Vetores - YAC Flashcards
YAC - Yeast
Leveduras → Saccharomyces cerevisiae
YAC - Clonar inserto de até:
1~2mb / 1~2 milhões pb
YAC - Se você for usar um BAC, que suporta até 300 mil, temos que usar o YAC, mas é se não tivermos?
Podemos utilizar vários BACs ou até mesmo outros tipos.
YAC - Composição 3
CEN → Centrômero
TEL → Telômero
ARS → Sequência de Replicação Autônoma de Leveduras
YAC - Região Centromérica → Importante para:
Vetor → permanecer de forma única dentro da célula → dando estabilidade na replicação → para que cada célula filha receba o YAC.
YAC - Telômeros → Função 2
Impede o encurtamento
Proteger da degradação → enzima BamHI
YAC - ARS
ARS → ?
O que é? → ?
YAC - ARS
ARS → Sequência de Replicação Autônoma de Leveduras
O que é? → Origem de replicação
YAC - Levedura → O que é?
Eucarioto Inferior
Levedura - Importância 2
Proteínas → bastante semelhança com as de células de mamíferos → também com semelhança na funcionalidade.
Podemos utilizar leveduras para estudar células de mamíferos → porque células de mamíferos são muito caras para serem utilizadas diretamente.
YAC - Vantagem
Podem ser clonados → genes humanos inteiros
YAC - Desvantagens 2
Estabilidade → são menos estáveis que BAC
Devido ao tamanho do vetor → Podem perder ele.
YAC - Métodos de Seleção 3
URA3 → uracila
TRP1 → triptofano
AMP^r
Levedura - Naturalmente
Não produz triptofano e nem uracila → devemos adicionar artificialmente.
Quem recebe o vetor → Irão conseguir produzir uracila e triptofano → e isso nos permite selecionar as células.
YAC - Marcas de Seleção 3
Triptofano / Uracila → estratégia que o vetor da para a célula produzir ambos
AMP
AMP - Colocada no meio
Cultura que cresceu no meio → irá ter resistência ao ATB.