Séance K- viabilité cellulaire et cytokines Flashcards
c’est quoi une cytokine
médiateurs inflammatoires sécrétés par les cellules immunitaires
4 catégories de cytokines
1) facteurs de croissance
2) chimioattractant
3) prolifération cellulaire
4) différentiation cellulaire
rôle de l’IL-2
prolifération des lymphocytes qui agit de façon paracrine et autocrine
4 rôles de la cytokine TNF-alpha
angiogénèse
activation des cellules endothéliales
Production de médiateurs lipidiques
Libération de cytokines pro-inflammatoires
2 méthodes de détection de l’IL-2
1) ELISA
2) cytométrie en flux/ bioplex
3 méthodes pour tester la viabilité cellulaire
1) bleu de trypan
2) marquage annexine V et IP
3) test MTT
à quoi sert le test avec le bleu de trypan
identifier les cellules mortes
à quoi sert le test avec annexine V et IP
identifier le stade d’apoptose
à quoi sert le test MTT
déterminer le stage métabolique
Comment fonctionne le test avec le bleu de trypan
le bleu de trypan s’insère dans les membranes des cellules morte parce qu’elles sont poreuses quand la cellule meurt
Comment calculer le % de viabilité
cellules vivantes/# cellules totales
Comment fonctionne le test de MTT
le MTT est réduit en formazan par les mitochondries des cellules vivantes car les cellules mortes ne sont pas capables de métaboliser. la coloration change de jaune à violet
à quelle longeur d’onde la réaction de MTT se passe
570nm