Bacteriófagos - Clonagem Flashcards
Fragmento Centeal - Remoção
Enzimas de Restrição.
Fragmento Central - Remoção → Enzimas de Restrição 3
Sal I
Bam HI
Eco RI
Ao substituir o fragmento central pelo inserto:
Utilizamos esse espaço para a inserção do nosso inserto.
Após retirar o fragmento central e adicionar o inserto:
Braços Direito e Esquerdo do Fago Lambda → são incubados com inserto exógenos em presença de DNAlig.
Após incubar insertos exógenos:
Ocorre o empacotamento → Sistema de Embalagem in vitro
Empacotamento - O que ocorre?
Entrada da molécula de DNA recombinante do fago no capsídeo do vírus.
Empacotamento - Como?
Vírus → se acopla às bactérias através de suas fímbrias → e injeta através da cauda (como uma seringa) o seu DNA no interior das células.
Uma vez dentro da célula hospedeira:
Genoma Viral → aproveita o metabolismo bacteriano para sua propagação.
Uma vez dentro da bactéria:
Genoma do vírus → pode fazer 2 vias → Via Lítica / Via Lisogênica.