Extração de DNA Plasmidial ​ Flashcards

1
Q

Extração de DNA Plasmidial - Simplificando

A

Eu quero muito inserto → amplifico seu número → e os retiro das bactérias.

Usa um fragmento da colônia → coloca no Erlenmeyer → overnight → aumenta quantidade → extração de DNA Plasmidial.

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
2
Q

DNA Plasmidial - Purificação

A

Purificado com enzimas de Restrição

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
3
Q

Extração de DNA Plasmidial - Para extrair, antes:

A

E. coli → inoculada no meio de cultura.

Após seu crescimento → centriugamos → para obter o Pellet.

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
4
Q

Pellet - O que é?

A

É o precipitado.

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
5
Q

Centrifugação - O que ocorre?

A

Separa o meio de cultura do pellet.

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
6
Q

Centrifugação - Após a centrifugação: 2

A

Jogamos fora → o meio.

Ficamos → com o pellet.

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
7
Q

Pellet - Após o obter → Etapas 4

A

Lise Alcalina

Separação DNA Plasmidial

Desnaturação das Proteínas Restantes

Precipitação do DNA Plasmidial

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly