Werkcolleges extra informatie Flashcards
Direct repair
Een enzym haalt bv de alkylatiegroep weg bij een guanine > daardoor bindt het bij replicatie aan thymine
Welk enzym herken de daughter strand bij mismatch repair bij E.coli (gekoppeld aan DNA synthese)
MutS
Welke excision repair is voor non helix distorting lesies en welke voor helix distorting lesies
Non helix-distorting lesies: Base excision repair
Helix-distorting lesies: Nucleotide excision repair
Welk enzym knipt bij Non-homologe end joining (NHEJ) de strands bij de DSB bij vóór ligatie?
Ku
In welke celstadia van de celcyclus kan homologe recombinatie voorkomen?
S fase of G2 fase
Welk enzym is betrokken bij SSB repair en wat gebeurt er bij een defect van dit enzym?
PARP1 > bij defect ontstaan er DSBs bij de SSBs.W
Waarom heeft een PARP-remmer alleen weinig effect?
Omdat er een homologe recombinatie mechanisme bestaat.
Endogene bronnen voor DNA schade?
ROS > reageren met DNA
Toxische stoffen van het metabolisme die wat met het DNA doen
ROS werking
Willen met alles reageren en elektronen wisselen > DNA breuken, mutaties en kapotte eiwitten (de oxiderende ROS zijn metabole bijproducten).
Exogene bronnen van DNA schade
-UV straling
-Ioniserende straling > strips elektronen van watermoleculen > ontstaan ROS
-Toxische stoffen als alcohol
Carcinogeen
Kankerverwekkende stof (reageren niet per se zelf met het DNA)
Procarcinogeen
Stof die door onze eigen cellen kan worden geconverteerd tot een carcinogeen > formatie van DNA-adducts bv door producten van roken
Chromothripsis
Uit elkaar vallen van chromosomen (grootschalige fragmentatie) > klein stuk chromosoom in kleine fragmenten geknipt en dan in foute volgorde terug geplakt
Aneuploidy
Verandering in aantallen van individuele chromosomen
Valt haploid ook onder polyploidy van kankercellen?
Ja
Nondisjunction
Geen seperatie van chromosomen bij deling
Welke genmutatie is vaak een start van een mutatieketen bij carcinomas?
Loss-of-function van APC
Wat is een kloon?
Een cel + alle dochtercellen van die cel
Expressie CD24 en CD44 bij CSCs bij een bepaalde soort kanker
Hoge CD24 en lage CD44
Ames test
Speciale test: je pakt wat bacteriën van salmonella strain die histidine moet hebben om te overleven
> platen op media met histidine in 2 groepen
> 1 groep in een mogelijke mutageen gemixt
> hoog aantal revertants die kunnen groeien zonder histamine omdat door mutageen een allel voor gen van histamine expressie wordt heractiveerd.
o Conclusie: het mogelijk mutageen is daadwerkelijk mutageen.
Ames test 2 (de tussenstap) voor detectie van ook pro-carcinogenen
Tussenstap bedacht: eiwitextract uit de lever toegevoegd voor eventuele omzetting pro-carcinogenen in carcinogenen in de buis.
Kenmerken senescenced cells
-Groot in oppervlak
-Secreteren pro-inflammatoire cytokines > stimulatie tumorigenesis
-metabool actief
-uit de celcyclus (dus niet in G0)
Factoren voor initiatie senescence
-Environment: missen contact
-Stress > bv oxidatieve schade
-Cdk inhibitors
Aantal replicaties van een cel in vitro hangt af van deze factoren:
-Tissue of origin
-Species
-Age of donor
Mechanismen voor limiteren van celreplicatie
-Accumulatie van fysiologische stress (eiwitexpressie)
-Het aantal delingen meten met telomeren
Fysiologische stress regulatie
-Overexpressie Cdk inhibitors door mutaties
> expressie p16, p21 > stoppen celcyclus
-Stress: meer zuurstof, lagere lifespan
accumulatie ROS en progressieve brakdown mitochondriale fucntie, senescence door oxidatieve schade
-p53
-andere factoren: chemotherapeutische drugs en x-rays