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Biología molecular > Vf. Métodos de transferencia de material genético > Flashcards

Vf. Métodos de transferencia de material genético Flashcards

1
Q

Son métodos de transferencia de material genético en bacterias:

A
  1. Conjugación
  2. Transducción
  3. Transformación
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Q

La conjugación es el proceso de transferencia _____________ de material genético entre una célula _________ donadora y una ___________ mediante el __________ _____________ o una conexión que las una:

A

Horizontal
Bacteriana
Receptora
Contacto directo

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Q

La conjugación fue descubierta por:

A

Lederberg y tatum, 1946

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4
Q

Lederberg y tatum en la conjugación, al sembrar dos cepas ________________ K12 de E. coli, se aislaban colonias _____________:

A

Auxótrofas
Protótrofas

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5
Q

La transducción es el proceso mediante el cual el _____________ es transferido de una _____________ a otra mediante un ______________ (partícula fágica ___________, pseudovirión):

A

ADN
Bacteria
Bacteriófago
transductora

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6
Q

El método de transferencia de material genético en bacterias; transducción, puede ser de dos formas:

A
  1. Generalizada
  2. Especializada
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7
Q

Tipo de transducción donde se da la transferencia de cualquier región del genoma bacteriano:

A

Generalizada

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8
Q

Tipo de transducción donde se da la transferencia de loci adyacentes al sitio de integración del profago:

A

Especializada

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9
Q

La transducción también se usa para designar al proceso por el cual el _______ _______ es introducido en una _________ mediante un __________ __________:

A

ADN exógeno
célula
vector viral

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10
Q

En la transducción el ________________ infecta a una bacteria y puede integrarse en el ___________ ___________ (profago) manteniendo el ciclo ___________ antes de activar el ciclo _________ (vegetativo)

A

Bacteriófago
Genoma bacteriano
Lisogénico
Lítico

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11
Q

El ADN puede integrarse al genoma de la bacteria por…

A

Recombinación sitio específica (homología de secuencia)

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12
Q

Cuando el ADN puede integrarse al genoma de la bacteria por recombinación sitio específica (homología de secuencia), éste puede permanecer en la bacteria ….

A

La nueva información genética de forma estable

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13
Q

La transformación es una ____________ hereditaria de una célula bacteriana susceptible, originada por la _____________ de ADN ___________ libre en el medio, con la posterior integración del ADN _______________ en el ______________ celular:

A

Variación
Captación
Desnudo
Exógeno
Genoma

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14
Q

Es cualquier célula que ha sido transformada:

A

Transformante

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15
Q

El principio de transformación lo propuso…

A

Griffith 1928

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16
Q

Una bacteria muerta se degrada y libera fragmentos de ADN al enterno, otra bacteria puede captar ese ADN:

A

transformación

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17
Q

La competencia es el estado fisiológico característico limitado en el tiempo que permite ________ ADN del medio _________, influido por ________ _________ como la densidad celular del cultivo, ___________, pH, nutrientes:

A

Captar
Exterior
Fcatores ambientales
temperatura

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18
Q

V o F, la competencia no es variable en cada especie que puede experimentar transformación:

A

Falso, sí es variable

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19
Q

V o F, la competencia está codificada en el genoma o es lograda de forma artificial:

A

Verdadero

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20
Q

La transformación es en células __________ y la transfección es en_______________:

A

Bacterianas
Eucariotas

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21
Q

El métodos de transferencia de material genético en bacterias; transformación, puede ser de dos formas:

A

Natural
Artificial

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22
Q

En la transformación _____________, algunas especies de bacterias cuentan con la ______________ específica para llevar el ______________ a través de la __________________. Codificada en los ___________ __________.

A

natural
maquinaria
ADN
membrana
genes celulares

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23
Q

La transformación __________ no se halla codificada en los _________ __________, sino que es inducida por procedimientos donde las células son convertidas en _________________ (competentes) a través de condiciones que normalmente no ocurren en la ____________:

A

Artificial
Genes celulares
Permeables
Naturaleza

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24
Q

V o F, muchas bacterias (células en general) carecen de sistemas naturales de transformación:

A

Verdadero

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25
En la transformación_____________ se ha conseguido inducir el estado de ____________ en células que no lo presentan de forma ____________, por ejemplo____________:
Artificial Competencia Natural E. coli
26
Las técnicas de transformación artificial se basa en tratamientos ____________ o _____________ que producen ______________ en la célula, lo que permite la introducción del ADN _______________ de modo eficiente:
Físicos Químicos Microporos Exógeno
27
Técnicas de la transformación artificial basadas en tratamientos físicos o químicos que producen microporos en la célula:
Química Microinyección Lipofección Electroporación Vectores virales Biobalística
28
En técnica química de transformación artificial, las células se incuban en ________ con el ADN ________ en presencia de ____________ divalentes como Ca+ (CaCl2) lo cual prepara a las ______________ celulares para ser __________ al ADN exógeno:
Hielo Exógeno Cationes Membranas Permeables
29
En la técnica química de transformación artificial, después de incubar las células en hielo con el ADN exógeno, ¿qué se realiza?
Enseguida las células se incuban a 42°C por 30 segundos, generando un shock térmico
30
En la técnica química de transformación artificial, el shock térmico causa:
ADN entre a la célula
31
En la técnica de microinyección de transformación artificial, bajo el microscopio se emplean:
Microagujas y micromanipuladores
32
En la técnica de lipofección de transformación artificial, el ADN se encapsula en _________ (vesículas esféricas compuestas de una doble capa de _________), las cuales se fusionan enseguida con la ____________ _______________:
Liposomas Fosfolípidos Membrana celular
33
En la técnica de electroporación de transformación artificial, hay un aumento de la _____________ de la membrana celular mediante aplicación de un _______________:
Permeabilidad Campo eléctrico
34
¿Qué voltaje se usa en la electroporación?
10-20kV/cm
35
V o F, una exposición excesiva a campos eléctricos puede ser soportada por la célula:
Falso, puede causar muerte celular
36
En la técnica de vectores virales de transformación artificial, se aprovecha la capacidad natural que tienen los ____________ de ingresar su información ____________ a la célula ___________:
Virus Genética Blanco
37
En la técnica de vectores virales de transformación artificial se seleccionar un ___________ adecuado en base a su ______________ y se fabrican (_________) conteniendo la información _________________ de interés:
Virus Estructura Pseudovirus Genética
38
V o F, los vectores virales pueden obstaculizar la replicación de un virus:
Verdadero
39
En la técnica de biobalística de transformación artificial se disparan a las células partículas de _________ o _________ cubiertas de ADN:
Oro Tungsteno
40
V o F, en la biobalística algo del material genético que se le disparó a las células se quedará y las transformará:
Verdadero
41
V o F, con la biobalística la eficiencia de transformación es muy alta:
Falso, es muy baja, pero la mayoría de plantas pueden ser transformadas con este método
42
¿Para qué se quiere incorporar ADN exógeno en una célula?
*Clonación in vivo del ADN exógeno *Producción y purificación de proteínas para la cual codifica dicha secuencia *Estudiar en la célula la expresión de formas alteradas de dicha proteína *Estudiar la carencia de proteínas específicas *Crear organismos genéticamente modificados *Terapia génica
43
Término que describe una variedad de procesos que pueden usarse para producir copias genéticamente idénticas de un ente biológico:
Clonación
44
La clonación puede ser de:
ADN o proteínas
45
La clonación de ADN puede ser:
In vitro: acelular (PCR) In vivo: celular
46
La clonación in vivo celular del ADN, es la ____________ de moléculas de ______________ _______________ mediante su introducción, asistida por _______________ en células en ______________:
Amplificación Ácido nucleico Vectores Cultivo
47
La clonación de proteínas usa estos dos sistemas:
Sistemas de traducción In vitro In vivo: celular
48
La clonación de proteínas in vivo celular es la producción de _______________ mediante la introducción asistida por _____________, en células en ____________, de la información genética requerida para la síntesis de dicha proteína:
proteínas vectores cultivo
49
En la clonación celular se requiere el empleo de:
Vectores
50
El vector es un ______________, una molécula de __________ cuya misión es unirse con el fragmento de ADN llamado _________________ para facilitar su entrada a la célula ________________:
Portador ADN Inserto Anfitriona
51
V o F, los vectores son elementos genéticos con capacidad auto replicante:
Verdadero
52
En los vectores, el inserto puede ser:
ADN genómico ADNc Producto de retrotranscripción del ARN Un producto de PCR
53
¿Cuáles son los aspectos que se deben considerar para seleccionar un vector?
Tamaño máximo del inserto que admiten Tipo de célula anfitriona en la que pueden incorporar el ADN recombinante Plásmidos
54
¿Cómo se clasifican los vectores?
Vector de clonación Vector de expresión
55
La finalidad del vector de _____________ es almacenar secuencias y permitir la obtención de grandes cantidades de__________________:
Clonación Inserto
56
V o F, el vector de expresión tiene capacidad de expresar el ADN recombinante:
Verdadero
57
El vector de expresión tiene como objetivo producir....
Un transcrito (ARN) o la proteína producto de ese transcrito
58
El vector de clonación tiene la característica de poseer _________ que le permitan mantener su __________ y la del ADN que transportan, independiente del ADN genómico:
Secuencias Replicación
59
El vector de clonación tiene la característica de poseer secuencias ______________ para un gen de _________. El producto del gen no debe de estar presente en el ____________ u _____________. Para métodos ________ o de selección fenotípica:
codificadoras selección tejido u organismo genéticos
60
El vector de clonación tiene la característica de poseer sitios múltiples de:
Clonación
61
Los sitios múltiples de clonación que poseen los vectores clonación permiten la _________ de sitios de __________________ para la clonación:
Selección restricción
62
Genes de resistencia:
Ampicilina
63
Genes reporteros:
Lac Z (B-galactosidasa) GFP (proteína verde fluorescente) Luciferasa
64
Genes que complementan defectos nutricionales en cepas mutantes:
E. coli TRP1, para crecer en un medio carente de Trp
65
Son algunas características adicionales que presenta el vector de expresión:
*Secuencias reguladoras *Promotor *Operador *Sitio de unión a ribosoma (SUR) *Secuencia de término de la transcripción (TT) *Secuencia de poliadenilación (eucariota) *Codón de inicio y de paro de la traducción
66
Secuencia de unión a ribosoma en procariotas:
Secuencia Shine-Dalgarno
67
Secuencia de unión a ribosoma en eucariotas:
Secuencia Kozak
68
V o F, la secuencia de término de la transcripción (TT) estabiliza el ARNm:
Verdadero
69
El vector pCMVTnT, es una región __________/____________ de CMV que permite una fuerte __________constitutiva en muchos tipos de células:
potenciadora promotora expresión
70
En el vector pCMVTnT hay un sitio de __________ de SV40 (virus ________ del simio)
poliadenilación vacoulado
71
V o F, el vector pCMVTnT tiene un sitio múltiple de clonación:
Verdadero
72
El vector pCMVTnT tiene promotores de fagos _______ y _______ para sistemas de transcripción/_________ in vitro:
SP6 T7 traducción
73
Procedimiento general para un vector:
1. Preparación del inserto 2. Preparación del vector 3. Preparación de la construcción o constructo final 4. Transformación 5. Selección de transformante 6. Propagación de transformantes 7. Purificación de vectores o proteínas recombinantes
74
La Preparación de la construcción o constructo final se refiere a:
Vector cargado con el inserto
75
En la preparación del inserto ¿qué sucede con el ADN?
Se corta con la o las enzimas de restricción adecuadas
76
El policonector o sitio múltiple de clonación (MCS) se usa en este paso:
Preparación del vector
77
En la preparación del vector el _________ o sitio __________ de clonación (________) permite emplear cualquier combinación de ____________ de _____________:
Policonector Múltiple MCS Enzimas de restricción
78
En el paso de _____________________ se da la unión covalente in vitro del inserto de ADN al vector cortado, empleando una __________________:
Preparación de la construcción Ligasa
79
La especificidad depende del tipo de :
Extremos
80
En la selección de __________, una vez que la célula _______ ha sido transformada, ésta se crece en medios de cultivo selectivos __________:
Transformantes Bacteriana Sólidos
81
Tipos de métodos para la selección de transformantes:
Métodos genéticos Métodos de selección fenotípica
82
En la selección de transformantes se usan levantamientos de colonias o placas por:
Hibridación: con sondas, detecta á. nucleicos Inmunohistoquímicos: con anticuerpos, detecta proteínas
83
En la propagación de transformantes se ______________ las colonias de interés y se crecen en medios _________________:
Seleccionan Líquidos
84
V o F, las bacterias solamente son resistentes al antibiótico y crecen si portan un plásmido:
Verdadero
85
La división de las células producirá junto con la ____________ de su genoma, la formación de copias del __________ que se haya incorporado y por lo tanto se lleva a cabo la _______________:
Replicación ADNr Clonación
86
Los vectores de __________ originarán la producción del __________/____________ de interés en la célula bacteriana ____________ (transfectada en____________)
Expresión Transcrito/proteína transformada eucariota
87
El vector plasmídico pUC18/_____ posee un gen de resistencia a _________ y el gen ________. El sitio múltiple de clonación (________) interrumpe el gen LacZ:
19 ampicilina LacZ MCS
88
El color azul confirma la actividad de la:
B-galactosidasa
89
V o F, x-gal es análogo de la lactosa:
Verdadero
90
Es el sustrato de B-galactosidasa-LacZ (5-bromo-4-cloro-3-indolil-B-D-galactopiraósido):
X-gal
91
La B-galactosidasa-LacZ hidroliza a X-gal en:
Galactosa y 5-bromo-4-cloro-3-hidroxindol
92
El 5-bromo-4-cloro-3-hidroxindol es oxidado a:
5,5´-dibromo-4,4´-dicloro-índico: compuesto azul insoluble
93
Es el inductor de la B-galactosidasa:
IPTG
94
El IPTG, es un análogo no________________ de la __________________ que es un metabolito isómero de la lactosa, que dispara la transcripción del operón__________________:
Hidrolizable Alolactosa Lac
95
La ampicilina no permite el crecimiento de las colonias bacterianas que no portan el _________________ de resistencia que posee el vector_________:
Gen pUC18
96
¿Para qué codifca el gen LacZ?
B-galactosidasa
97
B-galactosidasa hidroliza a _______ y genera colonias color_______
X-gal azul
98
El crecimiento de las colonias color azul indican que fueron transformadas con el __________ y poseen el gen de resistencia a _________, LacZ, es activo porque el vector se halla ________ y no posee el _________ deseado:
pUC18 ampicilina vacío inserto
99
El crecimiento de las colonias color blanco indican que fueron transformadas con el __________ y poseen el gen de resistencia a _________, el gen LacZ ha sido__________ por el inserto en el________. El producto génico (_________) es inactivo y no puede hidrolizar a _______ al ser inducida su producción por el IPTG. Por lo tanto las colonias no presenta coloración_________:
pUC18 ampicilina interrumpido MCS B-galactosidasa X-gal azul

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