6

Question 1

BIOMARCATORI DI DANNO
MIOCARDICO : Le Troponine

Answer 1

Le troponine cardiache sono proteine regolatrici presenti nel sarcomero del tessuto cardiaco e controllano l’interazione calcio-mediata di actina e miosina.
La troponina è un complesso di 3 subunità :
troponina T (TnT), che si lega alla tropomiosina e facilita la contrazione, troponina I (TnI), che si lega all’actina e inibisce l’interazione actina-miosina e troponina C (TnC), che lega gli ioni calcio.

Le isoforme TnI e TnT hanno sequenze aa ≠ codificate da geni ≠ e sono ≠ da quelle che si trovano nel muscolo scheletrico.

Pertanto, si sono sviluppati dei test analitici molto sensibili
(immunoassay) , detti ad elevata sensibilità, dove gli anticorpi
riconoscono epitopi stabili in una regione amminoacidica di
TnI e di TnT.

Question 2

L’infarto del miocardio viene definito
da un valore di troponina (TnI TnT)

Answer 2

al
di sopra del 99° percentile di una
popolazione di riferimento. (14 ng/L)

Question 3

DIAGNOSI DI IMA

Answer 3

1. Sintomi ischemici del paziente come dolore toracico acuto
   (dolore anginoso)
2. Elettrocardiogramma (ECG) con sopraslivellamento persistente
   del tratto ST (>20 min o o senza sopraslivellamento persistente
   del tratto ST.
3. il riscontro di un aumento delle troponine ad alta sensibilità,
   con almeno un valore al di sopra del 99° percentile del limite
   superiore di riferimento «gold standard».

Question 4

DIAGNOSTICA PROTEICA

Answer 4

L’elettroforesi delle proteine del
siero rappresenta l’esame
diagnostico per il riconoscimento e
la quantificazione di tutte le
componenti proteiche.

Question 5

PROTIDOGRAMMA

Answer 5

 Dalla analisi densitometrica delle singole frazioni si ottiene un
tracciato (protidogramma) in cui le singole bande sono rappresentate da picchi di diversa altezza e larghezza,
 L’ area delimitata è proporzionale al contenuto proteico delle rispettive frazioni

Le frazioni ottenute mediante elettroforesi si distribuiscono a
formare 5 bande denominate albumina, alfa-1-globuline, alfa-2-
globuline, beta-globuline e gammaglobuline.

Question 6

DIAGNOSTICA PROTEICA
Prealbumina

Answer 6

La prealbumina o transtiretina è una proteina globulare di
circa 55 Kda in grado di legare e trasportare la tiroxina e il retinolo.
La prealbumina è una proteina negativa di fase acuta che
viene regolata negativamente dalle citochine proinfiammatorie: la sua concentrazione plasmatica diminuisce in corso di flogosi

 Viene richiesto come marker dello stato nutrizionale e la concentrazione dimimuisce in presenza di patologie epatiche , epatobiliari e stati infiammatori.

Question 7

 Le concentrazione di prealbumina nel plasma variano da

Answer 7

0.2-0.4 g/L

Question 8

Albumina funzioni

Answer 8

Principale responsabile della pressione colloidosmotica

Lega e trasporta numerose sostanze endogene ed esogene

Costituisce una riserva una riserva di amminoacidi a scopo
nutrizionale
 Ha una azione antiossidante nella riduzione dei livelli dei
radicali liberi.

Question 9

DIAGNOSTICA PROTEICA : ALBUMINA

Answer 9

La concentrazione plasmatica
dell’albumina viene utilizzata
principalmente come indice di
funzionalità epatica e dello stato
nutrizionale.
 La condizione di ipoalbuminemia è
presente nelle epatopatie, nelle
condizioni di malnutrizione e
malassorbimento e nella sindrome
nefrosica.
Cirrosi o epatiti acute : riduzione della sintesi di albumin

Question 10

Albumina cos è

Answer 10

Albumina è una proteina di fase acuta
negativa, in quanto la sua sintesi viene
“down”-regolata dalla interleuchina 6 (IL-6

Question 11

 L’aumento di sintesi di albumina viene
indotta dagli

Answer 11

ormoni glucocorticoidi e
dagli steroidi anabolizzan

Question 12

Principali alfa uno globuline

Answer 12

 Αlfa 1-glicoproteina
 Alfa1-anti-tripsina
 Alfa1- lipoproteine (HDL

Answer 13

Il deficit di alfa-1-antitripsina è un disordine autosomico recessivo, che aumenta il rischio di sviluppare alcune patologie tra le quali quella polmonare (broncopneumopatia cronico ostruttiva,
enfisema) e quella epatica (cirrosi,carcinoma epatico).
(eccesso enzimi proteolitici neutrofili x mancanza inibizione da aat)
La patogenesi del AATD è direttamente correlata alle mutazioni del gene SERPINA1, localizzato sul
cromosoma 14, che è altamente polimorfico

Question 14

L’α1 -glicoproteina (AGP

Answer 14

è una glicoproteina
sintetizzata prevalentemente negli epatociti.
AGP è una proteina della fase acuta e la sua sintesi a
livello epatico è indotta da interleuchina 1β, IL6 e dal
fattore di necrosi tumorale-α (TNF-α), mentre l’ormone
della crescita ne inibisce l’espressione
AGP aumenta nel plasma dopo 24 ore dallo stimolo
flogistico o infiammatorio, raggiungendo un picco
massimo dopo 72-92 ore

Question 15

Le principali α2-globuline sono rappresentate da:

Answer 15

 Αlfa-2-macro-globulina
 Aptoglobina
 Ceruloplasmina

Question 16

 L’α2 -macroglobulina (AMG) è

Answer 16

 L’α2 -macroglobulina (AMG) è una grande glicoproteina
plasmatica di sintesi epatica, composta da 4 subunità
identiche (ciascuna di 182 kDa) legate fra loro da ponti
disolfuro.
 AMG presenta attività proteasica aspecifica soprattutto verso
i sistemi enzimatici coagulativi e fibrinolitici, inibendo la
coagulazione attraverso l’azione proteasica verso la trombina
e inibendo la fibrinolisi con azione sulla plasmina.  Le concentrazioni plasmatiche di AMG sono relativamente
aumentate nella sindrome nefrosica, una condizione in cui il
rene incomincia a perdere proteine a basso PM trattenendo
quelle a maggior PM.

Question 17

Aptoglobina emivita

Answer 17

L’aptoglobina (Hp), una volta rilasciata nel plasma, ha una vita
media di 2-4 giorni ed è caratterizzata da una elevata affinità sia
per l’emoglobina (Hb) derivante dagli eritrociti senescenti in
circolazione per emolisi extravascolare, sia per l’emoglobina
derivante dalla rottura degli eritrociti per emolisi intravascolare.
Il complesso Aptoglobulina-Emoglobina (Hp-Hb) ha
una emivita piuttosto breve (10-30 min) in quanto viene
rapidamente captato e rimosso dalla circolazione delle cellule
del sistema reticolo endoteliale (SRE

Question 18

Aptoglobina

Answer 18

 L’aptoglobina (α2-globulina) è una glicoproteina sintetizzata
nel fegato composta da 4 catene polipeptidiche.
 L’aptoglobina svolge un’azione antiossidante e di scavenger
per l’emoglobina libera rilasciata nel plasma in seguito a
processi emolitici.
 Il complesso aptoglobina-emoglobina viene rimosso dal
plasma ad opera del sistema reticolo-endoteliale soprattutto
della milza.
 I valori di aptoglobina aumentano in corso di neoplasie,
traumi e processi infiammatori, infatti, l’aptoglobina è una
proteina infiammatoria della fase acuta.  La concentrazione di aptoglobulina diminuisce nelle patologie
epati

Question 19

Aptoglobina rimozione

Answer 19

 Il principio di rimozione ha inizio a seguito di una forte
interazione che si stabilisce tra Hp-Hb e il recettore proteico
CD163 espresso esclusivamente sulla superficie dei monociti e
dei macrofagi
 Nei macrofagi il complesso Hp-Hb è catabolizzato
in globina ed eme, quest’ultimo, a sua volta, è degradato
dall’eme-ossigenasi in bilirubina.
 Il ferro rilasciato viene sequestrato dalla ferritina e conservato
nelle cellule oppure trasportato nel midollo osseo tramite
la transferrina plasmatica per la sintesi di nuova emoglobina.

Question 20

La ceruloplasmina

Answer 20

è una glicoproteina
costituita da una sola catena
polipeptidica sintetizzata nel fegato
con PM di circa 130KDa.
La sua funzione è di legare il rame e lo
trasporta ai vari tessuti.

Question 21

ceruloplasmina significato diagnostica

Answer 21

La ceruloplasmina aumenta negli
stati infiammatori (proteina di fase
acuta) e in gravidanza per azione
degli estrogeni.
Una riduzione dei livelli di
ceruloplasmina può avvenire a causa
della Malattia di Wilson.

Question 22

La proteina ATP7B

Answer 22

sintetizzata nel fegato ha il compito di rimuovere gli eccessi
di rame proveniente dalla dieta, legando il rame e poi lo trasferisce alla
ceruloplasmina che lo porta ai tessuti. L’eccesso di Cu Viene portato ai lisosomi dove verrà eliminato attraverso la bile.

Question 23

Le principali B2-globuline sono rappresentate da:

Answer 23

Emopessina
 Plasminogeno
 Transferrina
 Il fattore del complemento C3
 Proteina C-reattiva

Question 24

DIAGNOSTICA PROTEICA : TRANSFERRINA

Answer 24

 La transferrina (TF) è la principale β1 globulina sintetizzata
dal fegato.
 TF lega il ferro assorbito dall’intestino o rilasciato dal
catabolismo dell’emoglobina e lo trasporta in parte al fegato
e in parte alle cellule del sistema reticolo-endoteliale.
 Il ferro viene captato dalle cellule epatiche mediante la
ferritina e l’emosiderina (costituiscono i depositi
intracellulari di ferro) o viene utilizzato nella sintesi di
emoglobina, mioglobina e citocromo-ossidasi.
 I livelli plasmatici di transferrina aumentano nelle anemie
sideropeniche, nella gravidanza ed in seguito all’assunzione
di terapia farmacologica con estro-progestinici.

Question 25

 La proteina C-reattiva (PCR),

Answer 25

capace di legare il polisaccaride C della
parete cellulare dello Streptococcus pneumoniae,
è una proteina capace di legare molti polisaccaridi
appartenenti a batteri e protozoi
 La proteina C-reattiva viene sintetizzata dal fegato.
 PCR è una proteina della fase acuta, aumenta nelle
patologie infiammatrie causate da batteri, virus.
La PCR fornisce informazioni al clinico circa l’eventuale presenza o assenza di uno stato infiammatorio.
 Questa informazione può essere usata insieme ad altri dati come
i segni e sintomi, la valutazione dello stato clinico o altri esami,
per la diagnosi di una patologia infiammatoria acuta o di una
riacutizzazione di una malattia infiammatoria cronica

Question 26

DIAGNOSTICA PROTEICA :
Le Immunoglobuline

Answer 26

Nella regione gamma del profilo
elettroforetico proteico migrano le
immunoglobuline (IgG, IgM, IgD e IgE).
 Una accurata valutazione del tracciato
elettroforetico delle proteine consente di
definire quadri di picchi monoclonali e di
iper/ipogammaglobulinemia policlonale.

Question 27

Le immunoglobuline del siero comprendono 5 classi:

Answer 27

● · IgG
● · IgA
● · IgM
● · IgD
● · IgE
Le immunoglobuline più rappresentate sono le IgG (800-1600 mg/dL),
seguite dalle IgA (90-400 mg/dL), e dalle IgM (40-230 mg/dL). Le IgD e le
IgE sono presenti nel plasma in quantità esigue.
La molecola di immunoglobuline è costituita da 2 catene pesanti legate
fra loro e da 2 catene leggere (ciascuna legata ad una catena pesante).

Question 28

Immunoglobuline monoclonali

Answer 28

In condizioni fisiologiche le immunoglobuline sono policlonali,
 Nelle gammopatie monoclonali,nel midollo osseo si
accumulano plasmacellule identiche originate da un’unica plasmacellula madre proliferata.
 Queste plasmacellule costituiscono un clone e sono quindi monoclonali. Tutte le plasmacellule del clone producono la stessa immunoglobulina, con la stessa struttura chimica. Questa si
accumula nel siero e dà origine alla componente monoclonale.

Question 29

Immunoglobuline monoclonali significato diagnosi

Answer 29

Le immunoglobuline monoclonali assumono nel tracciato elettroforetico
un profilo diverso da quelle policlonali. Tutte si posizionano in regione γ,
ma le Ig monoclonali hanno un profilo a picco alto e stretto in quanto la
loro identità strutturale le fa migrare con la medesima velocità
elettroforetica. Le immunoglobuline policlonali, invece, essendo
strutturalmente eterogenee, hanno un profilo a gobba con base larga.

 Non sempre il riscontro di una gammopatia monoclonale o componente
monoclonale è sinonimo di malattia tumorale. Infatti vi sono le
cosiddette gammopatie monoclonali di significato indeterminato
(MGUS) che spesso restano invariate nel tempo senza sviluppare un
tumore vero e proprio.
 Altre volte il riscontro di una gammopatia monoclonale è la spia di una
malattia proliferativa del sistema che produce le immunoglobuline
monoclonali (mieloma, macroglobulinemia di Waldenstrom,
amiloidosi).
 Altre volte ancora, la componente monoclonale è una manifestazione
collaterale di un linfoma o di una leucemia linfatica cronica.

Question 30

DIAGNOSTICA PROTEICA
CONCLUSIONE

Answer 30

Lo studio del protidogramma - analisi di primo livelloha come obiettivo principale :
1. la rilevazione delle componenti monoclonali
presenti nel siero e il loro monitoraggio terapeutico.
2. La presenza di alterazioni significative delle proteine plasmatiche che dovranno essere indagate con metodologie di secondo livello.