Sondas Marcadas Flashcards
Sondas Marcadas - O que irá ocorrer?
Realizaremos → O screamy.
Screamy - O que é? / Objetivo
Seleção do fago recombinante que está com inserto de interesse
Seleção dentre as placas de lise formadas → para determinar qual delas tem o fago que tem o gene de interesse.
Sondas Marcadas - Procedimento
Papel Filtro → faço carimbo.
Pego o meu papel filtro e faço procedimento:
Tratamento com solução alcalina → NaOH
Restando → uma membrana seca (filtro)
NaOH - Objetivos 2
Lisar a cabeça do fago
Desnaturar o DNA
NaOH - Objetivos → Ao realizar a desnaturação do DNA:
Separar a dupla fita → fazendo com que a fita dupla vire fita simples.
Sondas Marcadas - Uma vez tratado o filtro com NaOH:
Secamos essa membrana e a colocamos em contato com a sonda → para fixar o DNA.
Sondas → se ligam no papel filtro por inteiro.
Lavamos o papel filtro para remover as sondas que estão localizadas inespecificamente neste papel.
Após lavarmos o papel filtro, a sonda deve ser → Marcada
Sonda é maraca para → Fazer o filme.
Marcação - Importância
Ainda não estávamos vendo nada.