Plasmídeo de Expressão ​ Flashcards

1
Q

Plasmídeo de Expressão - Uso

A

Quando se deseja expressar / produzir proteínas.

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
2
Q

Plasmídeo de Expressão vs Plasmídeo de Clonagem

A

Possui os elementos normais do plasmídeo de clonagem (3 primeiros ítens do slide) + a Região Promotora

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
3
Q

Plasmídeo de Expressão - Elementos 4

A

ORI → Origem de Replicação

Gene que confere resistência a antibióticos (amp^R)

Polilynker / MSC → Mútiplos Sítios de Clonagem

Região Promotora

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
4
Q

Plasmídeo de Expressão - Polilynker / MSC → Função

A

Interrompe o gene Lac Z

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
5
Q

Gene Lac Z - Função

A

Produz enzima B-galactosidade

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
6
Q

Plasmídeo de Expressão - Polilynker / MSC → Contém

A

As Enzimas de Restrição

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
7
Q

Se tu coloca o o polylinker / MSC que interrompe o Gene Lac:

A

Ele não é expresso → e a bactéria não desenvolve a enzima que o Lac Z produz (B-galactosidade).

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
8
Q

Plasmídeo de Expressão - Região Promotora

A

Localizada antes do Gene Lac Z.

Para ser sintetizado → RNApol → reconhece a região promotora do gene Lac Z.

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
9
Q

Região Promotora - Inibida / Induzida

Inibida → ? → ?

Induzida → ? → ?

A

Região Promotora - Inibida / Induzida

Inibida → não é reconhecida → não ocorre a produção da proteína à partir do gene

Induzida → reconhecida e ativada → ocorre a produção da proteína à partir do gene

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
10
Q

IPTG - O que é?

A

Indutor sintético da expressão do gene Lac Z.

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
11
Q

Plasmídeo de Expressão - Seleção dos Transformantes → Forma diferente:

A

Por X-gal.

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
12
Q

Plasmídeo de Expressão - Seleção dos Transformantes → Importância

A

Nem todas as bactérias que receberam o plasmídeo receberam o plasmídeo com inserto que confere resistência ao antibiótico → precisamos descobrir quem recebeu e quem não recebeu → e por isso utilizamos o X-gal.

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly