Ch 10 Flashcards
Les anticorps qui réagissent avec leur antigène passent d’une phase soluble à une phase solide. en quoi utilise t’on ce phénomène lors d’immuno essais
Cela permet de séparer et purifier les anticorps/antigènes qui intéragissent ensemble en retirant par lavage la phase soluble
Garder en tête lors d’un immuno-essai: quelle est la phase soluble/quelle est la phase solide.
Rate this 3-4 jusqu’à temps que sa soit bien compris
comment fonctionne un immunoessai par compétition
on lie des AC spécifiques dans deux tubes différents
Dans le premier tube, on ajoute une quantité fixe d’AG radioactif, on lave puis on mesure la radioactivité
Dans le deuxiè`me tube, on met la quantité fixe d’AG radioactif mais aussi des concentration croissantes d’AG froid (non radioactif) puis on mesure la radioactivité après lavage selon la concentration d’AG froid
Qu’est ce qu’un antigène froid
c’est un antigène qui n’est pas marqué par radioactivité ou par fluorescence
à quoi peut servir un immunoessai par compétition
à établir une courbe d’étalonnage de radioactivité pour une C fixe d’AG radioactif
on peut doser le sérum d’AG d’un patient avec cette courbe d’étalonnage
comment fonctionne le test d’immunoprécipitation par hémagglutination
on met des globules rouges dans un puit.
Si les globules intéragissent avec l’AC, les GR vont tapisser le fond du puit et forment une couche rouge dans le fond du puit.
Si les GR n’intéragissent pas, ils forment un ama au centre du puit. il n’y a qu’un point rouge au fond du puit
qu’est ce que le titre de l’antisérum dans une hémagglutination
c’est la dernière dilution d’un antigène qui donne encore un résultat positif dans le test d’hémagglutination
le titre est donné comme l’inverse de la dilution (EX: titre est la dilution 1:30 donc le titre sera de 30)
J’utilise des billes d’agaroses ou magnétiques couvertes d’anticorps spécifiques à une protéine qui se retrouve dans un mélange. J’isole les billes pour extraire la protéine spécifique
COMMENT S’APPEL CET TECHNIQUE
L’immunoprécipitation par billes d’agarose/magnétique
qu’est ce que l’immunofluorescence?
c’est le couplage de fluorophore à des anticorps
comment fonctionne la cytométrie de flux
des cellules sont marquées avec des AC fluorescent puis passé dans un flux où il y a un laser
Le laser excite les fluorophores et des détecteurs envoient un signal pour chaque fluorophore d’une certaine couleur qui passe au travers du laser
Les résultats d’une cytométrie de flux peuvent prendre plus d’une forme. quel est l’avantage du dot blot?
Le dot blot a 2 axes. on peut donc analyser les cellules présentes selon deux paramètres
Les résultats d’une cytométrie de flux peuvent prendre plus d’une forme. quel est l’avantage d’un histogramme
Un histogramme est une courbe qui inclu le nombre de point pour un paramètre. on peut calculer gràce à l’aire sous la courbe le nombre exact de cellules analysées
en quoi le test ELISA est il différent d’un test par immunofluorescence
ELISA (Enzynme Linked ImmunoSorbent Assay) utilise une enzyme qui forme un prouit coloré plutot qu’un fluorophore excitable
est ce qu’un test ELISA fait sur le sérum d’un patient infecté va détecter l’antigène dans le sérum?
non, le test détecte la présence d’anticorps contre l’antigène dans le sérum.
Quelles sont les étapes d’un test ELISA
on colle l’AG d’intêret dans un puit puis
On couvre le puit avec une protéine de blockage inerte puis on lave
On ajoute le sérum d’intêret puis on lave
on ajoute l’anticorps secondaire marqué anti-anticorps qui se trouvait dans le sérum puis on lave
on ajoute le substart pour l’enzyme portée sur l’AC secondaire
