Seleção dos Fagos Recombinantes Flashcards
Papel Absorvente - O que é?
Papel que será utilizado para a seleção.
Sonda - O que é?
Pequeno segmento de DNA com sequências complementares ao inserto
Seleção dos Fagos - 1º Passo
Colocamos um papel absorvente em cima da placa que iremos trabalhar → fazendo como um carimbo.
Ao fazer como se fosse um carimbo → Parte das placas de lise irão se transferir para o papel.
Após parte das placas de lise se transferirem ao papel → Utilizamos a sonda → colocando-a sobre as placas de lise no papel absorvente.
Ao colocar a sonda sob e as placas de lise no papel absorvente → Essa sondas iria se ligar aos insertos por complementariedade de base → elas irão hibridizar.
Pegamos esse papel → e fazemos um filme radiográfico.
Ao fazer o filme radiográfico → Onde a sonda se ligou → mancha de preto.
Após obter a mancha → Comparamos a cultura ao filme radiográfico.
Hibridização de Moléculas de DNA
Fitas 5’ 3’ → ao serem aproximadas → criam pontes de hidrogênio que se complementam.
Marcação - Importância
Para nós permitir identificar na placa onde está o local que foi manchado ao passar o papel filtro pelo filme radiográfico.
