Colônias - Azul e Branca Flashcards
Colônia Azul - Gerada através de:
Uma bactéria que recebeu o plasmídeo → mas vazio, sem inserto.
Colônia Branca - Gerada através de:
Uma bactéria que recebeu o plasmídeo → com inserto.
Plasmídeo de Expressão Vazio - Por que existe?
Tem inserto para todo mundo → mas a EcoRI → corta o plasmídeo → abrindo ele → liberalizando-o → permitindo 2 coisas.
Plasmídeo de Expressão Vazio - Por que existe? → DNAligase permite: 2
Com que o inserto se ligue → e as DNAligase liguem eles
Com que as DNAligases → liguem novamente as partes abertas do plasmídeo uma na outra → recircularizando ele.
Plasmídeo de Expressão Vazio - Solução
Utilizar para tratar 2 enzimas diferentes
Plasmídeo de Expressão Vazio - Solução → Enzimas 2
Sal I
EcoRI
Plasmídeo de Expressão Vazio - Solução → Consequência
Criamos 2 sítios não complementares que não podem se ligar de novo → mas ambos podem se ligar ao inserto e serem ligados ao inserto pela DNAligase.