Vb. Enzimas de restricción, ligasas y polimerasas Flashcards
Son enzimas de restricción
Nucleasas
Ligasas
Polimerasas
¿Cómo cortan o degradan los ácidos nucleicos las nucleasas?
Hidrolizan el enlace fosfodiéster de nucleótidos continuos
Son las endonucleasas de restricción
Endodeoxirribonucleasas (Cortan DNA de doble cadena)
Sistema de defensa bacteriano contra los patógenos, protegiéndolas de ADN foráneo
Sistema de restricción-modificación
Proceso del sistema de restricción-modificación donde endonucleasas corta ADN doble cadena dentro o fuera de la secuencia de reconocimiento
Restricción
Proceso del sistema de restricción-modificación donde metilasas modifican ADN metilando determinada base DENTRO de la secuencia de reconocimiento
Metilación
El sistema de restricción-modificación distingue el DNA propio (_________) del fago (DNA _________) para proteger su propio ADN
Metilado
No metilado
V o F. Las nucleasas y metilasas reconocen distintas secuencias de bases
Falso, reconocen la misma
Cuando se metilan las dos hebras de DNA se evita que la ___________ pueda cortar la molécula de DNA
Enzima de restricción
V o F. La metilación protege al ADN genómico y plasmídico bacteriano del ataque de sus propias enzimas
Verdadero
V o F. El sistema de restricción-metilación sirve como sistema inmune
Verdadero
¿Cuáles son los 2 tipos de corte de las enzimas de restricción cuando es la digestión?
Extremos cohesivo o pegajosos
Extremos abruptos (romo)
¿Cómo cortan los extremos cohesivos o pegajosos?
De manera escalonada
V o F. Los fragmentos de los extremos cohesivos o pegajosos pueden ser ligados nuevamente
Verdadero, a pesar de que provengan de la digestión de 2 secuencias diferentes
Los fragmentos de los extremos cohesivos o pegajosos pueden ser ligados nuevamente y crear un…
DNA recombinante
Tipo de corte de enzima de restricción que corta en un solo punto en ambas cadenas
Extremos abruptos (romos)
Los isoesquizómeros son distintas____________ que reconocen la ________ secuencia con diferentes especifidades de corte
enzimas de restricción
misma
V o F. Los isoesquizómeros generan distintas secuencias a pesar de que las enzimas de restricción reconozcan la misma secuencia
Verdadero
Enzimas de restricción que reconocen distintas secuencias, pero dejan los mismos extremos
Enzimas con extremos compatibles
El mapa de restricción muestra en una______________________ todos los posibles sitios de __________ para las enzimas de restricción conocidas
Secuencia de bases
Cortes
V o F. El mapa de restricción permite seleccionar la enzima adecuada para editar la secuencia original y al final obtener la secuencia deseada
Verdadero
V o F. Los sitios de reconocimientos de enzimas de restricción pueden alterarse por variación en la secuencia de DNA
Verdadero
La variación de la secuencia de DNA es inherente en_________ o puede deberse a ___________
Regiones polimórficas
Mutación
Los polimorfismo varían entre individuos y además sirven como…
Marcadores genéticos
Son segmentos de DNAds producidos por una endonucleasa de restricción sobre un DNA más largo
Fragmentos de restricción (RFLPs)
¿Cuáles son los 5 pasos para obtener los fragmentos de restricción?
- Extraer DNA de diferentes individuos
- Amplificar la secuencia polimórfica/mutante por PCR
- Digestión por varias enzimas de restricción
- Electroforesis en gel de agarosa: Separar e identificar los fragmentos y sus longitudes
- Interpretación
Un sitio de restricción (_______________) puede estar genéticamente ligado a una__________ que lo produce
Marcador genético
Mutación
V o F. Las RFLPS no se usan en el diagnóstico de enfermedades y pruebas de paternidad
Falso, si se usa
Enzima que su función es corregir discontinuidades de la hebra de DNA generadas en la replicación
Ligasas
¿Cuál es el papel de la ligasa en la biología molecular?
Cataliza la unión de fragmentos distintos de DNA (ya sea en extremos romos o cohesivos) generando el DNA recombinante
Tipos de enlaces que forman las ligasas en el extremo 5’-p de una cadena polinucleótida y el extremo 3’-OH
Enlaces covalentes
¿A qué es necesario que se una la ligasa para formar el enlace fosfodiéster?
AMP
La ligación de extremos cohesivos requieren ___________ de secuencia, mientras que los romos no las requieren
complementariedad
V o F. La eficiencia de ligación de extremos cohesivos es menor que la de extremos romos
Falso, es mayor
El filling in usa una____________ para el nucleótido ____________
Cadena molde
complentario
Tipo de DNA polimerasa que son requeridas para ciclos repetitivos de desnaturalización y polimerización del DNA
DNA polimerasa termoestable
V o F. Las DNA polimerasas termoestables provienen de organismos cuyas enzimas son resistentes a las altas temperaturas
Verdadero
DNA Polimerasa termoestables que son correctoras de errores
Pfu
Tli
Fragmento de Klenow
