Extração de DNA Plasmidial Flashcards
Extração de DNA Plasmidial - Simplificando
Eu quero muito inserto → amplifico seu número → e os retiro das bactérias.
Usa um fragmento da colônia → coloca no Erlenmeyer → overnight → aumenta quantidade → extração de DNA Plasmidial.
DNA Plasmidial - Purificação
Purificado com enzimas de Restrição
Extração de DNA Plasmidial - Para extrair, antes:
E. coli → inoculada no meio de cultura.
Após seu crescimento → centriugamos → para obter o Pellet.
Pellet - O que é?
É o precipitado.
Centrifugação - O que ocorre?
Separa o meio de cultura do pellet.
Centrifugação - Após a centrifugação: 2
Jogamos fora → o meio.
Ficamos → com o pellet.
Pellet - Após o obter → Etapas 4
Lise Alcalina
Separação DNA Plasmidial
Desnaturação das Proteínas Restantes
Precipitação do DNA Plasmidial