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Biología molecular > Vf. Métodos de transferencia de material genético > Flashcards

Vf. Métodos de transferencia de material genético Flashcards

1
Q

Son métodos de transferencia de material genético en bacterias:

A
  1. Conjugación
  2. Transducción
  3. Transformación
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Q

La conjugación es el proceso de transferencia _____________ de material genético entre una célula _________ donadora y una ___________ mediante el __________ _____________ o una conexión que las una:

A

Horizontal
Bacteriana
Receptora
Contacto directo

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Q

La conjugación fue descubierta por:

A

Lederberg y tatum, 1946

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4
Q

Lederberg y tatum en la conjugación, al sembrar dos cepas ________________ K12 de E. coli, se aislaban colonias _____________:

A

Auxótrofas
Protótrofas

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5
Q

La transducción es el proceso mediante el cual el _____________ es transferido de una _____________ a otra mediante un ______________ (partícula fágica ___________, pseudovirión):

A

ADN
Bacteria
Bacteriófago
transductora

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6
Q

El método de transferencia de material genético en bacterias; transducción, puede ser de dos formas:

A
  1. Generalizada
  2. Especializada
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7
Q

Tipo de transducción donde se da la transferencia de cualquier región del genoma bacteriano:

A

Generalizada

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8
Q

Tipo de transducción donde se da la transferencia de loci adyacentes al sitio de integración del profago:

A

Especializada

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9
Q

La transducción también se usa para designar al proceso por el cual el _______ _______ es introducido en una _________ mediante un __________ __________:

A

ADN exógeno
célula
vector viral

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10
Q

En la transducción el ________________ infecta a una bacteria y puede integrarse en el ___________ ___________ (profago) manteniendo el ciclo ___________ antes de activar el ciclo _________ (vegetativo)

A

Bacteriófago
Genoma bacteriano
Lisogénico
Lítico

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11
Q

El ADN puede integrarse al genoma de la bacteria por…

A

Recombinación sitio específica (homología de secuencia)

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12
Q

Cuando el ADN puede integrarse al genoma de la bacteria por recombinación sitio específica (homología de secuencia), éste puede permanecer en la bacteria ….

A

La nueva información genética de forma estable

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13
Q

La transformación es una ____________ hereditaria de una célula bacteriana susceptible, originada por la _____________ de ADN ___________ libre en el medio, con la posterior integración del ADN _______________ en el ______________ celular:

A

Variación
Captación
Desnudo
Exógeno
Genoma

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14
Q

Es cualquier célula que ha sido transformada:

A

Transformante

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15
Q

El principio de transformación lo propuso…

A

Griffith 1928

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16
Q

Una bacteria muerta se degrada y libera fragmentos de ADN al enterno, otra bacteria puede captar ese ADN:

A

transformación

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17
Q

La competencia es el estado fisiológico característico limitado en el tiempo que permite ________ ADN del medio _________, influido por ________ _________ como la densidad celular del cultivo, ___________, pH, nutrientes:

A

Captar
Exterior
Fcatores ambientales
temperatura

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18
Q

V o F, la competencia no es variable en cada especie que puede experimentar transformación:

A

Falso, sí es variable

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19
Q

V o F, la competencia está codificada en el genoma o es lograda de forma artificial:

A

Verdadero

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20
Q

La transformación es en células __________ y la transfección es en_______________:

A

Bacterianas
Eucariotas

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21
Q

El métodos de transferencia de material genético en bacterias; transformación, puede ser de dos formas:

A

Natural
Artificial

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22
Q

En la transformación _____________, algunas especies de bacterias cuentan con la ______________ específica para llevar el ______________ a través de la __________________. Codificada en los ___________ __________.

A

natural
maquinaria
ADN
membrana
genes celulares

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23
Q

La transformación __________ no se halla codificada en los _________ __________, sino que es inducida por procedimientos donde las células son convertidas en _________________ (competentes) a través de condiciones que normalmente no ocurren en la ____________:

A

Artificial
Genes celulares
Permeables
Naturaleza

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24
Q

V o F, muchas bacterias (células en general) carecen de sistemas naturales de transformación:

A

Verdadero

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25
Q

En la transformación_____________ se ha conseguido inducir el estado de ____________ en células que no lo presentan de forma ____________, por ejemplo____________:

A

Artificial
Competencia
Natural
E. coli

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26
Q

Las técnicas de transformación artificial se basa en tratamientos ____________ o _____________ que producen ______________ en la célula, lo que permite la introducción del ADN _______________ de modo eficiente:

A

Físicos
Químicos
Microporos
Exógeno

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27
Q

Técnicas de la transformación artificial basadas en tratamientos físicos o químicos que producen microporos en la célula:

A

Química
Microinyección
Lipofección
Electroporación
Vectores virales
Biobalística

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28
Q

En técnica química de transformación artificial, las células se incuban en ________ con el ADN ________ en presencia de ____________ divalentes como Ca+ (CaCl2) lo cual prepara a las ______________ celulares para ser __________ al ADN exógeno:

A

Hielo
Exógeno
Cationes
Membranas
Permeables

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29
Q

En la técnica química de transformación artificial, después de incubar las células en hielo con el ADN exógeno, ¿qué se realiza?

A

Enseguida las células se incuban a 42°C por 30 segundos, generando un shock térmico

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30
Q

En la técnica química de transformación artificial, el shock térmico causa:

A

ADN entre a la célula

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31
Q

En la técnica de microinyección de transformación artificial, bajo el microscopio se emplean:

A

Microagujas y micromanipuladores

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32
Q

En la técnica de lipofección de transformación artificial, el ADN se encapsula en _________ (vesículas esféricas compuestas de una doble capa de _________), las cuales se fusionan enseguida con la ____________ _______________:

A

Liposomas
Fosfolípidos
Membrana celular

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33
Q

En la técnica de electroporación de transformación artificial, hay un aumento de la _____________ de la membrana celular mediante aplicación de un _______________:

A

Permeabilidad
Campo eléctrico

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34
Q

¿Qué voltaje se usa en la electroporación?

A

10-20kV/cm

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35
Q

V o F, una exposición excesiva a campos eléctricos puede ser soportada por la célula:

A

Falso, puede causar muerte celular

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36
Q

En la técnica de vectores virales de transformación artificial, se aprovecha la capacidad natural que tienen los ____________ de ingresar su información ____________ a la célula ___________:

A

Virus
Genética
Blanco

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37
Q

En la técnica de vectores virales de transformación artificial se seleccionar un ___________ adecuado en base a su ______________ y se fabrican (_________) conteniendo la información _________________ de interés:

A

Virus
Estructura
Pseudovirus
Genética

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38
Q

V o F, los vectores virales pueden obstaculizar la replicación de un virus:

A

Verdadero

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39
Q

En la técnica de biobalística de transformación artificial se disparan a las células partículas de _________ o _________ cubiertas de ADN:

A

Oro
Tungsteno

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40
Q

V o F, en la biobalística algo del material genético que se le disparó a las células se quedará y las transformará:

A

Verdadero

41
Q

V o F, con la biobalística la eficiencia de transformación es muy alta:

A

Falso, es muy baja, pero la mayoría de plantas pueden ser transformadas con este método

42
Q

¿Para qué se quiere incorporar ADN exógeno en una célula?

A

*Clonación in vivo del ADN exógeno
*Producción y purificación de proteínas para la cual codifica dicha secuencia
*Estudiar en la célula la expresión de formas alteradas de dicha proteína
*Estudiar la carencia de proteínas específicas
*Crear organismos genéticamente modificados
*Terapia génica

43
Q

Término que describe una variedad de procesos que pueden usarse para producir copias genéticamente idénticas de un ente biológico:

A

Clonación

44
Q

La clonación puede ser de:

A

ADN o proteínas

45
Q

La clonación de ADN puede ser:

A

In vitro: acelular (PCR)
In vivo: celular

46
Q

La clonación in vivo celular del ADN, es la ____________ de moléculas de ______________ _______________ mediante su introducción, asistida por _______________ en células en ______________:

A

Amplificación
Ácido nucleico
Vectores
Cultivo

47
Q

La clonación de proteínas usa estos dos sistemas:

A

Sistemas de traducción In vitro
In vivo: celular

48
Q

La clonación de proteínas in vivo celular es la producción de _______________ mediante la introducción asistida por _____________, en células en ____________, de la información genética requerida para la síntesis de dicha proteína:

A

proteínas
vectores
cultivo

49
Q

En la clonación celular se requiere el empleo de:

A

Vectores

50
Q

El vector es un ______________, una molécula de __________ cuya misión es unirse con el fragmento de ADN llamado _________________ para facilitar su entrada a la célula ________________:

A

Portador
ADN Inserto
Anfitriona

51
Q

V o F, los vectores son elementos genéticos con capacidad auto replicante:

A

Verdadero

52
Q

En los vectores, el inserto puede ser:

A

ADN genómico
ADNc
Producto de retrotranscripción del ARN
Un producto de PCR

53
Q

¿Cuáles son los aspectos que se deben considerar para seleccionar un vector?

A

Tamaño máximo del inserto que admiten
Tipo de célula anfitriona en la que pueden incorporar el ADN recombinante
Plásmidos

54
Q

¿Cómo se clasifican los vectores?

A

Vector de clonación
Vector de expresión

55
Q

La finalidad del vector de _____________ es almacenar secuencias y permitir la obtención de grandes cantidades de__________________:

A

Clonación
Inserto

56
Q

V o F, el vector de expresión tiene capacidad de expresar el ADN recombinante:

A

Verdadero

57
Q

El vector de expresión tiene como objetivo producir….

A

Un transcrito (ARN) o la proteína producto de ese transcrito

58
Q

El vector de clonación tiene la característica de poseer _________ que le permitan mantener su __________ y la del ADN que transportan, independiente del ADN genómico:

A

Secuencias
Replicación

59
Q

El vector de clonación tiene la característica de poseer secuencias ______________ para un gen de _________. El producto del gen no debe de estar presente en el ____________ u _____________. Para métodos ________ o de selección fenotípica:

A

codificadoras
selección
tejido u organismo
genéticos

60
Q

El vector de clonación tiene la característica de poseer sitios múltiples de:

A

Clonación

61
Q

Los sitios múltiples de clonación que poseen los vectores clonación permiten la _________ de sitios de __________________ para la clonación:

A

Selección
restricción

62
Q

Genes de resistencia:

A

Ampicilina

63
Q

Genes reporteros:

A

Lac Z (B-galactosidasa)
GFP (proteína verde fluorescente)
Luciferasa

64
Q

Genes que complementan defectos nutricionales en cepas mutantes:

A

E. coli TRP1, para crecer en un medio carente de Trp

65
Q

Son algunas características adicionales que presenta el vector de expresión:

A

*Secuencias reguladoras
*Promotor
*Operador
*Sitio de unión a ribosoma (SUR)
*Secuencia de término de la transcripción (TT)
*Secuencia de poliadenilación (eucariota)
*Codón de inicio y de paro de la traducción

66
Q

Secuencia de unión a ribosoma en procariotas:

A

Secuencia Shine-Dalgarno

67
Q

Secuencia de unión a ribosoma en eucariotas:

A

Secuencia Kozak

68
Q

V o F, la secuencia de término de la transcripción (TT) estabiliza el ARNm:

A

Verdadero

69
Q

El vector pCMVTnT, es una región __________/____________ de CMV que permite una fuerte __________constitutiva en muchos tipos de células:

A

potenciadora
promotora
expresión

70
Q

En el vector pCMVTnT hay un sitio de __________ de SV40 (virus ________ del simio)

A

poliadenilación
vacoulado

71
Q

V o F, el vector pCMVTnT tiene un sitio múltiple de clonación:

A

Verdadero

72
Q

El vector pCMVTnT tiene promotores de fagos _______ y _______ para sistemas de transcripción/_________ in vitro:

A

SP6
T7
traducción

73
Q

Procedimiento general para un vector:

A
  1. Preparación del inserto
  2. Preparación del vector
  3. Preparación de la construcción o constructo final
  4. Transformación
  5. Selección de transformante
  6. Propagación de transformantes
  7. Purificación de vectores o proteínas recombinantes
74
Q

La Preparación de la construcción o constructo final se refiere a:

A

Vector cargado con el inserto

75
Q

En la preparación del inserto ¿qué sucede con el ADN?

A

Se corta con la o las enzimas de restricción adecuadas

76
Q

El policonector o sitio múltiple de clonación (MCS) se usa en este paso:

A

Preparación del vector

77
Q

En la preparación del vector el _________ o sitio __________ de clonación (________) permite emplear cualquier combinación de ____________ de _____________:

A

Policonector
Múltiple
MCS
Enzimas de restricción

78
Q

En el paso de _____________________ se da la unión covalente in vitro del inserto de ADN al vector cortado, empleando una __________________:

A

Preparación de la construcción
Ligasa

79
Q

La especificidad depende del tipo de :

A

Extremos

80
Q

En la selección de __________, una vez que la célula _______ ha sido transformada, ésta se crece en medios de cultivo selectivos __________:

A

Transformantes
Bacteriana
Sólidos

81
Q

Tipos de métodos para la selección de transformantes:

A

Métodos genéticos
Métodos de selección fenotípica

82
Q

En la selección de transformantes se usan levantamientos de colonias o placas por:

A

Hibridación: con sondas, detecta á. nucleicos
Inmunohistoquímicos: con anticuerpos, detecta proteínas

83
Q

En la propagación de transformantes se ______________ las colonias de interés y se crecen en medios _________________:

A

Seleccionan
Líquidos

84
Q

V o F, las bacterias solamente son resistentes al antibiótico y crecen si portan un plásmido:

A

Verdadero

85
Q

La división de las células producirá junto con la ____________ de su genoma, la formación de copias del __________ que se haya incorporado y por lo tanto se lleva a cabo la _______________:

A

Replicación
ADNr
Clonación

86
Q

Los vectores de __________ originarán la producción del __________/____________ de interés en la célula bacteriana ____________ (transfectada en____________)

A

Expresión
Transcrito/proteína
transformada
eucariota

87
Q

El vector plasmídico pUC18/_____ posee un gen de resistencia a _________ y el gen ________. El sitio múltiple de clonación (________) interrumpe el gen LacZ:

A

19
ampicilina
LacZ
MCS

88
Q

El color azul confirma la actividad de la:

A

B-galactosidasa

89
Q

V o F, x-gal es análogo de la lactosa:

A

Verdadero

90
Q

Es el sustrato de B-galactosidasa-LacZ (5-bromo-4-cloro-3-indolil-B-D-galactopiraósido):

A

X-gal

91
Q

La B-galactosidasa-LacZ hidroliza a X-gal en:

A

Galactosa y 5-bromo-4-cloro-3-hidroxindol

92
Q

El 5-bromo-4-cloro-3-hidroxindol es oxidado a:

A

5,5´-dibromo-4,4´-dicloro-índico: compuesto azul insoluble

93
Q

Es el inductor de la B-galactosidasa:

A

IPTG

94
Q

El IPTG, es un análogo no________________ de la __________________ que es un metabolito isómero de la lactosa, que dispara la transcripción del operón__________________:

A

Hidrolizable
Alolactosa
Lac

95
Q

La ampicilina no permite el crecimiento de las colonias bacterianas que no portan el _________________ de resistencia que posee el vector_________:

A

Gen
pUC18

96
Q

¿Para qué codifca el gen LacZ?

A

B-galactosidasa

97
Q

B-galactosidasa hidroliza a _______ y genera colonias color_______

A

X-gal
azul

98
Q

El crecimiento de las colonias color azul indican que fueron transformadas con el __________ y poseen el gen de resistencia a _________, LacZ, es activo porque el vector se halla ________ y no posee el _________ deseado:

A

pUC18
ampicilina
vacío
inserto

99
Q

El crecimiento de las colonias color blanco indican que fueron transformadas con el __________ y poseen el gen de resistencia a _________, el gen LacZ ha sido__________ por el inserto en el________. El producto génico (_________) es inactivo y no puede hidrolizar a _______ al ser inducida su producción por el IPTG. Por lo tanto las colonias no presenta coloración_________:

A

pUC18
ampicilina
interrumpido
MCS
B-galactosidasa
X-gal
azul

Biología molecular (19 decks)

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