Vorlesung 6

Question 1

Urpsrung Mutationen

Answer 1

Replikationsfehler
Strahlung
Chemikalien
Transposition
fehlerkafte Rekombination
kann an allen Positionen der Base passieren; das allein DNA Schaden

Question 2

DNA Schaden vs Mutation

Answer 2

DNA-Schaden: geschädigte Base in DNA
Mutation: kann aus DNA Schaden entstehen, kann man nicht erkennen ohne Referenzseqzenz

Question 3

Mutationstypen

Answer 3

Basenaustuasch
Insertion Deletion
Chromosomen-Rearrangements
Chromosomen-Anzahl-Abbaeration

Question 4

Mutationsrate

Answer 4

10^-6 bis 10^-11

Question 5

Transition

Answer 5

Tuasch Purine/Pyrimidine untereinander
häufiger als Transversion
Kann durch DNA Schaden; Desaminierung passieren

Question 6

Transversion

Answer 6

Tausch von Purin mit Pyrimidin oder andersrum

Question 7

Mismatch Repair System

Answer 7

MutS, Dimer
seqeuenzunspezifisch
erkennt verzerrte DNA Helix
rutscht auf DNA rum
bindet bei Verzerrung ATP und rekrutiert MutL und MutH (Endonuclease)
NutH führt nick ein
wird druch DNA Pol III und Ligase repariert

Question 8

woher weiß mismatch repair system, was richtig

Answer 8

Dam-Methylase
im neuen Strang hemimythyliert
das wird erkannt

Question 9

Basenexzisionsreparatur

Answer 9

glycosidische Bindung gespalten, Glycosylase
Zucker p Rückgrat unversehrt
AP side
5’ von basenfreier Ribose gescnitten
mit Polymerase und Ligase aufgefüllt, azsgehend von neuem 3’ OH

Question 10

CpG INseln

Answer 10

stark erhähte Mutationsrate
im Poromotor von Genen
5-Methyl-Cytosin
kontrolliert Genexpression (Methyleirung)
Methyl-C kann leicht zu Thymin desaminiert werden –> Unterscheidung von richtigem Thymin nicht möglich

Question 11

UV-Schaden

Answer 11

UVA und UVB erzeiugen Cyclobutanringe
verzerrt DNA Struktur
Replikationsmeschinerei kommt nicht mehr fehelrfrei drüber
UVA sehr spezifisch: zwischen 2 benachbarten T
UVB: erzeugt mehr DNA SChäden, immer zwischen Pyrimidinen

Question 12

Reparatur Alkylierung

Answer 12

O6-Methylguanin-DNA Methyltransferase
SH (Cys) im aktiven Zentrum
übernimmt Methylgruppe
SH Gruppe methyliert
wird dabei inaktiviert, muss abgebaut werden
ist also eigentlich gar kein Enzym

Question 13

Basenanaloga

Answer 13

5 Bromuracil statt T, paart mit G!
falls in Enolform vorleirgend
GGW liegt nicht so stark auf Keto-Seite

Question 14

interkaliernde Substanzen

Answer 14

aus planaren RIngssystemen, flach
DNA wird gestreckt
DNA Polymerase “stottert”, baut zusätuzliche Nukleotide ein

Question 15

Alternativen zu Ethidiumbromid

Answer 15

Gelred
SYBRGreen
SYBRGold

Question 16

Ames Test

Answer 16

Grundprinzip: utationen beeinflussen Phönotyp eines Lebewesens
Mutationen können durch neue Mutaitonen aufgehoben werden: Reversion
aus Mutante wird Revertante
Salmonelle typhimorium Mutatante, His autotroph
misst die Anzahl an Revertanten = Maß für Mutagenität des Stoffes
Kontrolle nötig, Bakterien können spontan mutieren

Question 17

Mutationsrate

Answer 17

Wahrscheinlichkeit des Auftretens einer Mutation in einem Gen in jeder Generation

Question 18

Mutationshäufigkeit

Answer 18

Anzahl an Individuen einer Populatoin mit einer bestimmten Mutation; Frequenz einer bestimmten Mutation in einer Population

Question 19

Nachteile/ Grenzen Ames Test

Answer 19

in vitro-> verhaltne von Stoffen im Körper nicht simulierbar
Ames positiv, wenn His enthalten (BLutdrucksenker)
Mutagen für Bakterien nicht gleich bei Säugern
unklar, ob nur mutagen, oder auch cancerogen
viele cancerogene greifen spezificshe Sequenzen der DNA an, kommen evtll in Bakterien gar nicht vor