultivable (VNC = dormance = pas division)
Quel est la différence entre la culture continue comparativement à la discontinue?
Continue = ouvert
- permet de garder bon apport nutriment
- éliminer bien les déchets
- phase de croissance exponentielle plus longue
- concentration constante de la biomasse
- chémostat : aaport constant de nutriment à la mm vitesse que le milieu est éliminé (dillution constante)
- turbidostat : vitesse de dillution déterminé par densité
Quels sont les 2 méthodes directes pour dénombrer le nombre de microorganismes?
- décompte total des colonies selon la taille
- compteur Coulter et Cytomètre de flux (protiste, levure, mammifères) (grosse cellule)
- Hémocytomètre (levure et cellule mammifère) et cellule Petroff-Hausser (bactéries) = chambre de compactage au microscope
- décompte des unités viables (qui peuvent se reproduire)
Quels sont les avantages et désavantages de la chambre de compactage au microscope?
Avantage :
- facile à utiliser
- peu couteux
- donne info sur taille et morphologie du microorganisme
Désavantage :
- densité microbienne élevé (petit volume) : besoin concentration minimale ds solution
- décompte cellule morte = rouge / vivante = vert (comme Live/Dead BacLight bacterial viability)
Comment fonctionne un hémocytomètre? Dimension?
- Dimension : 0,1 X 0,1 X 0,01 = 1/10 000 cm^3
- # cellules par ml = 1000 X # cellules X facteur dillution
Comment est composé une cellule de Petroff-Hausser?
- Dimension : 10 fois plus petit que hémocytomètre (1/100 000 cm^3)
- Cellule / ml = 100 000 X # cellules X facteur dillution
Quelles méthodes sont utilisées pour faire le décompte des unités viables?
Formule?
- Dillution liquide et étalement sur gélose
- Filtre de cellulose dont la porosité retient microorganismes (0,45um)
colonies X facteur dillution
Quels sont les avantages et désavantages de la méthode de décompte d’unité viables?
Avantage : colonies proviennent cellules de cellules vivantes capable de se reproduire : permet de connaitre la concentration initiale de bactéries
Désavantage : amas de cellule représente 1 colonie = forme des UFC (unités formant des colonies)
Après dilution successives et étalement sur gélose, quel est le nombre de colonies idéales pour faire un bon décompte?
Entre 30 et 300 colonies
Quels sont les méthodes indirectes pour faire le comptage de la croissance des microorganismes?
- mesure de l’activité : mesure de
- consommation de substrat (C, N2, O2)
- concentration de constituant (ATP/FAD ou FMN/ADN)
- sécrétion de produit (CO2 ou NH3)
- mesure de la masse cellulaire :
- poid sec (g/L) :
- récolte par filtration membrane
- lavage + dessination (100à110C)
- pesée (toute bactéries morte/vivantes)
- turbidité par densité optique (OD) : turbidimétrie
- poid sec (g/L) :
Quest ce que la turbidimétrie?
Évaluation de la concentration cellulaire par denisté optique (DO) = absorption lumineuse à une certaine longueur d’onde. Entre 10^6/ml et 10^8/ml, la DO est directement proportionnelle à sa concentration cellulaire.
En bref, + turbide = + dense = - capable passer au travers
Quelles sont les différentes expressions mathématiques de la croissance bactérienne?
- Temps de génération / dédoublement (g)
- Taux de croissance (k)
- Nombre de génération?
Quest ce que le temps de dédoublement?
Intervalle de temps entre 2 divisions successives en min. (Ex. E coli = 20 min)
- g = t/n ou
- t = temps
- n = nombre génération
Quel est la formule du taux de croissance? Qu’est ce que le taux de croissance?
C’est le nombre de génération par unité de temps : inverse du temps de génération. (Ex. E coli 3/h)
k = n/t
Qu’est ce que le nombre de génération?
Permet de trouver le temps
n = (LogNt - LogN0) / Log2
Quels sont les macroéléments et ou sont-ils présents?
C, H, N, O : molécule organique
Glucide, lipide, protéine, acide nucléique
Quels sont les ions qui font partis des macroéléments?
Na, K, Mg, Ca, Cl, Fe : ions
Cofacteur enzyme
QUels éléments sont sous la forme de traces?
Microéléments (oligoéléments), donc besoin particulier:
Mn, Co, Cu, Zn
De quoi sont formé les:
- protéine
- lipide
- glucide
- acide nucléique
Quest ce que des nutriments?
Substance qui est utilisé pour la biosynthèse / conversion de l’E pour la croissance bactérienne
Quels sont les 10 nutriments essentiels pour la croissance microbienne?
C HOPK’NS = macromolécule en grande quantité
- C : source carbone
- H et O : eau = indispensable
- pH : sensible au H+
- O2 : indispensable à toxique
- facteurs de croissance : acide aminés, vitamine, base azotés
- ’ : Fe, Ca, Mg