23. Sterilezés és fertőtlenítés fogalma, jellemzői. A sterilezés ill. fertőtlenítés fizikai módszerei. Flashcards
Pozitív és negatív mikrobiológia
Pozitív mikrobiológia feladata a mikrobák szaporítása –> negatív a mikrobák tevékenységének gátlása
Negatív típusai:
- In vivo - fertőző betegségekben szenvedők gyógyszeres kezelése
- In vitro - sterilezés és fertőtlenítés
Gátló hatás lehet:
1. Mikrobicid: a hatás elpusztítja a mikrobákat (pl. baktericid, fungicid, virucid, germicid)
2. Mikrobisztatikus: gátolja a mikrobák szaporodását (pl.
bakteriosztatikus, fungisztatikus)
Sterilezés
mikroorganizmusok elpusztítása v. eltávolítása
Probléma: tökéletes sterilezés (zérus csíraszám) pusztítással nem lehetséges –> sterilezésre exponenciális pusztulási görbe jellemző, ennek sebessége függ a mikrobák minőségétől, mennyiségétől, és a kezeléstől
Fertőtlenítés
Dezinficiálás –> Mikroorganizmusok számának lecsökkentése olyan szintre, ahol az esetlegesen még jelenlévő kórokozók nem jelenthetnek fertőzési veszélyt
Fizikai módszerek
- Hő
- Hideg
- Elektromágneses sugárzás
- Szonikálás
- Plazmolízis
- Szűrés
Hő - jelölések
- Decimális redukciós idő (D) –> mennyi ideig kell kezelni a mintát, hogy a tenyészet 90%-a elpusztuljon (1/10-e maradjon életben)
- Hőpusztulási állandó (k) –> (mikroba- és hőmérsékletfüggő) → a hő hatása az idő függvényében
az alábbi összefüggéssel írható le: N(t) = N(0)•exp(–k•t)
Száraz hő
- Kevésbé hatékony
- Típusok:
- hőlégsterilizálás –> szárítószekrény 160°C, 2 h
- flammálás –> kiizzítás - Alkalmas pl. fém- és üvegtárgyak, porok sterilezésére
- Alacsony hőmérsékletű szárítással is tartósíthatóak az élelmiszerek
Nedves hő
Hatékonyabb, mert a nedves levegőnek jobb a hővezetése –> alacsonyabb hőfokon v. rövidebb ideig tarthat a sterilezés
Típusai:
1. Kifőzés
2. Tindallozás
3. Pasztőrözés
4. Ultrapasztőrözés
5. Autoklávozás
6. Sterilitás vizsgálat
Kifőzés
A vegetatív sejteket elpusztítja, de az endospóráknak nem árt; 100°C, 30 min
Tindallozás
80°C, 30 min, majd 24 h szobahőmérsékleten, mindezt 3x ismételjük meg → az endospórák is elpusztulnak
–> hosszú és körülményes eljárás (hőérzékeny anyagoknál mégis célszerű!)
Pasztőrözés
csak fertőtlenítés; 63°C, 30 min; eredetileg borászat, aztán tejipar
Ultrapasztőrözés
140°C, 5 s (UHT, ultra high temperature treatment); gőzbefúvással áramló rendszerben nyomás alatt, rövid idejű kezelés miatt kevésbé roncsolja az élelmiszer szerves anyagait
Autoklávozás
121°C, 20 min; gőzzel fűtött autoklávban 1 atm túlnyomás alatt →
„teljes” sterilezés (endospórák is elpusztulnak, de prionok esetén 135°C, 20 min kell!)
Sterilitás vizsgálat
leforrasztott, zárt üvegampulla puha műanyag csőben, tápközeg van benne, mellette papírcsík endospórákkal → autokláv működésének ellenőrzése
Hideg
- Hűtés:
az enzimes folyamatok sebessége csökken, ezért a szaporodás csökken/leáll, de nincs mikrobicid (csak mikrobisztatikus) hatása → pszikrotoleráns mikrobák hűtőszekrényben (kb. 5°C) is szaporodhatnak. - Fagyasztás:
-10°C alatti hőmérséklet; mikrobisztázis, konzerválás; kivéve: lassú hűtés során nagy jégkristályok keletkeznek, melyek mechanikailag károsítják a sejtmembránt → fagyasztva tárolt élelmiszerek többszöri felengedése és visszafagyasztása tilos! - Liofilezés:
Fagyasztva szárítás; nincs mikrobicid hatása, de élelmiszerek tartósítására éppúgy használható (pl. instant kávé), mint mikrobatörzsek fenntartására.
Elektromágneses sugárzás
- UV sugárzás:
A légtérben és felületeken lévő vegetatív mikrobákat erős mutagén hatása révén megöli, de az emberi sejteket is károsítja (pl. bőrrák!); Áthatolóképessége szilárd és folyékony anyagokban nagyon rossz → germicid lámpa oltófülkékben - Ionizáló sugárzás:
A γ-sugárzás mutagenitása annyira erős, hogy sporocid (spóraölő) hatása is van → száraz élelmiszerek (pl. fűszerek) sterilezésére használható; nagy áthatolóképesség - Mikrohullámú sugárzás:
ún. mikrokláv; a sterilezés alapja a mikrohullámok hőhatása nedves közegekben.